多酚化合物——(-)-表没食子儿茶素

简述

(-)-表没食子儿茶素是一种化学式为C₁₅H₁₄O₇，分子量为306.267的有机物，缩略表达为EGC，是一种多酚化合物，天然存在于山茶科植物茶的干叶中，是绿茶提取物中生理活性物质的主体。常温常压下，(-)-表没食子儿茶素的性状为白色粉末，相对密度为1.695 g/cm³。

生理活性

采用连续饲喂(-)-表没食子儿茶素30 d研究其对高脂大鼠的血脂调节作用。结果表明，大鼠血清中总胆固醇，高密度脂蛋白胆固孵和低密度脂蛋白胆固醇含量与对照均无显著性差异，甘油三酯含量与对照有极显著性差异，(-)-表没食子儿茶素具有一定的降血脂作用[1]。

实验探究(-)-表没食子儿茶素对体外培养的人大肠癌LoVo细胞株生长周期的影响以及诱导该细胞凋亡的作用。 用流式细胞术，琼脂糖凝胶电泳，HE染色观察(-)-表没食子儿茶素处理LoVo细胞后其细胞周期的改变以及细胞凋亡形态学和生化方面的改变。结果， (-)-表没食子儿茶素在低浓度时对LoVo细胞的周期有明显的影响，主要是S期和M/G2期明显降低，引起LoVo细胞生长阻滞在G1期[2]。

提取方法

方法一

将茶叶进行提取，过滤，水洗，回收，过滤，树脂吸附，浓缩，结晶，离心，微波干燥，除铁后得到高含量的(-)-表没食子儿茶素产品。该制备方法具有操作简单，分离效率高，生产成本低，生产周期短，产品纯度高的优点，适用于工厂化大规模生产[3]。

方法二

以绿茶提取物为原料，经过单宁酶酶解，吸附树脂柱色谱吸附后以含水乙醇洗脱，收集富含(-)-表没食子儿茶素解吸馏分，高效外循环浓缩回收乙醇，再用反渗透膜低温浓缩，结晶处理，最终冷冻干燥得到高纯度的(-)-表没食子儿茶素单体。本发明方法简便，单体提取率及产品纯度高，制备周期短，成本低，适宜规模型工业化生产[4]。

含量测定

采用HPLC法，以表没食子基儿茶素没食子酸酯(EGCG)为对照品，外标法测定其在茶多酚提取物中的量，并分别测定EGCG与(-)-表没食子儿茶素(EGC)，儿茶素(C)，表儿茶素(EC)，没食子基儿茶素没食子酸酯(GCG)和没食子酰表儿茶素(ECG)的相对校正因子，用获得的相对校正因子计算后5种成分的量，实现一测多评。同时，用外标法测茶多酚提取物中EGC，C，EC，GCG和ECG的量。向量夹角余弦法分析，表明外标法的测定值与采用相对校正因子的计算值之间无显著性差异，说明一测多评法可以应用于茶多酚提取物及其制剂的多指标质量评价[5]。

应用与研究

(-)-表没食子儿茶素常用于分析含量鉴定/测定，药理活性筛选。文献报道了一种基于(-)-表没食子儿茶素浓度差异的茶树嫩叶识别方法，包括以下步骤：(1)针对茶树鲜叶获取其特征波段处的反射率；(2)基于茶叶中的(-)-表没食子儿茶素(以下简称EGC)浓度与特征波段反射率的关系式，获取所述茶树鲜叶的EGC浓度；(3)基于茶树嫩叶的EGC浓度阈值，对所述茶树鲜叶进行嫩叶识别。上述基于EGC浓度差异析的茶树嫩叶识别方法，能对茶树的老叶和鲜叶进行识别，准确度高，抗干扰能力强，适应性好[6]。

为了研究白茶萎凋过程中茶多酚、儿茶素组分含量变化与其合成途径中关键酶基因的动态表达，为优化白茶的萎凋工艺提供参考依据。以不同萎凋阶段的白茶为原料，分别采用福林酚(Folin-Ciocalten)比色法和高效液相色谱法(HPLC)测定茶多酚、儿茶素组分含量的变化，并以实时荧光定量PCR检测白茶萎凋过程中与儿茶素物质代谢合成相关基因(PAL、C4H、CHS、CHI、F3'5'H、F3'H、F3H、DFR、LAR、ANS、ANR和UGGT)的相对表达量。结果发现，白茶萎凋过程中茶多酚含量呈逐渐降低趋势，儿茶素组分中表儿茶素(EC)、没食子儿茶素(GC)、(-)-表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)含量整体上呈先上升后下降的变化趋势，且均在萎凋历时32 h出现最大值。实时荧光定量PCR检测结果表明，儿茶素生物合成途径关键酶基因PAL、C4H、CHI、F3H、F3'H、F3'5'H、DFR、LAR、ANR和UGGT均在萎凋历时32 h呈上调表达，CHS基因则随萎凋历时的增加呈下调表达趋势，ANS基因表达在整个萎凋过程中呈先上升后下降的变化趋势，在萎凋历时16 h达最大值。白茶萎凋过程中儿茶素合成途径关键基因表达水平具有调控儿茶素生物合成的作用。最后得出结论，在白茶萎凋过程中，儿茶素生物合成途径关键酶基因PAL、C4H、F3H、F3'H、DFR、LAR、ANR的表达与儿茶素组分单体EC、GC、EGC的积累规律基本一致，其最大值均出现在萎凋历时32 h，因此在制茶时可适当缩短萎凋时长，以提高白茶品质[7]。

参考文献

[1]李锋,王贤波.茶叶中EGC对高脂大鼠的降血脂作用[J].浙江农业科学, 2012(1):3.DOI:10.3969/j.issn.0528-9017.2012.01.013.

[2]谭晓华,张亚历.表没食子儿茶素对LoVo细胞生长周期的影响和诱导其凋亡的研究[J].中国药理学通报, 1999, 15(1):56-59.DOI:10.3321/j.issn:1001-1978.1999.01.018.

[3]顾峰.一种茶叶中EGC儿茶素的提取方法:CN201811536009.9[P].CN109354585A.

[4]张盛,刘仲华,肖文军,等.表没食子儿茶素(EGC)单体的分离纯化方法:CN201110353889.8[P].

[5]谢静,熊静,宋丽,等.一测多评法测定茶多酚中6种儿茶素类含量[J].天然产物研究与开发, 2016, 28(10):5.DOI:CNKI:SUN:TRCW.0.2016-10-013.

[6]李晓丽,魏玉震,何勇.一种基于EGC浓度差异的茶树嫩叶识别方法:CN201710016756.9[P].CN106908417A.

[7]陈静,俞滢,张丹丹,等.白茶萎凋过程中儿茶素合成关键酶基因表达分析[J].南方农业学报, 2016.