Radixin兔单克隆抗体

背景^[1-7]

Radixin Rabbit Monoclonal Antibody(Radixin兔单克隆抗体)是用Radixin抗原对家兔进行免疫后筛选出只产生的Radixin抗体的B淋巴细胞，再将B细胞通过细胞融合技术与骨髓瘤杂交然后筛选出只分泌Radixin抗体的杂交细胞，最后通过层析柱纯化制的高纯度的Radixin抗体兔单克隆抗体。Radixin是一种细胞骨架蛋白，在将肌动蛋白与质膜连接时可能很重要。

Radixin与ezrin和moesin的序列高度相似。radixin基因通过荧光原位杂交定位于11q23。表示假基因（RDXP2）的截断版本被分配给Xp21.3。另一个似乎缺乏内含子的假基因（RDXP1）通过Southern和PCR分析定位到11p。已发现编码不同同种型的多个可变剪接的转录物变体用于该基因。ERM家族的细胞骨架蛋白，包括埃兹蛋白和moiesin。ERM蛋白似乎作为质膜和基于肌动蛋白的细胞骨架之间的交联剂起作用。可能在肌动蛋白丝的带刺末端与质膜的结合中起关键作用。

Radixin是ERM（ezrin-radixin-moesin）家族的成员，在细胞运动，侵袭和肿瘤进展中起重要作用。它在多种正常和肿瘤细胞中表达，包括许多类型的上皮和淋巴样品。然而，它在胶质母细胞瘤中的功能仍然难以捉摸。因此，在本研究中，首先在胶质母细胞瘤细胞中检测radixin基因表达，然后用慢病毒介导的短发夹RNA（shRNA）方法进行抑制。发现在胶质母细胞瘤U251细胞中存在高水平的radixin表达。

Radixin shRNA引起radixin基因表达的下调，当将radixin沉默的细胞植入裸鼠时，与空白对照细胞或无义shRNA细胞相比，肿瘤生长受到显着抑制。此外，肿瘤中的微血管密度显着降低。血小板反应蛋白-1（TSP-1）和E-钙粘蛋白在radixin抑制的胶质母细胞瘤U251细胞中上调。相比之下，MMP9被下调。总之，研究结果表明，radixin参与GBM细胞迁移和侵袭，并暗示TSP-1，E-钙粘蛋白和MMP9作为转移诱导因子。

应用^[8][9]

Radixin兔单克隆抗体可用于Radixin介导的信号通路研究：

在Radixin表达下调对SGC-7901细胞中MRP2表达及外排功能的影响实验中为了检验radixin在MRP2及MRP家族其他成员的表达及功能上的作用,ERM三个蛋白均表达的人胃癌SGC-7901细胞被选择作为模型。本研究通过RNAi方法构建radixin表达下调的稳定细胞株,运用RT-PCR方法检测了MRP1-6成员mRNA表达水平；实时荧光PCR和western结果表明radixin的表达下调使MRP2在mRNA和蛋白水平上的表达都下调了大约50%,并由此影响了SGC-7901中calcein的外排；MTT实验结果表明radixin表达下调稳定细胞克隆中calcein外排效率的降低并非由各细胞株活力的差异所导致。

综上,在ERM三个蛋白共表达的体系中,radixin特异性调控MRP2的表达和功能。MRP蛋白家族是药物转运体家族的亚家族。MRP2是MRP蛋白家族的第二个成员,主要介导有机阴离子的主动转运。药物转运体,作为一种特殊的膜蛋白家族,在药物的吸收,分布与清除中发挥了重要的作用,药物转运体在肿瘤细胞中的过量表达所引起的多药耐药更是肿瘤治疗失败的主要原因。

因此,了解药物转运体蛋白表达功能的分子调控机制对药代动力学研究及肿瘤临床治疗具有积极作用。MRP2是MRP蛋白家族的第二个成员,主要介导有机阴离子的主动转运。有报道已证实ERM(ezrin/radixin/moesin)蛋白家族中的radixin参与了MRP2在肝细胞微管膜上定位的调控。然而有关两者关系的报道主要集中在radixin对MRP2定位的调控上,鲜有关注到radixin对MRP2表达及功能的影响；并且大部分的研究都是在以肝细胞为代表的仅有radixin单独表达的体系中进行,甚少在ERM三个蛋白都存在的体系中。

参考文献

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[9]何晓婕.Radixin表达下调对SGC-7901细胞中MRP2表达及外排功能的影响[D].复旦大学,2012.