对Hep-3B/人肝癌细胞系Hep-3B的相关研究

背景及概述^[1]

Hep-3b细胞建系于1979年，源自一位患有肝癌的7岁黑人男童。该细胞产生甲胎蛋白（alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原（BHsAg)、白蛋白、巨球蛋白、α-抗胰蛋白酶（alphal-antitrypsin)、转铁蛋白、补体（C3)、C3活性载体，纤维原等，具有广泛的研究价值。培养基:90%高糖DMEM+10%FBS。生长条件：95%空气+5%二氧化碳，37摄氏度。生长特性：贴壁生长。存储条件：50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮。

相关研究^[2-5]

刘璐等人探讨了复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞增殖的影响。方法运用细胞计数法(CCK-8)检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞的抑制作用。采用流式细胞术检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞周期的及凋亡的影响。结果复方苦参注射液对Hep3B细胞的增殖有明显的抑制作用，且存在时间-浓度依赖性。随着复方苦参注射液浓度的增加，凋亡细胞的比例逐渐增大，G1期细胞逐渐增加，S期细胞逐渐减少。结论复方苦参注射液可以抑制Hep3B细胞的生长，可能与促进细胞凋亡并引起细胞阻滞有关。

汪庆强等人探究了脐血清源性外泌体对肝癌Hep3B细胞活力的影响。方法:提取健康足月胎儿脐血清源性外泌体，加入细胞培养基孵育24小时，MTT检测细胞活力变化，倒置显微镜观察细胞形态变化，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot检测Cleaved-Caspase3表达变化。结果:脐血清源性外泌体能显著抑制肝癌Hep3B细胞活力，导致细胞发生形态学改变、凋亡细胞比例增加及活化的Caspase3水平上升。结论:脐血清源性外泌体能诱导肝癌细胞发生凋亡，具有潜在的抑制肿瘤的生物学活性。

谢淑雯等人探讨了巨头刺草皂甙D（GD）对人原发性肝癌Hep 3b细胞的抑制作用及其作用机制。方法采用MTT法及细胞克隆法检测GD对肝癌细胞Hep 3b的抑制作用；运用光学显微镜和Hoechst荧光染色观察细胞形态的变化和凋亡现象；应用流式细胞术检测细胞周期的变化以及线粒体膜电位的变化；运用Western blotting检测细胞内Bcl-2、PARP蛋白及MAPK通路关键蛋白的变化。

结果 GD具有较强的抗肝癌细胞Hep 3b作用，并且其抑制作用具有时间和剂量依赖性，在72 h处的半数抑制浓度IC50=16.08μmol·L-1。细胞周期分析表明，随着GD浓度增加，Hep 3b细胞出现sub-G1凋亡峰，凋亡率从3.3%增加到33.6%。但细胞周期无明显改变。Hoechst荧光染色及流式细胞术分析发现GD作用Hep 3b细胞后，细胞核能发出明显的蓝色荧光点，并降低该细胞线粒体膜电位。通过Western Blotting发现，GD作用Hep 3b细胞后，Bcl-2蛋白表达减少，凋亡标志分子PARP活化。MAPK通路蛋白Erk磷酸化形式表达下降，p38和JNK磷酸化形式表达增加。结论 GD可通过诱导肝癌细胞凋亡发挥抗肝癌活性，该作用可能与MAPK通路有关。

刘传亮等人探讨了Panx1基因过表达对人肝癌Hep3B细胞增殖及迁移的影响。方法构建Panx1过表达慢病毒质粒和过表达空载慢病毒质粒，包装生产慢病毒，分别转染Hep3B细胞(过表达组、对照组)。用Western blotting法检测Hep3B细胞Panx1、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达，CCK-8法检测细胞增殖能力(OD值)，划痕实验检测细胞迁移能力(相对迁移距离、划痕愈合率)。结果过表达组Panx1、E-cadherin蛋白相对表达量较对照组高(P均<0.05)，Vimentin蛋白相对表达量较对照组低(P<0.05)；各时间点(0 h除外)OD值较对照组低(P均<0.05)；相对迁移距离较对照组低，划痕愈合率较对照组高(P均<0.05)。结论 Panx1基因过表达可抑制Hep3B细胞增殖与迁移。

主要参考资料

[1] Hep3b细胞说明书

[2] 刘璐，李川，韩涛.复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞增殖影响[J].临床军医杂志，2018，46(09):1011-1013.

[3] 汪庆强，李雯慧，方诚，范明，张小晶，唐明尧，付航，陈勇.人脐血清源性外泌体对肝癌Hep3B细胞活力的影响[J].现代肿瘤医学，2018，26(20):3173-3176.

[4] 谢淑雯，王燕妮，罗慧燕，卢子滨，余林中，刘俊珊.巨头刺草皂甙D对人肝癌Hep 3b细胞的抑制作用[J].南方医科大学学报，2017，37(09):1211-1216.

[5]刘传亮，谭雪莹，史光军.Panx1基因过表达对人肝癌Hep3B细胞增殖及迁移的影响[J].山东医药，2017，57(33):35-37.