大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒的应用

背景^[1-3]

大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒是用于定量检测大鼠样本中甲状腺素（T4）水平的实验工具。它基于酶联免疫吸附法（ELISA）的原理，通过特异性抗体与样本中的T4结合，形成抗原-抗体复合物，进而通过酶标记的二抗和底物反应，产生可测量的信号，从而实现对T4水平的定量检测。

原理：采用双抗体夹心ELISA法。用T4抗体包被于酶标板上，样品中的T4会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。然后依次加入生物素化的抗T4抗体、HRP-链霉亲和素结合物，最后加入单组份TMB底物液。TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。通过酶标仪在特定波长处测OD值，可以计算出样品中T4的浓度。

大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒

使用大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒进行实验时，通常需要遵循以下步骤：

1.准备样本：根据实验需要，收集小鼠的相关样本，如血清、组织匀浆等。确保样本的采集、保存和处理符合实验要求。

2.试剂准备：将试剂盒中的试剂充分混匀，并准备好所需的板条和稀释液等。

3.加样：根据实验要求，将标准品和样本加入相应的孔中。通常需要进行复孔实验以提高准确性。

4.孵育：将加入样本的孔板放入恒温箱中，进行一定时间的孵育，使抗原与抗体充分结合。

5.洗涤：孵育结束后，使用洗涤液洗涤孔板，去除未结合的抗原和抗体。

6.加酶标二抗：向孔板中加入酶标记的二抗，继续孵育一段时间，使二抗与抗原-抗体复合物结合。

7.再次洗涤：重复洗涤步骤，确保去除未结合的二抗。

8.显色：加入底物溶液，使与酶标记的二抗结合的底物发生显色反应。

9.终止反应：显色反应达到一定程度后，加入终止液终止反应。

10.测定吸光度：使用酶标仪在特定波长下测定各孔的吸光度值。

11.数据处理：根据标准品的吸光度值绘制标准曲线，并计算样本中雌二醇受体的浓度。

大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒具有操作简便、灵敏度高、特异性好等优点，广泛应用于生物医学研究、药物研发等领域。在实验中，需要注意遵循说明书的要求进行操作，以确保实验结果的准确性和可靠性。

应用^[4][5]

大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒可以用于噻二唑类杀菌剂对大鼠甲状腺干扰作用研究

研究选取了噻枯唑以及与其化学结构相似的噻森铜、噻菌铜农药，利用20d雌鼠青春期实验对SD大鼠进行灌胃染毒，观察了三种药物对大鼠血清甲状腺素水平、甲状腺重量、甲状腺滤泡上皮细胞增殖以及甲状腺激素代谢关键酶等的影响，探讨噻二唑类农药对甲状腺功能的干扰作用及其机制，为这些化合物的风险管理与评价提供科学依据。

主要研究结果如下： 1、设定噻枯唑各组的给药剂量分别为10、20、40mg／kg／d，噻森铜各组的给药剂量分别为5、10、15mg／kg／d，噻菌铜各组的给药剂量分别为4、10、20和30mg／kg／d。通过灌胃染毒SD大鼠后，发现三种噻二唑类杀菌剂均能使大鼠甲状腺重量增加。

2、利用大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒对大鼠血清T3、T4、TSH进行测定。大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒测定结果显示：噻枯唑各剂量组均能使大鼠血清T3、T4水平显著降低，TSH水平显著增加；噻森铜染毒后5、10mg／kg／d剂量组能显著降低血清T3水平；噻菌铜试验中的20和30mg／kg／d剂量组能显著降低大鼠血清T3、T4水平，同时显著增加血清TSH水平。 3、在脏器重量和激素测定的基础上，利用组织形态学手段对三种药物可能的甲状腺干扰作用做进一步验证。实验结果表明：噻枯唑各剂量组均能对大鼠甲状腺功能产生明显影响，具体表现为甲状腺滤泡上皮细胞出现增殖和肥大。而噻森铜各染毒组没有出现明显的组织病理学改变。对于噻菌铜，实验发现4mg／kg／day的染毒剂量对大鼠甲状腺功能不产生任何可见影响，但随着染毒剂量的升高，噻菌铜具有明显促进甲状腺滤泡上皮细胞增生、降低滤泡中胶体面积和直径的作用。

参考文献

[1]Lipid Vesicles as Membrane Models for Toxicological Assessment of Xenobiotics[J]. Helmut H. Zepik;;Peter Walde;;Elisabet L. Kostoryz;;Jim Code;;David M. Yourtee.CRC Critical Reviews in Toxicology,2008(1)

[2] Activation and inactivation of thyroid hormone by deiodinases: Local action with general consequences[J]. .Cellular and Molecular Life Sciences,2008(4)

[3] Arsenic as an Endocrine Disruptor: Arsenic Disrupts Retinoic Acid Receptor-and Thyroid Hormone Receptor-Mediated Gene Regulation and Thyroid Hormone-Mediated Amphibian Tail Metamorphosis[J]. Davey, Jennifer C;Nomikos, Athena P;Wungjiranirun, Manida;Sherman, Jenna R;Ingram, Liam;Batki, Cavus;Lariviere, Jean P;Hamilton, Joshua W.Environmental Health Perspectives,2008(2)

[4] New insights into thyroid hormone action[J]. Alexis Oetting.Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism,2007(2)

[5]张乐. 噻二唑类杀菌剂对大鼠甲状腺干扰作用研究[D].浙江大学,2009.