小鼠雌二醇受体(ER)Elisa试剂盒的应用

背景^[1-3]

小鼠雌二醇受体(ER)Elisa试剂盒是一种用于定量检测小鼠样本中雌二醇受体（ER）水平的实验工具。这种试剂盒基于酶联免疫吸附法（ELISA）的原理，通过特异性抗体与样本中的雌二醇受体结合，形成抗原-抗体复合物，进而通过酶标记的二抗和底物反应，产生可测量的信号，从而实现对雌二醇受体水平的定量检测。

小鼠雌二醇受体(ER)Elisa试剂盒

使用小鼠雌二醇受体（ER）ELISA试剂盒进行实验时，通常需要遵循以下步骤：

1.准备样本：根据实验需要，收集小鼠的相关样本，如血清、组织匀浆等。确保样本的采集、保存和处理符合实验要求。

2.试剂准备：将试剂盒中的试剂充分混匀，并准备好所需的板条和稀释液等。

3.加样：根据实验要求，将标准品和样本加入相应的孔中。通常需要进行复孔实验以提高准确性。

4.孵育：将加入样本的孔板放入恒温箱中，进行一定时间的孵育，使抗原与抗体充分结合。

5.洗涤：孵育结束后，使用洗涤液洗涤孔板，去除未结合的抗原和抗体。

6.加酶标二抗：向孔板中加入酶标记的二抗，继续孵育一段时间，使二抗与抗原-抗体复合物结合。

7.再次洗涤：重复洗涤步骤，确保去除未结合的二抗。

8.显色：加入底物溶液，使与酶标记的二抗结合的底物发生显色反应。

9.终止反应：显色反应达到一定程度后，加入终止液终止反应。

10.测定吸光度：使用酶标仪在特定波长下测定各孔的吸光度值。

11.数据处理：根据标准品的吸光度值绘制标准曲线，并计算样本中雌二醇受体的浓度。

小鼠雌二醇受体（ER）ELISA试剂盒具有操作简便、灵敏度高、特异性好等优点，广泛应用于生物医学研究、药物研发等领域。在实验中，需要注意遵循说明书的要求进行操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。

应用^[4][5]

小鼠雌二醇受体(ER)Elisa试剂盒可以用于雌激素受体在PFOS致雄性小鼠生殖毒性中的作用及机制研究

通过分别建立体内和体外染毒模型,从睾丸功能和结构以及精子发生等方面观察PFOS对雄性小鼠生殖系统的影响,探讨ERs在PFOS影响精子发生中的作用并初步阐明其分子机制,为深入研究PFOS的毒作用尤其生殖毒性机制提供基础,同时也为PFOS环境污染的控制和政府决策提供理论依据。

FOS对雄性小鼠生殖系统的影响目的以雄性成年小鼠为染毒模型,从整体动物水平研究PFOS暴露对小鼠的生殖毒作用。

方法36只雄性C57小鼠随机分为3组,分别为对照组(0.1%DMSO油溶液灌胃)、低剂量PFOS染毒组(0.5mg/kg/d PFOS灌胃)和高剂量PFOS染毒组(10mg/kg/d PFOS灌胃),染毒35d后称重并处死小鼠。采用计算机辅助精子分析(CASA)系统对附睾尾部精子进行计数分析；放射免疫法和小鼠雌二醇受体(ER)Elisa试剂盒检测血清性激素水平；HE染色法观察睾丸组织的结构形态；原位末端标记术(TUNEL)观察睾丸中细胞凋亡情况；免疫组化及蛋白质印迹法检测ERα、ERβ、细胞增殖及凋亡相关蛋白的定位和表达。

小鼠雌二醇受体(ER)Elisa试剂盒结果10mg/kg/d PFOS染毒可以使小鼠体重、睾丸重量、睾丸脏器系数、血清睾酮水平及精子数均显著下降,而雌二醇水平变化不明显；形态学观察结果显示生精小管出现病理性改变,表现为生精细胞层次减少及排列紊乱、生精上皮出现空泡化改变；TUNEL结果表明PFOS可以显著诱导生精细胞凋亡；PFOS还可使Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和ERβ表达水平上升而PCNA和ERα水平下降。在0.5mg/kg/d PFOS染毒组,除ERβ表达水平上升外,其余蛋白表达水平与对照组无明显差异。结论一定剂量的PFOS暴露可使雄性小鼠产生生殖毒性作用,小鼠精子数的下降可能与睾丸组织中生精细胞凋亡的增加以及ERα、ERβ和细胞增殖与凋亡相关蛋白表达水平的改变有关。

参考文献

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[5]瞿建华.雌激素受体在PFOS致雄性小鼠生殖毒性中的作用及机制研究[D].南京医科大学,2016.