积雪草苷的作用

背景及概述^[1][2]

积雪草为伞形科植物，植物学家林奈(Linnaeus，Carolus)于1764年将积雪草归入天胡荽属(Hydrocotyle)，并定名为Hydrocotyleasiatica L.。在1879年，德国人UrBan根据花瓣的排列以及果实的棱数将其从天胡荽属中的独立出来并建立积雪草属(Centella)，积雪草归入该属并更名为Centella asiatica(L.)Urb.。积雪草主要分布于南北半球热带和亚热带地区，主产地为南非、印度、斯里兰卡、马来西亚、印度尼西亚、澳大利亚、日本等，我国亦产积雪草。

积雪草在中国的药用历史已达二千多年之久，民间常用于治疗感冒、扁桃腺炎、传染性肝炎、痢疾、跌打损伤、疔疮肿毒、外伤出血等。积雪草现代药理学研究和应用有了很大发展，表明积雪草可用于治疗抑郁症、皮肤创伤、胃溃疡、传染性肝炎、皮肤病和流行性脑脊髓膜炎等。

积雪草的化学成分复杂，主要有三萜类、黄酮类、挥发油类、多炔烯类等。其中三萜类化合物是主要的药效成分，包括积雪草苷、积雪草苷A、波热模苷、波热米苷、参枯尼苷、异参枯尼苷、积雪草酸、羟基积雪草波热米酸、马达积雪草酸等。

积雪草总皂苷是从积雪草中提取得到的皂苷类物质的总称，主要由三萜苷类物质组成，其中代表性成分主要有积雪草苷(Aisaticoside，CAS No.：16830-15-2)、积雪草苷A(Asaiticoside A；Madecassoside，CAS No.：34540-22-2)和积雪草苷B(Asaiticoside B，CAS No.：125265-68-1)。积雪草苷A也叫羟基积雪草苷，积雪草苷B和积雪草苷A是一对同分异构体。积雪草苷A和积雪草苷B与积雪草苷相比多了一个羟基，极性差异较大，较易实现分离，但积雪草苷A和积雪草苷B的差异只在于其中一个甲基归属不同，且两个不同的归属处于邻位关系，这种差异在R基(Glu-Glu-Rha糖键)影响下显得更加微小，因此积雪草苷A和积雪草苷B的分离非常困难，目前尚无有效的方法报道。

积雪草苷(a)、积雪草苷A(b)与积雪草苷B(c)的结构式分别如下：

作用机制^[1]

通过研究积雪草苷对体外培养的成纤维细胞的胶原蛋白合成的影响，以及对裸鼠增生性瘢痕动物模型的作用发现，积雪草苷可作用于成纤维细胞的细胞核，使核分裂相减少，核仁变小或缺失，随着用药浓度的增加，细胞内DNA合成减少，细胞生长呈抑制状态，抑制率最高可达73％，提示积雪草苷的作用机制是阻断成纤维细胞的增殖，从而减少胶原蛋白的合成，阻止瘢痕增生。

另一方面，用药组细胞的超微结构有明显变化，表现为粗面内质网疏松、内容物减少，核蛋白体脱颗粒现象，而且用药组胶原蛋白的合成总量较对照组明显减少，呈剂量依赖效应。这说明积雪草苷对粗面内质网这样一个蛋白合成系统可能有直接作用。

因此，积雪草苷是通过阻断成纤维细胞的生长增殖，抑制其合成分泌胶原的能力来阻止瘢痕的发生发展。积雪草苷对裸鼠增生性瘢痕动物模型作用的形态学改变除了与体外培养的成纤维细胞相似之外，还能促进瘢痕成纤维细胞调亡，使免疫细胞数目减少，血管闭塞，数量减少，胶原纤维疏松，致使整块瘢痕组织变软，体积变小，呈退行性变。

应用^[3]

研究表明，积雪草苷A与积雪草苷B的混合物具有促进伤口愈合、抗皱、抗炎、抗抑郁、促进智力等药理作用。比较积雪草苷促进伤口愈合，治疗疤痕的药理作用可以发现，积雪草总皂苷的抗炎、抗抑郁、促进智力等药理作用可能是积雪草苷A与积雪草苷B起了主要作用。同时还有研究表明，不同浓度以及不同质量组成的积雪草苷A与积雪草苷B混合物的抗炎药理具有明显的差异，。

制备^[2]

积雪草总苷粗品的制备：500g积雪草粉碎，至于提取罐中，加入10倍原料重量的70%乙醇(v/v)微沸回流提取，次提取120min，滤出药液，再加入10倍原料重量的70%乙醇(v/v)，回流提取60min，合并提取液；

提取液减压浓缩至密度1.05 g/ml，加入4倍水稀释，离心过滤，得到上柱液a，进D101大孔树脂柱，水洗至洗脱液近无色，再用3个柱体积20%乙醇(v/v)和4个柱体积50%乙醇(v/v)洗脱，收集50%乙醇(v/v)洗脱液，减压浓缩至密度1.03 g/ml，加入3%活性炭脱色，趁热过滤得上柱液b；

10%体积的上柱液b进APS2004-50型动态轴向压缩制备色谱，用50%甲醇(v/v)洗脱，根据紫外在线检测显示，分别收集羟基积雪草苷、积雪草苷洗脱液，减压浓缩，70℃干燥4h得纯品积雪草苷3.74g，羟基积雪草苷3.27g。

依据2010版药典积雪草总苷的含量测定方法，经HPLC分析检测，积雪草苷含量为94.86%，羟基积雪草苷含量为97.20%。

主要参考资料

[1] 张涛, 荣新洲, 杨荣华, 利天增, & 徐盈斌. (2006). 积雪草苷对增生性瘢痕中转化生长因子-βmrna及基质金属蛋白酶类表达的影响. 南方医科大学学报, 26(1), 67-70.

[2] 祁少海, 谢举临, & 利天增. (2000). 积雪草甙对烧伤增生性瘢痕作用的实验研究. 中华烧伤杂志, 16(1), 53-56.

[3] 张涛, 利天增, 祁少海, 徐盈斌, & 谢举临. (2005). 积雪草苷对烧伤创面愈合中细胞周期蛋白、增殖细胞核抗原表达的影响. 中华实验外科杂志, 22(1), 43-45.