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对HGC-27/人胃癌细胞(未分化)的相关研究

发布日期:2020/2/14 9:30:13

背景及概述[1]

类型:贴壁生长。形态:CM13-1培养液中,贴壁,成纤维细胞样,圆形菱形。分离基物:人,胃,淋巴结转移。传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约0.5min取出。传代用12mL CM13-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养。生长条件:37℃,5%CO2,CM13-1培养液。CM13-1培养液:90%RPMI-1640+20%FBS。RPMI-1640:1640培养液,含谷氨酰胺。存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

相关研究[2-5]

李小妹等人探讨了木瓜总三萜诱导的胃癌细胞HGC-27凋亡作用与PI3K/Akt/NAG-1信号通路的关系。方法:MTT法及平板克隆检测木瓜总三萜对HGC-27细胞增殖影响;显微镜下观察木瓜总三萜处理后细胞形态变化;Ho-echst 33258染色检测木瓜总三萜对HGC-27细胞凋亡形态变化;Western blot检测HGC-27细胞中PI3K/Akt/NAG-1信号通路相关蛋白表达。

结果:MTT及平板克隆实验结果表明木瓜总三萜对HGC-27细胞增殖呈抑制作用,其抑制作用随剂量加大及时间延长而增强;木瓜总三萜处理后胃癌细胞其原圆梭形态明显变圆漂浮且出现细胞碎片,随着剂量升高越加明显;Hoechst 33258染色结果表明木瓜总三萜可诱导HGC-27细胞凋亡;Western blot检测表明木瓜总三萜处理组除Akt蛋白水平无明显变化外,PI3K、p-Akt、NAG-1的蛋白表达水平均显著低于空白对照组(P<0.05)。

结论:木瓜总三萜能抑制胃癌细胞HGC-27的增殖,可诱导其凋亡,其作用机制可能与其抑制PI3K/Akt信号通路表达有关。

冯莉芳等人探讨了萝卜硫素对人胃癌细胞HGC27的抑制作用及其可能的作用机制。

方法:以HGC27人胃癌细胞株为研究对象,设置萝卜硫素低、中、高剂量组(20、40、80μg/mL)和溶剂对照组,CCK8法测定细胞存活率,DCFH-DA法测定ROS活性,HPLC法测定ATP含量,Western Blot测定Bax、Bcl-2及p53蛋白的表达水平。结果 HGC27细胞经过不同浓度萝卜硫素干预处理后,低、中、高剂量组的HGC27细胞相对存活率显著降低(P<0.05),随着剂量升高存活率降低的越明显,而且还随着干预处理时间的延长持续降低;细胞中ROS和APT水平经药物干预后显著降低(P<0.05);免疫印迹结果发现Bax和p53蛋白表达水平随剂量升高显著增加,而Bcl-2蛋白表达水平随药物剂量升高显著降低(P<0.05)。结论 萝卜硫素能够抑制人胃癌细胞HGC27的生长,其机制可能与萝卜硫素清除细胞内ROS、抑制细胞APT生存、下调抗凋亡蛋白Bcl-02及上调促凋亡蛋白Bax和抑癌蛋白p53的表达有关。

王丽等人探讨了甲磺酸伊马替尼对胃癌细胞株HGC-27增殖、凋亡及迁移的影响。方法:CCK-8法检测甲磺酸伊马替尼对HGC-27细胞增殖的影响;流式细胞术检测药物对HGC-27凋亡的影响;Western blot检测凋亡蛋白bax、caspase-3的表达;细胞划痕实验观察药物对HGC-27的迁移作用。结果:CCK-8法结果显示,甲磺酸伊马替尼抑制HGC-27细胞增殖,并随着药物浓度增大,抑制作用愈加明显(P <0. 01);流式结果显示,甲磺酸伊马替尼能促进HGC-27的凋亡,药物浓度越大,促凋亡作用愈大(P <0. 01);Western blot结果显示,甲磺酸伊马替尼能够增加凋亡蛋白bax、caspase-3的表达(P <0. 05);细胞划痕实验显示,甲磺酸伊马替尼处理48 h后,明显抑制HGC-27的迁移(P <0. 01)。结论:甲磺酸伊马替尼能够有效抑制HGC-27的增殖、诱导其凋亡并阻碍其迁移。

苏宇等人研究了miR-31在胃癌患者中的表达,探讨miR-31对胃癌HGC-27细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法收集胃癌患者标本39例,同时收取相应的癌旁组织20例。通过荧光定量PCR方法检测各组织中miR-31的表达水平。以脂质体为载体将miR-31模拟物转染至HGC-27细胞,CCK-8方法检测细胞增殖能力变化,Transwell实验检测HGC-27细胞侵袭和迁移能力变化。结果 miR-31在胃癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织,P<0.01。过表达miR-31能够显著抑制HGC-27细胞的增殖,显著抑制HGC-27细胞的侵袭和迁移能力(P<0.01)。结论 MiR-31在胃癌中低表达,并抑制胃癌细胞系HGC-27的增殖、迁移和侵袭。

主要参考资料

[1] HGC-27/人胃癌细胞(未分化)说明书

[2] 李小妹,冯旻璐,张媛媛,李小琴,张永峰,贺海波.木瓜总三萜诱导人胃癌细胞HGC-27凋亡的作用及机制研究[J/OL].中药材,2019(03):662-666[2019-04-05].https://doi.org/10.13863/j.issn1001-4454.2019.03.040

[3] 冯莉芳,涂毅,张玲莉.萝卜硫素对人胃癌细胞HGC27的抑制作用及其机制研究[J/OL].广东药科大学学报,2019(01):1-3[2019-04-05].https://doi.org/10.16809/j.cnki.2096-3653.2018112108.

[4] 王丽,张洪,范月莹,吕舰.甲磺酸伊马替尼对胃癌细胞HGC-27增殖、凋亡及迁移的影响[J].中国药师,2018,21(11):1916-1919.

[5]苏宇,宋刚,张晓农,刘丽波.Mi R-31在胃癌组织中低表达并抑制HGC-27细胞增殖、迁移与侵袭[J].解剖科学进展,2018,24(05):469-471+475.

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