AATF抗体的应用

背景^[1-3]

AATF抗体是一种在科研和临床诊断中具有特定用途的抗体，它主要用于检测和量化细胞或组织中蛋白AATF的表达水平。AATF是一种转录因子，参与调控基因的表达，并在多种生物过程中发挥作用。在某些疾病状态下，例如某些类型的癌症或免疫系统疾病，AATF的表达水平可能会发生改变。因此，对其抗体的使用可以帮助科研人员和医生更好地理解相关疾病的病理机制或评估治疗效果。

AATF抗体，即拮抗凋亡转录因子（Apoptosis Antagonizing Transcription Factor）抗体，是一种在生物学研究和医学诊断中广泛应用的工具。以下是关于AATF抗体的详细介绍：

AATF抗体

一、基本信息

抗体名称：AATF抗体（Anti-AATF Antibody）

英文名称：Apoptosis Antagonizing Transcription Factor Antibody

别名：CHE-1、DED、Rb-binding protein Che-1等

来源：通常由兔子（Rabbit）或其他动物通过免疫制备得到

类型：通常为IgG型

纯化方式：通过抗原特异性亲和纯化技术获得

二、产品特性

规格：不同供应商提供的AATF抗体规格可能有所不同，常见的规格包括20μl、50μl、100μl、200μl等

浓度：一般为几百微克/毫升（如500μg/mL），具体浓度请参考产品标签

保存条件：建议短期（如几天到几周）内保存在4°C，长期保存应分装并储存在-20°C或更低温度，避免反复冻融

缓冲液成分：可能包含磷酸盐缓冲液（PBS）、氯化钠、甘油、防腐剂（如叠氮化钠）等成分，具体成分请参考产品说明书

三、应用领域

实验应用：AATF抗体可用于多种实验技术中，包括Western Blotting（WB）、Immunohistochemistry（IHC）、Immunocytochemistry（ICC）、Immunofluorescence（IF）以及ELISA等。不同实验技术的最佳稀释倍数和浓度应由研究人员根据实验需求自行确定。

研究领域：AATF抗体在细胞生物学、分子生物学、免疫学以及肿瘤学等领域具有广泛应用。AATF作为一种重要的转录因子，参与细胞凋亡、DNA损伤修复、细胞周期调控等多种生理和病理过程。因此，AATF抗体的研究对于揭示这些过程的分子机制具有重要意义。

四、注意事项

交叉反应：不同来源的AATF抗体可能具有不同的交叉反应特性。一般来说，AATF抗体可以识别人类（Human）、小鼠（Mouse）、大鼠（Rat）等多种物种的AATF蛋白。但具体交叉反应情况请参考产品说明书。

特异性：为了确保实验结果的准确性，研究人员应选择高特异性的AATF抗体。这通常需要通过预实验来验证抗体的特异性和灵敏度。

保存条件：请按照产品说明书中的建议条件保存AATF抗体，以确保其稳定性和活性。避免将抗体暴露在高温、光照或潮湿环境中。

应用实例^[4][5]

AATF抗体可以用于心肌细胞条件培养液的体外抗肿瘤作用及其机制研究

研究鼠心肌细胞条件培养液（myocardial cells culture medium，CMCM）的体外抑瘤作用及其分子机制，并分析不同温度和蛋白酶处理对CMCM活性的影响，初步探讨其理化性质，为后期分离提纯抑瘤活性成分提供一定的理论依据和向导，为心肌源性天然抗肿瘤物质应用于鼻咽癌等肿瘤的治疗提供实验依据。

方法：1.收集成纤维细胞条件培养液、平滑肌细胞条件培养液、骨骼肌细胞条件培养液、心肌细胞条件培养液。将上述条件培养液作用于人鼻咽癌CNE-2细胞,CCK8法检测作用48h后的细胞存活率的情况。计算细胞存活率,绘制柱状图。2.用1:1的心肌细胞条件培养液原液，1:2稀释的心肌细胞条件培养液，1:4稀释的心肌细胞条件培养液，1:8稀释的心肌细胞条件培养液及1:16稀释的心肌细胞条件培养液分别干预培养人鼻咽癌CNE-2细胞12,24,36,48小时，以不具有抑瘤作用的成纤维细胞条件培养液作为阴性对照，采用CCK8法检测细胞存活情况，计算细胞存活率,并绘制生长曲线。

3. 以心肌细胞条件培养液干预培养肿瘤细胞（鼠源性肺腺癌细胞Lewis，高转移大细胞肺癌细胞L9981，人宫颈癌细胞Hela，人鼻咽癌细胞CNE-2）及正常细胞（大鼠肝细胞BRL，鼠肾小球系膜细胞MCs）48小时后，采用AATF抗体CCK8法检测细胞存活情况，计算细胞存活率。4.采用6孔板及Transwell嵌套构建心肌细胞与CNE-2细胞或鼠正常肝细胞BRL的共培养模型，观察CNE-2细胞或BRL细胞单独培养或与心肌细胞共同培养时的形态学特征。5.以不具有抑瘤作用的成纤维细胞条件培养液作为阴性对照，观察不同温度（4℃、25℃、50℃、100℃）处理心肌细胞条件培养液（CMCM）原液后，CMCM对CNE-2细胞生长的影响情况。计算细胞存活率,绘制柱状图。6.以不具有抑瘤作用的成纤维细胞条件培养液作为阴性对照，观察不同蛋白水解酶（胰蛋白酶或链霉蛋白酶）处理心肌细胞条件培养液（CMCM）原液后，CMCM对CNE-2细胞生长的影响情况。计算细胞存活率,绘制柱状图。

7.采用TUNEL试剂盒和DAPI染色剂检测CMCM原液干预CNE-2细胞0,12,24,48小时后的细胞凋亡情况，计算各处理时间点的凋亡率，绘制柱状图。8.根据前期基因芯片结果的提示，采用Real-time PCR法检测CMCM原液干预CNE-2细胞48小时后，CNE-2细胞内8个凋亡相关基因（Caspase3、Bim、PERP、ENDOG、PPP3R1、THAP1、CCAR1、AATF）的mRNA的表达情况。9.根据Real-time PCR法的验证结果，筛选出5个感兴趣的凋亡相关基因（Caspase3、Bim、PERP、ENDOG，P53），用AATF抗体Western blot法检测其蛋白表达情况.

参考文献

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[5]周杰.心肌细胞条件培养液的体外抗肿瘤作用及其机制研究[D].泸州医学院,2014.