LIF抗体的应用

背景^[1-3]

LIF抗体是指能够识别并结合到人体中的一种蛋白质LIF（Leukemia Inhibitory Factor，白血病抑制因子）的抗体。LIF是一种重要的细胞因子，能够调节胚胎发育、神经发育、免疫反应等多种生物学过程，并在体内发挥着重要的生理功能。

LIF抗体，包括单克隆抗体和多克隆抗体，在实验室研究中具有广泛的应用。例如，它们可以用于组织化学染色和印迹实验以识别LIF，也可以用于多种学实验，如WB、ICC、IHC-P、IHC-F、ELISA、IP、IF、FCM等，作为一抗、二抗、标签抗体、内参抗体、信号通路抗体、细胞凋亡抗体等。这些抗体产品通常具有高灵敏度和高特异性，能够提供一致性的结果，且可重现性好。

此外，LIF在肿瘤治疗中也被视为一个潜在靶点。LIF可以促进某些类型的肿瘤细胞的增殖、存活和转移，并可能通过调控肿瘤干细胞的自我更新和分化来影响肿瘤的发展。因此，一些研究尝试使用LIF的抗体、抑制剂或小分子化合物来抑制LIF的生物学功能，以达到抑制肿瘤生长和转移的目的。

LIF抗体

LIF（Leukemia Inhibitory Factor，白血病抑制因子）抗体在实验室研究和潜在的临床应用中发挥着多种作用。以下是LIF抗体的一些主要作用：

1.实验室研究中的识别与定位：LIF抗体可以特异性地识别和结合到LIF蛋白上，使得研究人员能够通过免疫组化、免疫荧光、Western Blot等技术来检测和定位LIF在细胞、组织或体液中的表达。这对于理解LIF在生物过程中的功能作用至关重要。

2.疾病机制的研究：LIF抗体可以帮助研究LIF在不同疾病中的表达模式，从而揭示LIF与疾病发生发展的关系。例如，LIF在胚胎植入、胎盘发育、神经保护和炎症过程中都有重要作用，因此LIF抗体的应用有助于了解这些过程中的分子机制。

3.药物研发：LIF抗体可以用于筛选和鉴定能够调节LIF功能的药物或候选药物。这对于开发针对LIF相关疾病（如不孕不育、神经退行性疾病、炎症性疾病等）的治疗药物具有重要意义。

4.治疗潜在靶点：LIF在某些类型的肿瘤（如乳腺癌、卵巢癌等）中表达上调，并可能促进肿瘤细胞的增殖和存活。因此，LIF抗体可以作为治疗这些肿瘤的潜在靶点，通过中和LIF的生物学活性来抑制肿瘤的生长和转移。

5.免疫应答的调节：LIF在免疫应答中也发挥着重要作用，能够影响T细胞和B细胞的活化、增殖和分化。因此，LIF抗体可能用于调节免疫应答，对于治疗自身免疫性疾病或增强疫苗效果等具有一定的潜力。

6.疾病诊断与预后评估：LIF抗体还可以用于开发诊断试剂盒，用于检测血清或体液中LIF的水平，从而辅助疾病的诊断和预后评估。

应用^[4][5]

LIF抗体可以用于LIF在胃癌中的表达及对胃癌细胞生物学行为的影响

研究LIF在胃癌中的表达情况与病理学参数及预后的相关性,评价其在胃癌诊断方面的价值,探索LIF对胃癌细胞增殖、侵袭、转移等生物学行为的影响,并进一步探讨具体作用机制。

方法1.利用LIF抗体ELISA技术检测208例胃癌患者、67例慢性萎缩性胃炎患者和70例正常人LIF因子外周血表达水平。免疫组织化学染色检测128例胃癌石蜡切块LIF和LIFR在组织中的表达。通过LIF抗体Western blot和qRT-PCR方法检测40例胃癌新鲜组织样本及配对的癌旁正常组织中LIF和LIFR蛋白和mRNA的表达情况,并与临床病理学参数及预后进行相关性分析。

2. 通过LIF抗体筛选LIF低表达、LIFR高表达的胃癌细胞株(Western blot和qRT-PCR方法)。利用RNA干扰技术,借助质粒为载体,敲低胃癌细胞株中LIFR的表达。通过CCK-8、EdU和平板克隆实验检测加入外源性LIF因子及沉默LIFR基因后,对胃癌细胞增殖能力的影响。采用流式细胞技术检测LIF及沉默LIFR对胃癌细胞的细胞周期分布和凋亡的影响。采用Transwell实验观察LIF及沉默LIFR对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响。通过裸鼠体内成瘤模型探讨LIF及沉默LIFR后对肿瘤生长的影响。

