MAN1B1抗体的应用

背景^[1-3]

MAN1B1抗体是一种在科研和临床诊断中具有特定用途的抗体，它主要用于检测和量化细胞或组织中蛋白MAN1B1的表达水平。MAN1B1蛋白在人体中扮演着重要的角色，特别是在蛋白质运输和代谢过程中。在某些疾病状态下，例如某些类型的癌症或神经系统疾病，MAN1B1的表达水平可能会发生改变。因此，对其抗体的使用可以帮助科研人员和医生更好地理解相关疾病的病理机制或评估治疗效果。

MAN1B1抗体是一种针对MAN1B1（内质网α-甘露糖苷酶1）蛋白的特异性抗体，广泛应用于生物学研究和医学诊断中。以下是关于MAN1B1抗体的详细介绍：

MAN1B1抗体

一、基本信息

抗体名称：MAN1B1抗体

靶点：MAN1B1蛋白（内质网α-甘露糖苷酶1）

来源：通常由兔子（Rabbit）、山羊（Goat）或其他动物通过免疫制备得到

克隆性：可以是单克隆（Monoclonal）或多克隆（Polyclonal）

亚型：通常为IgG

规格与价格：不同供应商提供的MAN1B1抗体规格和价格可能有所不同。例如，某些品牌的MAN1B1抗体规格为100µg/0.5ml，价格范围在61.0−279.0之间（美元）。而国内供应商的价格可能以人民币计价，具体价格请参考各供应商提供的信息。

二、产品特性

特异性：MAN1B1抗体具有高度特异性，能够准确识别并结合MAN1B1蛋白。

稳定性：产品稳定性好，能够在适当的保存条件下长期保持活性。

应用范围：MAN1B1抗体可用于多种实验技术中，包括Western Blotting（WB）、Immunohistochemistry（IHC）、Immunofluorescence（IF）、ELISA等。具体应用范围请参考各供应商提供的产品说明书。

三、保存与使用

保存条件：MAN1B1抗体应储存在适当的温度下，通常为-20°C或更低温度，以避免抗体失活。请按照供应商提供的保存条件进行储存。

使用前准备：使用前请确保MAN1B1抗体已恢复至室温，并按照实验需求进行稀释。

注意事项：在使用过程中，请避免反复冻融MAN1B1抗体，以免影响其活性和稳定性。

四、应用领域

MAN1B1抗体在生物学和医学研究中具有广泛的应用领域，包括但不限于：

肿瘤研究：MAN1B1与肿瘤的发生、发展密切相关，MAN1B1抗体可用于肿瘤相关蛋白的检测和鉴定。

细胞生物学：MAN1B1作为内质网中的一种重要酶类，参与多种细胞生物学过程。MAN1B1抗体可用于研究这些过程的分子机制。

免疫学：MAN1B1可能与免疫系统的功能调节有关，MAN1B1抗体可用于免疫学相关实验和研究。

五、供应商与品牌

市场上有多家供应商和品牌提供MAN1B1抗体产品，如Santa Cruz Biotechnology、上海雅吉生物科技有限公司、北京索莱宝科技有限公司等。不同供应商和品牌的产品在规格、价格、质量和服务等方面可能存在差异，用户可以根据自身需求选择合适的抗体产品。

应用实例^[4][5]

MAN1B1抗体可以用于改造人肾胚细胞HEK293以生产高甘露糖型溶酶体蛋白

研究构建了可以生产高比例的高甘露糖型糖蛋白和低比例的复合型糖蛋白的细胞株。

首先在HEK293细胞中敲除(Knock Out,KO)了两个高尔基体(Golgi)α1,2-甘露糖苷酶Ⅰ的控制基因(MAN1A1和MAN1A2)。结果显示单敲细胞株MAN1A1KO-24和MAN1A2KO-37中的N-糖链结构几乎没有发生改变,而在MAN1A1和MAN1A2双敲细胞(Double KO,D-KO)中,与野生型对比凝集素ConA-FITC染色后信号增加为野生型的四倍,高甘露糖型N-糖链增加,PHA-L4-FITC凝集素染色信号下降15%,复合型N-糖链减少。但复合型N-糖链依然在D-KO细胞中被检测存在,为了清除剩余的复合型N-糖链,在筛选了人源细胞中与N-糖链合成途径可能存在关联的α1,2-甘露糖苷酶Ⅰ基因后,发现敲除一个编码内质网(ER)α1,2-甘露糖苷酶Ⅰ基因(MAN1B1)可以减少几乎所有复合型糖链。在这个三敲细胞株(MAN1A1、MAN1A2和MAN1B1的Triple KO,T-KO)中,相较于野生型细胞,ConA-FITC染色后信号增加为野生型的5.3倍,高甘露糖型糖链比例相较于D-KO进一步增加,凝集素ConA-FITC染色后信号与背景几乎相同,远低于野生型数值。同时对野生型、D-KO细胞和T-KO细胞进行全细胞糖链分析,野生型存在至少27种不同类型糖链,D-KO细胞依然存在复合型糖链,在T-KO细胞株中则不能检测到复合型糖链。

利用三敲细胞(T-KO)表达重组溶酶体蛋白α-半乳糖酶A(GLA)和溶酶体酸性脂肪酶(LIPA),MAN1B1抗体免疫印迹(Western Blot)结果显示在T-KO细胞中表达的重组溶酶体蛋白上的糖链对糖苷酶EndoHf处理敏感,暗示T-KO细胞表达的GLA和LIPA蛋白上的N-糖链为高甘露糖型糖链。同时使用野生型细胞和T-KO细胞表达人源重组蛋白EGFPFLAG-HyHEL10和溶酶体酸性脂肪酶后,通过MALDI-TOF飞行质谱对蛋白上糖链进行分析,在野生型中抗体分子上糖链主要为复合型,T-KO细胞中为高甘露糖型。野生型细胞溶酶体酸性脂肪酶分子上糖链既有复合型又有高甘露糖型,而T-KO细胞则全部为高甘露糖型,并且主要为Man9-GlcNAc2和Man8-GlcNAc2的形式。

参考文献

[1]N-glycosylation heterogeneity and the influence on structure,function and pharmacokinetics of monoclonal antibodies and Fc fusion proteins[J].Fabian Higel;;Andreas Seidl;;Fritz Sörgel;;Wolfgang Friess.European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics,2016

[2]Lysosomal Storage Diseases:From Pathophysiology to Therapy[J].Giancarlo Parenti;;Generoso Andria;;Andrea Ballabio.Annual Review of Medicine,2015

[3]Lysosomal Physiology[J].Haoxing Xu;;Dejian Ren.Annual Review of Physiology,2015

[4]Recent advances in mammalian protein production[J].Ashok D.Bandaranayake;;Steven C.Almo.FEBS Letters,2014

[5]金则成.改造人肾胚细胞HEK293以生产高甘露糖型溶酶体蛋白[D].江南大学,2018.