TSC1抗体的应用

背景^[1-3]

TSC1抗体也称为错构素蛋白抗体，是针对TSC1（tuberous sclerosis complex 1）蛋白的特异性抗体。TSC1蛋白是一种肿瘤抑制蛋白，参与细胞生长和增殖的调控，其突变与多种疾病相关，包括结节性硬化症（tuberous sclerosis complex,TSC）等。TSC1蛋白：TSC1蛋白是一种肿瘤抑制蛋白，与TSC2蛋白共同形成TSC复合物，参与调节mTOR信号通路，从而调控细胞生长和增殖。TSC1蛋白的突变或缺失可导致mTOR信号通路的异常激活，进而引发多种疾病。

结节性硬化症：结节性硬化症是一种常染色体显性遗传病，主要表现为皮肤、脑、肾等多器官系统的良性肿瘤和错构瘤。TSC1和TSC2基因的突变是结节性硬化症的主要致病原因。以下是对TSC1抗体的详细介绍：

TSC1抗体

一、基本信息

英文名：TSC1 antibody或Anti-TSC1 antibody

产品形式：通常为液体形式，如PBS缓冲液中的溶液

规格：不同供应商提供的规格可能有所不同，如50μl、100μl、50μg/100μg等

纯度：高纯度，如≥95%

保存条件：一般需储存在-20°C或更低温度，避免反复冻融

二、特性

特性：TSC1抗体通常具有较高的特异性和敏感性，能够特异性地识别并结合TSC1蛋白。

适用范围：

研究领域：广泛应用于癌症、表观遗传学、细胞信号传导、心血管等疾病的生物标志物研究，以及神经系统、离子通道、微生物学、病毒学等领域。

实验技术：可用于Western Blot（WB）、免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）、免疫沉淀（IP）等多种实验技术中，以检测TSC1蛋白的表达水平、定位及与其他分子的相互作用。

三、使用注意事项

储存条件：严格按照供应商提供的储存条件进行储存，避免抗体失效。

稀释比例：最佳稀释比例需根据实验需求和供应商建议进行确定。通常，WB的稀释比例可能在1:500-1:2000之间，IHC和IF的稀释比例可能在1:20-1:200之间。

实验操作：在使用TSC1抗体进行实验时，应遵循标准的实验操作流程，以确保实验结果的准确性和可靠性。

应用^[4][5]

TSC1抗体可以用于TSC1对Tfh细胞分化和自身免疫的调控

研究发现TSC1对Tfh细胞/GC B细胞在稳态下和抗原免疫应答中发挥不同作用。在稳态下,T细胞的TSC1抑制GC-Tfh细胞的分化及随后GC B细胞的形成和自身抗体的产生。在免疫应答中,T细胞的TSC1对GC-Tfh细胞的有效扩增、GC B细胞的诱导和抗原特异性抗体反应是必需的,部分机制是保持GC-Tfh细胞线粒体的完整性,促进细胞的存活。此外我们在混合骨髓嵌合小鼠中发现,TSC1缺陷导致野生型CD4+T细胞中GC-Tfh细胞分化增强的现象,这一发现提示了自身抗体和自身免疫性疾病发展的潜在机制。

研究方法1.TSC1抗体流式细胞术检测TSC1f/f-CD4cre小鼠和野生型小鼠脾脏Tfh和GC B细胞百分比,及GC-Tfh细胞ICOS和Bc16的表达水平。2.构建混合骨髓嵌合小鼠6-8周后,流式细胞术检测小鼠脾脏Tfh细胞的增殖和存活,及ICOS,slam,Bc16,c-maf的表达,并检测GC B细胞icam1和slam的表达。3.NP17-CGG免疫小鼠10天后,流式细胞术检测小鼠脾脏Tfh和GC B细胞百分比,及GC-Tfh细胞的增殖和存活。然后检测GC-Tfh细胞ROS的产生,线粒体膜电位变化和iNOS水平。

4. TSC1抗体ELISA检测小鼠血清中IgG1、IgG2b和IgG3的水平,及抗ds-DNA抗体水平。流式细胞术检测B细胞胞内IgG1和IgG2b的表达。5.NP1-7-CGG免疫小鼠21天,TSC1抗体ELISA检测免疫前和免疫后7、14、21天血清中抗原特异性抗体的效价。

TSC1抗体结果1.与WT小鼠相比,TSC1f/f-CD4cre小鼠脾脏Tfh和GC B细胞增加,GC-Tfh细胞ICOS和Bc16表达上调。2.与WT/WT小鼠相比,WT/KO小鼠脾脏CD45.1+(WT)和CD45.2+(TSC1KO)细胞中Tfh细胞均增加。且WT/KO小鼠CD45.2+细胞Bc16、cMaf、ICOS和SLAM表达水平升高,GC B细胞ICAM1和SLAM的水平升高。3.TSC1KO小鼠脾脏GC-Tfh中ROS增加损害线粒体的完整性,并导致GC-Tfh细胞在对抗原的免疫应答过程中死亡。

参考文献

[1]Dysregulated TFR and TFH cells correlate with B-cell differentiation and antibody production in autoimmune hepatitis.[J].Liang Ma;;Liwen Zhang;;Juan Dai;;Yun Zhuang;;Yanbo Ding;;Jianping Chen.Journal of cellular and molecular medicine,2020

[2]A Thpok-Directed Transcriptional Circuitry Promotes Bcl6 and Maf Expression to Orchestrate T Follicular Helper Differentiation[J].Melanie S.Vacchio;;Thomas Ciucci;;Yayi Gao;;Masashi Watanabe;;Mariah Balmaceno-Criss;;Mitchell T.McGinty;;Allan Huang;;Qi Xiao;;Cameron McConkey;;Yongmei Zhao;;Jyoti Shetty;;Bao Tran;;Marion Pepper;;Golnaz Vahedi;;Marc K.Jenkins;;Dorian B.McGavern;;Rémy Bosselut.Immunity,2019

[3]Plasma cell differentiation during the germinal center reaction.[J].Ise Wataru;;Kurosaki Tomohiro.Immunological reviews,2019

[4]Role of allergen-specific T-follicular helper cells in immunotherapy.[J].Yao Yin;;Wang Zhi-Chao;;Yu Di;;Liu Zheng.Current opinion in allergy and clinical immunology,2018

[5]张诗梦.TSC1对Tfh细胞分化和自身免疫的调控[D].南方医科大学,2021.