VHL抗体的应用

背景^[1-3]

VHL抗体即针对视网膜血管瘤肿瘤抑制因子（Von Hippel-Lindau tumor suppressor，简称vHL）的抗体，是一种在生物学和医学研究中广泛应用的工具。VHL抗体是研究vHL蛋白功能及其在生物学和医学中作用的重要工具。通过利用这一抗体进行各种实验技术可以进一步揭示vHL蛋白的生理和病理作用机制。

VHL抗体

一、基本信息

目标蛋白：视网膜血管瘤肿瘤抑制因子（vHL）

抗体类型：可以是多克隆抗体或单克隆抗体，具体取决于制备方法和宿主来源。例如，有兔多克隆抗体（如视网膜血管瘤肿瘤抑制因子(vHL)多克隆抗体）和山羊IgG亚型抗体（如VHL(M-20)）等。

应用领域：VHL抗体广泛应用于科学研究，包括Western Blotting（WB）、免疫组织化学（IHC）、免疫细胞化学（ICC/IF）、免疫沉淀（IP）和酶联免疫吸附测定（ELISA）等多种实验技术。

二、抗体特性

来源：多克隆抗体通常由兔子、山羊等动物免疫制备，而单克隆抗体则通过杂交瘤技术制备。

Ig类型：多为IgG类型，但也可能根据具体产品有所不同。

纯化方式：通常采用抗原特异性亲和纯化，以确保抗体的高纯度和特异性。

标记物：部分VHL抗体可能带有特定的标记物，如荧光标记、酶标记等，以便于在实验中进行检测和观察。但并非所有VHL抗体都带有标记物。

三、使用范围与稀释比例

VHL抗体在多种实验技术中均有应用，具体的稀释比例需要根据实验条件和抗体类型进行优化。以下是一些常见的应用范围及建议的稀释比例范围：

Western Blotting（WB）：通常用于检测细胞或组织样品中vHL蛋白的表达水平。稀释比例建议范围从1:50到1:400不等。

免疫组织化学（IHC）：在组织切片中检测vHL蛋白的定位和分布。稀释比例可能因实验条件和切片类型（如石蜡切片或冰冻切片）而有所不同，建议范围从1:10到1:500。

免疫细胞化学（ICC/IF）：在细胞水平上检测vHL蛋白的亚细胞定位。稀释比例通常与IHC相似。

免疫沉淀（IP）：用于从细胞或组织提取物中纯化vHL蛋白及其复合物。IP实验中的抗体稀释比例可能需要根据实验条件进行特别优化。

酶联免疫吸附测定（ELISA）：用于定量检测样品中vHL蛋白或相关分子的含量。ELISA实验中的抗体稀释比例通常较为严格，建议按照产品说明书或相关实验协议进行操作。

四、保存条件与注意事项

保存条件：VHL抗体通常建议保存在-20℃或更低温度，以避免抗体降解和失活。部分产品可能需要在4℃下短期保存（如用于频繁使用的抗体）。避免反复冻融以保持抗体的活性和稳定性。

注意事项：在使用VHL抗体进行实验时，应严格按照产品说明书或相关实验协议进行操作。注意实验环境的清洁和无菌操作，以避免抗体受到污染。此外，由于不同来源和批次的抗体可能存在差异，因此建议在使用新批次抗体前进行预实验以优化实验条件。

应用^[4][5]

VHL抗体可以用于NDRG2调控VHL/HIF信号通路抑制肾癌细胞增殖及转移的实验研究

比较NDRG2、pVHL、HIF-1α和HIF-2α在肾透明细胞癌和正常肾组织中的表达，研究NDRG2与pVHL、NDRG2与HIF-1α及NDRG2与HIF-2α表达的相关性。探讨NDRG2抑制肾癌细胞增殖及转移的分子机制，为肾癌的靶向治疗提供理论基础。通过携带NDRG2的腺病毒载体感染BMSCs，以观察基因修饰对BMSCs生物学特性的影响。为进一步研究BMSCs应用于肾肿瘤的靶向治疗奠定基础。

方法1NDRG2、pVHL、HIF-1α和HIF-2α在肾透明细胞癌和正常肾组织中的表达及相关性研究1.1VHL抗体免疫组织化学法检测NDRG2、VHL、HIF-1α和HIF-2α在肾透明细胞癌和正常肾组织中的表达1.2VHL抗体免疫组织化学法结果的判定免疫组化染色的程度和范围通过半定量发分析。根据细胞浆的染色及染色细胞所占的百分率进行评价。不着色：0分，淡染色：1分，适中染色：2分，深染色：3分。染色细胞百分率＜5%：评分为0分，5%至25%：评分为1分，26%至50%：评分为2分，51%至75%：评分为3分，>75%：评分为4分。染色得分与染色细胞百分率得分各自相乘，即为阳性染色系数。阳性染色系数为：0分为：阴性(-)，弱阳性为1至4分(+)阳性为5～8分(++)，强阳性(+++)为9～12分，采集图片时取典型视野进行拍照。

参考文献

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[2]Cardiomyocyte-Specific Transforming Growth FactorβSuppression Blocks Neutrophil Infiltration,Augments Multiple Cytoprotective Cascades,and Reduces Early Mortality After Myocardial Infarction[J].Peter P.Rainer;;Scarlett Hao;;Davy Vanhoutte;;Dong Ik Lee;;Norimichi Koitabashi;;Jeffery D.Molkentin;;David A.Kass.Circulation Research,2014(8)

[3]The therapeutic potential of bone marrow‐derived mesenchymal stromal cells on hepatocellular carcinoma[J].Juan Bayo;;Mariano Marrodán;;Jorge B.Aquino;;Marcelo Silva;;Mariana G.García;;Guillermo Mazzolini.Liver Int,2014(3)

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[5]高磊.NDRG2调控VHL/HIF信号通路抑制肾癌细胞增殖及转移的实验研究[D].第四军医大学,2014.