ATG9A抗体的应用

背景^[1-3]

ATG9A抗体也被称为自噬相关蛋白9A抗体，是针对ATG9A（Autophagy Related 9 Homolog A）这一自噬相关蛋白的特异性抗体。ATG9A是酵母中识别的ATG蛋白之一，对自噬体的形成至关重要。自噬是一个分解代谢过程的自噬体溶酶体降解的大量细胞质内容物，通常被营养缺乏的条件激活，但也与许多生理过程有关，包括发育、分化、神经变性、感染和癌症。

ATG9A抗体通常来源于兔子，为多克隆抗体，可以与人、小鼠、大鼠、狗、猪、牛和兔子等物种的ATG9A蛋白发生交叉反应。该抗体在科研领域具有广泛的应用，主要用于ELISA、IHC（免疫组织化学染色）、WB-Ti（免疫印迹法）等实验。使用ATG9A抗体时，建议根据具体实验需求确定合适的稀释浓度，并遵循标准的实验操作规范。

ATG9A抗体

关于ATG9A抗体的保存条件，一般建议在-20℃条件下保存，以避免抗体的降解和失活。如果需要在4℃条件下保存，应添加适量的抗生素，并按照1:1体积比添加最高纯度的甘油，以增加抗体的稳定性。同时，应尽量避免反复冻融，以保持抗体的活性和稳定性。

ATG9A是酵母中识别的一种自噬相关蛋白，对自噬体的形成至关重要。自噬是一个分解代谢过程，其中自噬体溶酶体降解大量的细胞质内容物。这个过程通常被营养缺乏的条件激活，但也与许多生理过程有关，包括发育、分化、神经变性、感染和癌症。

因此，ATG9A抗体可以用于研究自噬过程的调控机制，以及ATG9A蛋白在自噬过程中的具体作用。此外，该抗体还可以用于检测ATG9A蛋白在不同细胞和组织中的表达情况，从而揭示其在疾病发生和发展中的作用。

在实验中，ATG9A抗体可以应用于多种实验方法，如Western Blot、免疫细胞化学、免疫组织化学染色等。通过这些实验方法，研究人员可以深入了解ATG9A蛋白的生物学功能，以及其与疾病发生和发展的关系。

应用^[4][5]

ATG9A抗体可以用于Atg2B通过调控脂肪体脂噬和中肠自噬影响意大利蜜蜂蛹期脂代谢的研究

Atg2B介导的脂噬对意大利蜜蜂蛹期脂解的影响及机制为了探究Atg2B对工蜂蛹期脂代谢活动的影响机制,移取一批1 d的工蜂幼虫置于24孔细胞培养板中,室内条件下人工饲养至Pw,随机分为4组,每组6个重复,试验组注射0.5μL/只的ds RNA-Atg2B,对照组分别为不注射、注射等量的H2O和ds RNA-GFP,注射12 h后取样,RT-q PCR检测Atg2B等基因的表达。另选取Pw,随机分为3组,每组6个重复,试验组分别注射4μg/只的Atg2B和ATG9A抗体的兔源多克隆抗体,对照组注射等量PBS以及兔血清免疫球蛋白Ig G,注射之后放入化蛹板并置于恒温恒湿(34℃,75%)培养箱中化蛹至Pb时取样,利用利用LC/MS进行非靶向脂质组的测定和LC-MS/MS技术鉴定总蛋白和脂滴蛋白并进行组间差异蛋白的KEGG富集分析;试验组剩余的蛹随机分为两组,分别注射PC或14-甲基十六烷酸(C17 anteiso acid,C17iso)进行挽救试验,注射之后放入化蛹板并置于恒温恒湿(34℃,75%)培养箱中化蛹直至出房,最后统计粉眼蛹的比例和羽化率。

ATG9A抗体试验结果显示:1)沉默蛹Atg2B基因的表达,脂肪分解酶lipase1和lipase3以及脂噬的调控基因LC3和Atg9A的表达表达显著下调(P<0.05),但是脂滴结构蛋白基因Lsd2,Rab7和Rab18的表达表达显著上调(P<0.05),表明蛹体内的脂解活动减弱,保持了脂滴的完整性。2)抑制蛹体内Atg2B蛋白的表达,会导致蛹体内TAG丰度升高,PC等丰度降低,蛹发育停滞在Pw阶段,还会造成蛹中肠肠壁变薄,注射PC和C17iso显著增加了粉眼蛹的比例,表明阻碍了蛹的脂解和PC的合成,影响了蛹和中肠的发育。3)抑制蛹体内Atg2B蛋白的表达,蛹腹部自噬指示蛋白LC3的荧光信号变弱,脂肪体体积显著增大(P<0.05),表明脂噬活动减弱,脂滴的分解显著减少;Pb脂滴蛋白显著富集到脂肪酸合成信号通路,表明促进了蛹脂肪酸合成信号通路相关蛋白的表达,导致脂滴内TAG的积累,引起体内TAG的异常升高;Pb缺失的蛋白显著富集到的信号通路则为脂肪酸降解信号通路,表明抑制了蛹脂肪酸降解信号通路相关蛋白的表达,从而阻碍了脂肪酸的分解。

参考文献

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[5]陈文凤.Atg2B通过调控脂肪体脂噬和中肠自噬影响意大利蜜蜂蛹期脂代谢的研究[D].山东农业大学,2024.