Bax兔单克隆抗体

背景^[1-7]

Bax Rabbit Monoclonal Antibody（Bax兔单克隆抗体）是将Bax作为抗原对兔进行免疫后筛选出只产生的Bax抗体的B淋巴细胞，再将B细胞通过细胞融合技术与骨髓瘤杂交然后筛选出只分泌Bax抗体的杂交瘤细胞，最后通过层析柱纯化制的高纯度的Bax抗体兔单克隆抗体。Bax(Bcl-2 associated X protein)是Oltvai等于1993年发现的一种与Bcl-2共沉淀的蛋白质,它与Bcl-2蛋白具有部分同源性,隶属于Bcl-2家族,是一种重要的细胞凋亡促进基因。它的表达产物与Bcl-2蛋白结合为异源二聚体,调控Bcl-2的活性,抑制了Bcl-2的抗凋亡作用,是Bcl-2家族调节细胞凋亡的关键点。

研究表明Bax蛋白往往在乳腺癌、胰腺癌、结肠癌等肿瘤组织中低表达。新近的报道提出,HCCR-2通过多种渠道使P53基因的活性丧失,抑制其下游基因Bax的表达,并在恶性肿瘤的生物学进程中发挥了重要的作用,细胞凋亡的发生需要一个专门的蛋白质水解酶系统,即叫Caspase(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶)的蛋白酶家族。

Caspases通常以无活性的酶原形式存在于细胞中,在细胞凋亡信号刺激下,Caspases重新组装成含有两个大亚基和两个小亚基的成熟四聚体活性形式。活化的Caspases参与一系列蛋白质的降解作用,最终导致细胞的死亡。通常有两条主要途径激活Caspases:一条是通过细胞表面死亡受体途径,例如特异性配体结合的Fas等肿瘤坏死因子(TNF)家族,导致Caspase-8的激活,Caspase-8再依次激活下游的效应Caspase,如Caspase-3,-6,和-7。

另一条是线粒体途径,细胞内细胞凋亡信号触发线粒体释放cytochrome c,随后cytochrome c与胞浆中的凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)结合,后者募集Caspase-9并诱导其加工和激活。线粒体外膜通透性的改变和cytochrome c的释放受Bcl-2家族蛋白质的调节,Bcl-2家族中促凋亡蛋白质分子Bax和Bak可做特定的蛋白质释放通道。

细胞凋亡受多种基因调节,在参与细胞凋亡的一系列凋亡调节基因中Bcl-2基因及其同一家族的Bax基因是重要的凋亡调控基因,被认为是细胞凋亡调控的最后共同通路之一。Bax/Bcl-2以及Survivin是细胞凋亡通路上的重要调控基因,TGF-β与FGF信号通路中也可以观察到上述基因表达的改变。研究表明抑制Bcl-2、Survivin基因或者增强Bax基因表达均可有效抑制肿瘤细胞的生长,明显增强放疗或化疗对肿瘤细胞的杀伤作用。

应用^[8][9]

Bax兔单克隆抗体可用于癌症中Bax表达的临床基础研究：

人宫颈癌基因(Human cervical cancer oncogenes,HCCRs)是从宫颈癌组织及细胞系中筛选得到的,并且发现其在宫颈癌及宫颈癌细胞系中高表达。HCCRs定位于人染色体的12q,编码两种蛋白HCCR-1和HCCR-2。目前的多项科研成果显示HCCR-1与多种恶性肿瘤相关,它除了在宫颈癌中高表达外,在其它肿瘤如肝癌、卵巢癌、食管癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、肾癌及白血病中亦高度表达,甚至有研究表明HCCR-1可以作为肝癌及乳腺癌诊断的标志物。

通过检测HCCR-1及Bax在人乳腺癌组织、癌旁正常组织及乳腺腺病组织中的表达差异,检测下调HCCR-1表达对乳腺癌MCF-7细胞中Bax表达变化及对MCF-7细胞增殖、凋亡的影响,分析HCC R-1及Bax的表达与人乳腺癌临床病理学因素间的相关性,对HCCR-1及Bax表达与乳腺癌发展、侵袭以及转移的联系以及潜在的分子生物学机制进行初步研究。

HCCR-1在乳腺癌组织中表达高于癌旁正常组织及乳腺腺病组织,而Bax在乳腺癌组织中表达低于癌旁正常组织及乳腺腺病组织；抑制HCCR-1基因的表达对乳腺癌MCF-7细胞株的凋亡有促进作用,而对其增殖有抑制作用,并且与Bax基因在MCF-7细胞株中的表达负相关。HCCR-1的过量表达与乳腺癌淋巴转移、ER表达、组织学分级及pTNM临床病理分级相关,而与患者性年龄、PR表达及肿瘤大小无关；Bax的过量表达与乳腺癌淋巴转移、肿瘤大小相关,而与患者性年龄、ER表达、PR表达、组织学分级及pTNM临床病理分级无关。

参考文献

[1]Cancer statistics in China,2015[J].Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Peter D.Baade,Siwei Zhang,Hongmei Zeng,Freddie Bray,Ahmedin Jemal,Xue Qin Yu,Jie He.CA:A Cancer Journal for Clinicians.2016(2)

[2]Src Inhibition Blocks c-Myc Translation and Glucose Metabolism to Prevent the Development of Breast Cancer[J].Jain Shalini,Wang Xiao,Chang Chia-Chi,Ibarra-Drendall Catherine,Wang Hai,Zhang Qingling,Brady Samuel W.,Li Ping,Zhao Hong,Dobbs Jessica,Kyrish Matt,Tkaczyk Tomasz S.,Ambrose Adrian,Sistrunk Christopher,Arun Banu K.,Richards-Kortum Rebecca,Jia Wei,Seewaldt Victoria L.,Yu Dihua.Cancer Research.2015(22)

[3]Cancer statistics,2013[J].Rebecca Siegel,Deepa Naishadham,Ahmedin Jemal.CA:A Cancer Journal for Clinicians.2013(1)

[4]Clinical Implication of Elevated Human Cervical Cancer Oncogene-1 Expression in Esophageal Squamous Cell Carcinoma[J].Ying Liu,Ke Li,Zhonghai Ren,Shenglei Li,Hongyan Zhang,Qingxia Fan.Journal of Histochemistry&Cytochemistry.2012(7)

[5]Relevance of breast cancer hormone receptors and other factors to the efficacy of adjuvant tamoxifen:patient-level meta-analysis of randomised trials[J].Early Breast Cancer Trialists’Collaborative Group(EBCTCG).The Lancet.2011(9793)

[6]The impact of the loco-regional treatment in elderly breast cancer patients:Hypo-fractionated exclusive radiotherapy,single institution long-term results[J].Cyrus Chargari,Youlia M.Kirova,Fatima Laki,Alexia Savignoni,Thierry Dorval,Remi Dendale,Marc A.Bollet,Alain Fourquet,Francois Campana.The Breast.2010(5)

[7]p53 transcriptional pathways in breast cancer:the good,the bad and the complex[J].Alastair MThompson,David PLane.J.Pathol..2010(4)

[8]Gene-expression assays:New tools to individualize treatment of early-stage breast cancer[J].ELIZABETH DOBBE,KRISTEN GURNEY,SARA KIEKOW,JEFFERY S.LAFFERTY,JILL M.KOLESAR.American Journal of Health-System Pharmacy.2008(1)

[9]孟凯.HCCR-1及Bax在乳腺癌中表达的临床基础研究[D].山东大学,2016.