硫酸长春新碱的制备方法

背景技术

长春花是夹竹桃科长春花属一种重要的药用植物，原产南亚，非洲东部及美洲热带。我国西南、中南及华东等地现已有栽培。长春花中含有很多有价值的吲哚类生物碱，其中长春碱、长春新碱是临床广泛应用的抗肿瘤药物，具有独特的药理活性，而长春质碱和文多林既是合成长春碱类药物的原料，同时也具有药用价值。国内外对提取分离长春碱的研究由来已久，由于长春花全草中生物碱种类较多，而长春碱、长春新碱、去甲长春碱在植物汇总的含量很低，一般都在万分之几，产能问题成为长春类药物的颈瓶。

长春新碱属双吲哚生物碱类化合物，其作用靶点是微管，主要抑制微管蛋白的聚合而影响纺锤体微管的形成，使有丝分裂停止于中期；还可干扰蛋白质代谢及抑制RNA多聚酶的活力，并抑制细胞膜类脂质的合成和氨基酸在细胞膜上的转运。长春新碱对移植性肿瘤的抑制作用大于长春花碱且抗瘤谱广，特别是对造血器官的肿瘤比较有效，在临床医学上作为抗癌剂之一而被应用。

目前，国内外研究合成长春新碱的技术很多，虽然能得到长春新碱，但都存在各种各样的问题。

(1)现行合成硫酸长春新碱的工艺，是以硫酸长春总碱为原料合成的，一种是通过一步合成法即经重铬酸钠氧化，得到长春新碱，再经繁琐的纯化过程，制备出高纯度的长春新碱，经成盐得到硫酸长春新碱，该方法后处理很复杂，得到的收率很低，不适合进行生产化；

(2)另一种是通过在低温-70℃下与酸性氧化剂铬酐反应，生成长春新碱和去甲长春碱，再通过甲酰化，将去甲长春碱转化成长春新碱，将得到的长春新碱经复杂的后处理——过硅胶或氧化铝柱纯化或多次重结晶等，得到高纯度的长春新碱，经成盐得到硫酸长春新碱。该方法反应转化率低，后处理复杂，使得收率非常低，致使成本非常高，生产不具有可行性。

制备方法

一种硫酸长春新碱的制备方法，包括以下步骤：

长春总碱制备步骤：取长春总碱硫酸盐50g，加150ml纯化水溶解，滴加氨水，调节pH值至9，再加入1000ml二氯甲烷分四次进行萃取，合并有机相，去掉上层清液，将下层有机相浓缩至干，得长春总碱I：48.5g。

甲酰化反应步骤：取上述长春总碱I:48.5g，加至(预先冷却至0～5℃)甲酸48.5g和乙酸酐24.5g的混合液中使溶解，于-5℃～0℃搅拌反应60分钟，再加入500ml冰水，再缓慢加入试剂氨水，调pH值至7～9，搅拌均匀后，用2500ml二氯甲烷分四次提取，合并提取液，用纯化水洗至水层pH值呈中性，再加入100g无水硫酸钠干燥，减压回收溶剂至干，得长春总碱II：46.4g。

纯化步骤：取上述长春总碱II：46.4g，用80ml二氯甲烷溶解，备用。称取470g 200～300目硅胶，采用湿法装柱，装好柱后，将样品溶液上样，流动相为二氯甲烷：甲醇＝55：1混合溶液，进行洗脱，控制洗脱流速约为45mL/min，分段收集，以薄层色谱检测，当出现长春碱的点时，停止洗脱，同将洗脱液改为二氯甲烷：甲醇＝35:1，控制流速约为160mL/min，分段收集该段的流分，以薄层色谱检测，合并含有长春碱和长春新碱的流分，并浓缩至干，得到长春总碱III：35g。

氧化反应步骤：将上述长春总碱III：35g用2400ml四氢呋喃溶解，加入至反应釜中，搅拌下，开启冷却系统，将其冷却至-65℃；

称量重铬酸钾50.7g，加水3045ml水及100g硫酸，配制成硫酸重铬酸钾溶液；

当反应釜内的温度达到-65℃时，滴加配制好的硫酸重铬酸钾溶液，控制温度为≤-60℃，滴毕后，于-60～-65℃反应1h，取样以薄层色谱法检测，在与原料主斑点(长春碱)相同比移值处无检出斑点，反应完毕；

滴加氨水调节pH值至8，加入2300ml纯化水搅拌混匀，用3500ml的乙酸乙酯分四次提取，合并提取液，用纯化水洗至水层pH值呈中性，有机层经无水硫酸钠100g滤过脱水，减压回收溶剂至干，得长春新碱：30.6g。

成盐反应步骤：取上述长春新碱30.6g，加500ml的无水乙醇溶解，搅拌下加入10％硫酸无水乙醇(V硫酸：V无水乙醇＝1:9)溶液，调节pH值至3.8～4.3(精密试纸检测)，停止滴加，将其降温至-8℃，静置24h，快速过滤，滤饼用少量无水乙醇洗涤2～3次，抽干，于60℃下减压干燥，得硫酸长春新碱成品：25.5g。

硫酸长春新碱成品的收率为51％，经HPLC分析，纯度为97.0％，最大单杂为：1.3％。