阿法替尼中间体的制备与测定研究

研究背景

阿法替尼是一种口服给药的酪氨酸激酶ErbB家族不可逆抑制药。两项随机、开放标签、多中心Ⅲ期临床试验结果表明，与培美曲塞+顺铂(LUX-Lung 3)或吉西他滨+顺铂(LUX-Lung 6)化疗相比，阿法替尼可显著延长EGFR突变的晚期非小细胞肺癌患者的无进展生存期，患者报告的咳嗽和呼吸困难症状以及健康相关生活质量也优于化疗组。阿法替尼于2013年7月获得美国FDA批准上市，一线治疗伴EGFR外显子19缺失或外显子21替代突变的晚期非小细胞肺癌[1]。本篇我们所介绍化合物阿法替尼中间体化学名称为N-(3-氯-4-氟苯基)-7-氟-6-硝基-4-喹唑啉胺，分子式与分子量分别为C₁₈H₁₄ClFN₄O₄，404.78，常温常压下表现为白色至近白色粉末。

制备方法

在非质子有机溶剂环境下，利用非磷试剂制备的Vislmeier试剂和4-羟基-5-氟-6-硝基喹唑啉进行氯化反应，反应结束后加入以上述非质子有机溶剂为溶剂的3-氯-4-氟苯胺溶液进行偶联反应，偶联反应结束后加水混匀并静置分层后，依次经洗涤，减压浓缩干燥得最终产物阿法替尼中间体。整个生产过程无废弃物产生，所用非质子有机溶剂可回收再利用，因此该生产方法具有生产过程环保，符合清洁生产的优点，最终所得阿法替尼中间体的收率可达83-89%，纯度达98%以上[2]。

以2-溴-4-氟-5-硝基苯甲腈为原料, CuI为催化剂，在微波促进下与3-氯-4-氟苯胺进行加成反应后，再与甲酰胺发生串联的胺化和缩合环化反应也可合成阿法替尼中间体。在CuI用量为20%(以2-溴-4-氟-5-硝基苯甲腈的物质的量为基准，下同)和微波促进下，n(2-溴-4-氟-5-硝基苯甲腈)：n(3-氯-4-氟苯胺)=1：1，回流反应20 min，制备得到2-溴-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-氟-5-硝基苯甲脒，收率93.8%；在CuI与4-羟基-L-脯氨酸用量均为10%[以2-溴-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-氟-5-硝基苯甲脒的物质的量为基准，下同]和微波促进下，n[2-溴-N-(3-氯-4-氟苯基)-4-氟-5-硝基苯甲脒]：n(甲酰胺)=1：2，80 ℃反应10 min可以96.4%的收率得到目标产物阿法替尼中间体[3]。

测定方法

文献报道了一种用高效液相色谱法测定阿法替尼中间体含量的方法，用于阿法替尼中间体的质量控制，是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱(C18，4.6×250mm，3μm)，以磷酸二氢钠，磷酸氢二钠和四丁基硫酸氢铵组成的缓冲盐溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱，以检测波长为254nm，柱温为25～35℃，进行高效液相色谱法分析测定。本发明的分析检测方法可以有效的将阿法替尼中间体及其杂质分开，而且该方法具有分离度高，重复性及耐用性好，分析时间短，操作简单，结果稳定可靠的优点[4]。

应用

阿法替尼中间体经取代，还原，酰化反应可以制得抗肿瘤药Afatinib。结果 显示目标化合物的结构经1 H-NMR谱和质谱确证，总收率为66%。所作合成工艺与文献报道的工艺比较，新工艺步骤短，成本低廉，操作简单，所研制的合成工艺路线各步收率均较高，无需特殊试剂和条件，预期适合工业化生产的要求[5]。

参考文献

[1]安富荣,王淑萍,归小龙.晚期非小细胞肺癌一线治疗新药阿法替尼[J].中国药师, 2015, 000(001):136-138.DOI:10.3969/j.issn.1008-049X.2015.01.048.

[2]袁相富.一种N-(3-氯-4-氟苯基)-7-氟-6-硝基-4-喹唑啉胺的生产方法:CN202010442106.2[P].CN111548314A.

[3]刘长春,顾言语,梁恩.微波促进下N-(3-氯-4-氟苯基)-7-氟-6-硝基-4-喹唑啉胺的合成[J].精细化工, 2019, 36(4):5.DOI:10.13550/j.jxhg.20180609.

[4]张贵民,崔本杰,李小飞.一种用高效液相色谱法测定阿法替尼中间体含量的方法:CN201610406784.7[P].CN107490646A.

[5]吴淑慧,杨博,赵玲.抗肿瘤药阿法替尼的合成[J].武汉工业学院学报, 2020, 039(001):37-39,43.