CUTL1抗体的生物背景与稀释方法

CUTL1抗体可检测内源性总CUTL1蛋白水平，CUTL1抗体可特异性识别p200亚型（全长蛋白），且不会与p110及p75亚型发生交叉反应。CUTL1抗体的特异性抗原位于小鼠物种的CDP的C-terminus的氨基酸1308-1332之间，该抗体既有非偶联形式的，也有多种偶联形式的包括琼脂糖偶联物。

图1 CUTL1抗体对海拉细胞、HCT-15细胞及K-562细胞的蛋白质印迹分析图

生物背景

CUTL1抗体能够特异性识别内源性总CUTL1蛋白。CUTL1（亦称CUX1）作为重要转录因子，参与调控细胞迁移、神经元分化及DNA修复等多种生理过程。该蛋白在肿瘤发生发展中呈现双重作用：其基因在部分癌症中出现杂合性缺失，而在更多恶性肿瘤中表达显著上调并与不良预后相关，表明低表达促进肿瘤发生、高表达驱动疾病进展。CUTL1全长蛋白约为200 kDa（p200），通过不同机制可形成p110和p75两种短亚型。CUTL1抗体为解析该蛋白在生理及病理状态下的功能提供了可靠检测工具。CUTL1抗体推荐用于小鼠、大鼠及人来源的样本，适用于切割型产物蛋白印迹法、免疫沉淀、免疫荧光、免疫组织化学（石蜡切片）及酶联免疫吸附实验等检测方法。[1]

制备方法

CUTL1抗体可通过使用对应于人CUTL1蛋白Gln639位点周围氨基酸序列的合成肽段免疫动物制备，并经过蛋白A与肽段亲和层析双重纯化。

CUTL1抗体的稀释方法

方法1：实验前，将冻干粉抗体用无菌蒸馏水稀释（或PBS稀释），将稀释后的CUTL1抗体分装5-10支（20ulx5支或10ulx10支），放入-20℃保存，用一支拿一支，避免反复冻溶。方法2：实验前,也可将冻干粉CUTL1抗体用无菌蒸馏水稀释50ul（或PBS稀释50ul）成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存，用多少吸多少。方法3：预试验可做几个梯度1：100、200、400背景高还可做上去，选一个最佳的稀释比例，再正式做，效果最好，工作液的稀释-使用抗体稀释液。

参考文献

[1] Liu K, Lin B, Zhao M, et al. Cutl1: a potential target for cancer therapy[J]. Cellular signalling, 2013, 25: 349-354.