3. LIF抗体Western blot法和细胞免疫荧光染色技术检测LIF对Hippo-YAP信号通路中核心元件的影响及相互关系。利用siRNA沉默信号通路下游YAP蛋白表达后,通过CCK-8实验检测LIF是否主要通过Hippo-YAP信号对胃癌细胞增殖产生影响。

LIF抗体结果1.胃癌患者、慢性萎缩性胃炎患者、正常人外周血LIF水平分别为8.650±6.282 pg/ml、4.325±1.824 pg/ml、3.344±1.918 pg/ml。胃癌患者LIF水平明显高于慢性萎缩性胃炎患者(P=0.003)和正常人(P<0.001)。LIF诊断胃癌的界值为5.585 pg/ml,诊断敏感度：88.14%,特异度：81.82%,准确度：85.64%。免疫组化结果显示：LIF和LIFR在胃癌中的阳性表达率明显高于正常粘膜(P<0.001),与肿瘤分化程度(P=0.021)、脉管浸润(P=0.001)、T分期(P=0.001)、淋巴结转移(P=0.001)及pTNM分期(P=0.012)存在相关性。相同肿瘤组织中LIF与LIFR的蛋白表达量及mRNA含量呈正性相关(P<0.001,P<0.001)。利用Cox回归多因素生存模型分析患者的预后相关因素发现LIF及LIFR与预后紧密相关,是独立的预后风险因素(P=0.009,P=0.034)。

2. MGC803细胞在几种常见胃癌细胞系中LIF的表达量最低,LIFR的表达量最高。加入外源性LIF可以显著增强细胞的增殖、侵袭、迁移、抗凋亡能力和裸鼠体内成瘤速度(P<0.001)。沉默LIFR后,与阴性对照组相比,细胞的上述恶性生物学行为能力被明显减弱,且在LIFR被沉默的细胞中再次加入LIF无法发挥上述LIF的肿瘤促进作用。

3. LIF可以显著降低Hippo-YAP信号通路中核心元件的磷酸化水平(P<0.001),并促进YAP蛋白的核内转移。另外,LIF无法促进YAP-siRNA细胞的增殖。

结论1.LIF参与了胃癌内在的发生过程,能够用于胃癌的诊断,并且与胃癌的增殖、侵袭、转移及患者预后紧密相关。2.LIF可以促进胃癌细胞的增殖、侵袭和转移等恶性生物学行为,而沉默LIFR可以抑制肿瘤的发生、发展。在LIFR表达被沉默后,再次加入LIF无法发挥其作用,提示LIF是与其受体LIFR结合,增强肿瘤的恶性生物学行为能力。3.LIF可以有效降低细胞内MST1/2、LATS1和YAP磷酸化蛋白的含量,从而抑制了Hippo-YAP通路中的核心元件,最终促进YAP的核内转移。4.LIF在胃癌的发生、进展、侵袭和转移中起到了重要作用,能够成为未来胃癌靶向治疗的重要研究方向。运用LIF抗体或沉默LIFR的表达可以成为一种新型的胃癌个体化治疗手段。

参考文献

[1]The Regulation of Leukemia Inhibitory Factor[J].Xuetian Yue;;Lihua Wu;;Wenwei Hu.Cancer Cell&Microenvironment,2015(3)

[2]Global cancer statistics,2012[J].Lindsey A.Torre;;Freddie Bray;;Rebecca L.Siegel;;Jacques Ferlay;;Joannie Lortet‐Tieulent;;Ahmedin Jemal.CA:A Cancer Journal for Clinicians,2015(2)

[3]Hippo Pathway Activity Influences Liver Cell Fate[J].Dean Yimlamai;;Constantina Christodoulou;;Giorgio G.Galli;;Kilangsungla Yanger;;Brian Pepe-Mooney;;Basanta Gurung;;Kriti Shrestha;;Patrick Cahan;;Ben Z.Stanger;;Fernando D.Camargo.Cell,2014

[4]LIF Mediates Proinvasive Activation of Stromal Fibroblasts in Cancer[J].Jean Albrengues;;Isabelle Bourget;;Catherine Pons;;Vincent Butet;;Paul Hofman;;Sophie Tartare-Deckert;;Chloe C.Feral;;Guerrino Meneguzzi;;Cedric Gaggioli.Cell Reports,2014

[5]边识博.LIF在胃癌中的表达及对胃癌细胞生物学行为的影响[D].中国人民解放军医学院,2017.