EIF4A1抗体的应用

背景^[1-3]

EIF4A1抗体是一种针对真核翻译起始因子4A-I（Eukaryotic Initiation Factor 4A-I，简称eIF4A-I）的特异性抗体。eIF4A-I是一种在真核生物中广泛存在的蛋白质，由EIF4A1基因编码，主要参与翻译起始过程中的mRNA二级结构解开，是翻译起始复合物eIF4F的重要组成部分。EIF4A1抗体是一种在科研和临床诊断中有特定用途的抗体。它通常用于科研实验中，尤其是在免疫组化或者Western Blot等检测技术中，以检测和量化目标蛋白EIF4A1的表达水平。EIF4A1是一个重要的蛋白质，参与调控基因的翻译。在某些疾病状态下，EIF4A1的表达可能会发生改变，因此对其抗体的使用可以帮助科研人员和医生更好地理解相关疾病的病理机制或评估治疗效果。

EIF4A1抗体

一、基本信息

抗体名称：EIF4A1抗体/Anti-EIF4A1 Antibody

别名：Eukaryotic initiation factor 4A-I;eIF-4A-I;EIF4A-I;ATP-dependent RNA helicase eIF4A-1;DDX2A

分子量：约46 kDa

宿主：多为Rabbit（兔），也有小鼠来源的抗体

抗体类型：多为IgG，包括IgG1等亚型

克隆性：多克隆（Polyclonal）或单克隆（Monoclonal）

二、应用范围

EIF4A1抗体广泛应用于多种生物学实验，包括但不限于：

Western Blot(WB)：用于检测细胞或组织样本中eIF4A-I的蛋白表达水平。推荐稀释比通常为1:500～2000，但具体稀释比需根据实验条件确定。

Immunohistochemistry(IHC)：包括石蜡切片（IHC-P）和荧光切片（IHC-F），用于在组织样本中定位eIF4A-I的分布。推荐稀释比通常为1:50～400或1:400～800，具体取决于实验方法和样本类型。

Immunocytochemistry(ICC/IF)：在固定细胞中检测eIF4A-I的细胞内定位。推荐稀释比与IHC相似。

Flow Cytometry(FCM)：用于检测悬浮细胞中eIF4A-I的表达水平。通常需要较高的抗体浓度，如1～3μg/1×10^6 cells。

三、抗体特性

免疫原：通常为针对eIF4A1蛋白序列的合成肽段，具体序列因抗体而异。

纯化方式：多采用免疫亲和纯化（Immunogen affinity purified）等方法。

保存条件：一般应存放在-20°C，避免反复冻融。重溶后可在2～8°C保存一定时间，但具体期限需根据抗体说明书确定。

四、注意事项

EIF4A1抗体仅用于科研实验，严禁用于其他非科研用途。

在使用前请仔细阅读抗体说明书，了解抗体的具体信息、推荐稀释比和实验方法。

由于不同来源和批次的抗体可能存在差异，建议在使用前进行预实验以确定最佳实验条件。

应用实例^[4][5]

EIF4A1抗体可以用于神经生长因子高亲和力受体TrkA/真核翻译起始因子4A1（eIF4A1），干扰素-λ受体1（IFN-λR1）/肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）相互作用的分子机制及功能研究

神经营养素是一个由多个相关蛋白组成的家族,最初是作为感觉和交感神经元的存活因子被鉴定出来,在周围神经系统和中枢神经系统中可以调控神经元的存活、发育和功能等诸多方面。在哺乳动物中有4类神经营养素：神经生长因子(NGF)、脑衍生神经营养因子(BDNF)、神经营养素-3(NT-3)和神经营养素-4/5(NT4/5)。神经营养素主要通过两种类型的膜受体传递信号到胞内,它们分别是原肌球蛋白相关激酶(tropomyosin-related kinase,Trk)酪氨酸激酶受体以及p75神经营养素受体(p75NTR)。每种神经营养素,可以激活受体酪氨酸激酶原肌球蛋白相关激酶家族中的三个成员(TrkA、TrkB、TrkC)中的一个或多个。此外,每种神经营养素都可激活p75神经营养素受体。通过Trk受体,神经营养素激活Ras、磷脂酰肌醇3激酶、磷脂酶C-γ1以及这些蛋白调控的信号通路,如MAP激酶。

真核翻译起始因子eIF4F(eukaryotic translation initiation factor4F)是蛋白复合物,负责将核糖体募集到mRNA上。该复合物由eIF4A(RNA依赖的ATPase和RNA解旋酶)、eIF4E(帽结合蛋白)和eIF4G(脚手架蛋白)三个亚单位组成。eIF4A是ATP依赖的RNA解旋酶,负责打开mRNA5'端非编码顺序的次级结构以便核糖体的募集。eIF4A家族成员有3个,eIF4A1、eIF4A2和eIF4A3。eIF4A是一些分子如Pdcd4、Patemine A、多羟基瑙醇、15d-PGJ2、BC1RNA等抑制翻译起始的靶点。在我们的前期研究工作中证实了p75NTR和TrkA均能与RanBPM相互作用,三者形成一个复合物而TrkA抗体对真核细胞裂解液的免疫沉淀复合物的电泳分离和质谱分析得到了TrkA胞内区(intracellular domain of TrkA,TrkAICD)的新的相互作用蛋白—eIF4A1,本论文将在此基础上深入研究TrkA与eIF4A1的相互作用的分子机制及功能。在本研究中发现1.酵母双杂交、GST pull-down、EIF4A1抗体免疫共沉淀实验证实TrkAICD能与eIF4A1相互作用。2.eIF4A1主要通过N端与TrkAICD相互作用；而TrkAICD通过酪氨酸激酶结构域(TK)与eIF4A1相互作用。3.GST pull-down、EIF4A1抗体免疫共沉淀实验证实TrkA能与eIF4A1相互作用。4.体内翻译实验证实TrkA能促进5’端带有发夹结构的mRNA的翻译。5.体内泛素化实验证实eIF4A1能降低TrkA受体的泛素化。

参考文献

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[5]崔迎彬.神经生长因子高亲和力受体TrkA/真核翻译起始因子4A1（eIF4A1），干扰素-λ受体1（IFN-λR1）/肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）相互作用的分子机制及功能研究[D].北京协和医学院,2009.