Rab5抗体(小鼠单抗)

背景^[1-7]

Rab5抗体(小鼠单抗)是用Rab5抗原对小鼠进行免疫后筛选出只产生的Rab5抗体的B淋巴细胞，再将B细胞通过细胞融合技术与骨髓瘤杂交然后筛选出只分泌Rab5抗体的杂交细胞，最后通过层析柱纯化制的高纯度的Rab5抗体兔单克隆抗体。

Rab5抗体(小鼠单抗)用经过适当修饰的人工合成的人Rab5的一段多肽(aa2-14)作为抗原制备而成的抗Rab5小鼠单克隆抗体。克隆号为Rab5-65。Rab5抗体识别的是总Rab5(total Rab5)，可以检测内源性的Rab5。Rab5是小Rab GTPases的Ras超家族成员。

Rab5主要定位于早期内体(early endosome)，在细胞质膜上也有分布，在内吞作用早期的囊泡运输过程中起关键调节作用。Rab5 GTP和Rab5 GDP之间的构像改变是内吞过程多个步骤的限速因素。Rab5与GDP结合处于非激活状态，与GTP结合处于激活状态。这两种状态之间的转换则由GEPs(GEP/GTP exchange factors)、GDIs(GDP-dissociationi inhibitors)和GAPs(GTPase-activating proteins)所调控。

Rab通过与几种Rab5特异性的效应蛋白相互作用而发挥其功能。这些效应蛋白在内体(endosome)的特定Rab结构域(Rab domain)和Rab5形成复合物，促进Rab5载运目标货物(Rab5-cargo targets)在内体和质膜之间的循环利用。Rab5常被用作早期内体的分子标记(early endosome marker)。TLRs是天然免疫应答中一类高度保守的模式识别受体。

通过识别病原体相关的分子模式，TLRs活化后促进免疫细胞分泌促炎性细胞因子和Ⅰ型干扰素，从而清除病原微生物的感染。Rab5a是Rabs家族的一个主要成员，定位于质膜、早期内体和网格蛋白覆盖的囊泡。它负责调控早期内体与胞吞泡融合，是早期胞吞途径的一个主要限速成分。有研究发现，Rab5a不但参与了细胞内物质运输和蛋白分选，还参与了信号转导。Rab5a如何调控TLRs信号转导尚未见报道。

应用^[8][9]

Rab5抗体(小鼠单抗)可用于研究RAB5在癌症中的表达及意义：

在RABEX5及RAB5在乳腺癌中的表达及意义实验中检测不同乳腺组织中的RABEX5和RAB5的mRNA和蛋白的表达情况,初步探讨RABEX5和RAB5与乳腺癌的关系。

方法:采用免疫组织化学法,RT-PCR法和Western Blot法分别检测RABEX5及RAB5 mRNA和蛋白水平在60例乳乳腺癌、15例乳腺纤维腺瘤和15例乳腺正常组织中的表达,并检测相关临床病理指标与RABEX5及RAB5表达的关系。结果:RABEX5和RAB5 mRNA及蛋白在乳腺癌组织中的表达高于乳腺正常组织及乳腺纤维腺瘤(P<0.05),RABEX5和RAB5 mRNA及蛋白表达成正相关(P<0.05)。在乳腺癌组织T>5cm组中的表达高于T≤2cm组和2cm<T≤5cm组(P<0.05),在腋窝淋巴结转移阳性的乳腺癌中表达高于腋窝淋巴结转移阴性者(P<0.05)。在各乳腺癌组织学分级的表达差异无统计学意义(P>0.05)。

在乳腺癌HER-2(+)组与HER-2(-)组间,在ER(-)组与ER(+)组间、在PR(-)组与PR(+)组间的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。RABEX5与RAB5在mRNA及蛋白水平的表达均具有相关性(分别为:r=0.34,P<0.05;r=0.37,P<0.05)。结论:RABEX5与RAB5在乳腺癌中的表达明显高于乳腺良性病变和乳腺正常组织。RABEX5与RAB5在乳腺癌中的表达具有相关性。RABEX5及RAB5在肿瘤大小T>5cm、有腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中的表达明显增强。RABEX5与RAB5可能参与了乳腺癌的侵袭和转移。

参考文献

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[8]Assay and Stimulation of the Rab5 GTPase by the p85αSubunit of Phosphatidylinositol 3‐Kinase[J].Deborah H.Anderson,M.Dean Chamberlain.Methods in Enzymology.2005

[9]王颖建.RABEX5及RAB5在乳腺癌中的表达及意义[D].重庆医科大学,2011.