Caspase-6 p18兔单克隆抗体

背景^[1-7]

Caspase-6 p18 Rabbit Monoclonal Antibody(caspase-6 p18兔单克隆抗体)是caspase-6 p18片段作为抗原对兔进行免疫后筛选出只产生的caspase-6 p18片段抗体的B淋巴细胞，再将B细胞通过细胞融合技术与骨髓瘤杂交然后筛选出只分泌caspase-6 p18片段抗体的杂交瘤细胞，最后通过层析柱纯化制的高纯度的caspase-6 p18片段抗体兔单克隆抗体。

Caspase-6,又名为mch2,是Caspases家簇的一员,属于效应Caspase分子。Caspase-6基因编码一种34kDa、与CPP32(即Caspase-3),Ich1/Nedd2和IL-1β等高度同源的蛋白,是哺乳动物细胞中介导凋亡的重要分子,也是哺乳动物细胞凋亡的执行分子之一。将Caspase-6基因的大小亚基进行重排,可以得到一个具有与天然活性Caspase-6分子晶体结构非常相似的分子,该分子具有天然Caspase-6的活性,可以作为CrmA和Bcl-2作用的下游分子,也能识别并切割PARP和lamin A等底物,执行细胞凋亡的功能。

HER2/neu分子是癌基因erbB2的编码产物,其编码基因定位于人染色体17q21,是具有酪氨酸蛋白激酶活性的跨膜蛋白,是表皮生长因子(EGF)受体家族的成员之一。通常情况下,HER2/neu只在胎儿时期表达,到成年以后,仅有低水平表达于细胞表面。

HER2/neu的过度表达存在于多种肿瘤组织,如转移性乳腺癌(25%-30%)、炎症性乳腺癌(50%)、转移性导管癌(60-70%)、非小细胞肺癌(13-55%)、卵巢癌(18-43%)、子宫内膜癌(10-52%)、直肠结肠癌(33-85%)、肾癌(22-36%)、宫颈癌(16-50%)、胃癌(21-64%)、食道癌(10-26%)、前列腺癌(5-46%)、骨肉瘤(40-44%)及成骨肉瘤肺转移(58%)等,成为一种公认的肿瘤标志物。

本研究将信号肽、单链抗体、来源于绿脓杆菌的具有膜转位作用的肽段和重组的Caspase-6融合,构建成一种分泌型靶向促凋亡融合蛋白Immunocasp-6(e23sFv-PEⅡ(253-364)-Caspase-6),使其能特异性识别、内化并转位进入细胞中,诱导HER2阳性的肿瘤细胞凋亡。

应用^[8][9]

Caspase-6 p18兔单克隆抗体可用于研究细胞凋亡与疾病的相关性实验中Caspase-6 p18检测：

在研究骨关节炎中细胞凋亡情况的实验中,凋亡相关基因、凋亡抑制蛋白及caspase酶系、uPA、uPAR、YKL-40、α2M等在骨关节炎中的表达及意义,从而在一定程度阐明骨关节炎的发病机理,为骨关节炎的治疗和预防提供新的思路。

方法：分别通过制作骨关节炎动物模型取得软骨及滑膜标本和临床获取骨关节炎病人软骨标本,免疫组化S-P法检测凋亡相关基因、凋亡抑制蛋白及caspase酶系、uPA、uPAR、YKL-40、α2M在骨性关节炎软骨及滑膜细胞中的表达情况,TUNEL法检测骨性关节炎软骨及滑膜细胞凋亡情况,并探讨凋亡相关基因、凋亡抑制蛋白及caspase酶系、uPA、uPAR、YKL-40、α2M的表达与软骨、滑膜细胞凋亡程度之间的相关性。

动物模型制动后1周即有软骨细胞凋亡的发生,2周后凋亡呈进展趋势,4周时出现大量中层和表层软骨细胞凋亡,6周软骨细胞凋亡进一步增多,此时,大体标本见关节软骨灰黄色,出现溃疡,HE染色切片下可见软骨细胞数目减少,软骨基质“微纤化”,软骨细胞出现空泡状改变,呈现典型的OA病理特征。

Caspase酶系caspase-3在实验组的软骨细胞阳性率高于对照组,差异具有显著性（P＜0.01）;caspase-6在实验组的软骨细胞阳性率高于对照组,差异具有显著性（P＜0.05）;caspase-8在实验组的软骨细胞阳性率高于对照组,差异具有显著性（P＜0.01）;实验组关节软骨中软骨细胞凋亡程度与caspase3的表达呈正相关,差异具有显著性（rs=0.481,P＜0.05）;实验组关节软骨中软骨细胞凋亡程度与caspase6的表达呈正相关,差异具有显著性（rs=0.613,P＜0.05）;实验组关节软骨中软骨细胞凋亡程度与caspase8的表达呈正相关,差异具有显著性（rs=0.685,P＜0.05）。

实验证明凋亡抑制蛋白及caspase酶系、uPA/uPAR、YKL-40、α2M等在骨关节炎中表达异常,细胞凋亡程度与FAS、BAX、BAK、BCL-XL等凋亡相关基因的表达具有相关性,表明表达其与骨关节炎发生发展有密切关系。骨关节炎中细胞凋亡情况,凋亡相关基因、凋亡抑制蛋白及caspase酶系、uPA、uPAR、YKL-40、α2M等在骨关节炎中的表达及意义,从而在一定程度阐明骨关节炎的发病机理,为骨关节炎的治疗和预防提供新的思路。

参考文献

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