坎格雷洛的合成与分析测定

简述

坎格雷洛是由阿斯利康研制，授权The Medicines Company开发的可逆性P2Y12受体拮抗剂，具有起效快、半衰期短等特点，是一种理想的静脉抗血小板药，预防心脏冠状动脉中有害的血凝块形成，用于经皮冠状动脉介入治疗和急性冠状动脉综合征等急性血栓的潜在性预防。2015年6月22日坎格雷洛经FDA批准上市，制剂规格为50mg冻干粉针剂，商品名Kengreal。坎格雷洛的分子式为C₁₇H₂₁Cl₂F₃N₅Na₄O₁₂P₃S₂，分子量为864.286[1]。

合成工艺

对坎格雷洛的合成工艺进行改进，步骤如下：鸟嘌呤核苷经乙酰化反应，2步氯代反应得2,6-二氯-9-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)嘌呤，2,6-二氯-9-(2,3,5-三-O-乙酰基-β-D-呋喃核糖基)嘌呤经氨基取代，脱保护和硫代反应得N~6-(2-甲硫基乙基)-2-(3,3,3-三氟丙硫基)腺嘌呤核苷。硫代反应中，采用自制的三氟丙硫醇代替过硫醚试剂，提高了反应活性，6步总收率由15%提高至33%。由N~6-(2-甲硫基乙基)-2-(3,3,3-三氟丙硫基)腺嘌呤核苷合成坎格雷洛时，使用"一锅法"3步连续反应，并且后处理时采用正丁醇萃取纯化代替离子交换分离纯化，操作简便，产物坎格雷洛纯度达到99.10%[2]。

分析测定

坎格雷洛原料药有关物质的HPLC测定方法如下：采用Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)，以15 mmol·L-1磷酸氢二铵高氯酸钠溶液(用磷酸调节pH至7.0)-乙腈为流动相，梯度洗脱;流速1.0 mL·min-1，检测波长242 nm，柱温30℃。结果，研究确定了坎格雷洛4个主要已知杂质，分别为A，B，C，D，其相对主成分的响应因子依次为0.590，0.510，2.27，0.660，并据此选择了杂质对照品外标法对4个已知杂质进行定量分析，对未知杂质则采用面积归一化法进行限度控制。杂质A，B，C和D均能与主成分良好分离，检测限满足控制要求，定量限浓度分别为1.00，0.0480，0.0250，0.0750 μg·mL-1，并分别在1.00 ～8.50，0.0480～1.50，0.0300 ～1.50，0.0750～7.50 μg·mL-1范围内线性关系良好。加样平均回收率(n=9)均在90% ～ 110%之间，RSD均小于5.0%。经方法学验证，该方法既可用于坎格雷洛原料药主要工艺杂质和降解杂质A，B，C，D的准确定量，也可以对其未知杂质进行限度控制[3]。

参考文献

[1]田博.坎格雷洛中间体及其制备方法和应用:CN201610780484.5[P].CN106397516A].

[2]林汉轩、王素云、王立峰.坎格雷洛的合成工艺改进[J].中国医药工业杂志, 2020, 51(8):5.DOI:CNKI:SUN:ZHOU.0.2020-08-006.

[3]王群,孙开莉,石冰玉,等.HPLC法测定坎格雷洛原料药中的有关物质[J].中国新药杂志, 2018, 27(1):5.DOI:CNKI:SUN:ZXYZ.0.2018-01-020.