艾力替尼的作用

背景及概述^[1][2]

艾力替尼(AST-1306)是拉帕替尼结构类似物，喹唑啉类抗肿瘤新药，是小分子表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂，其选择性的作用于EGFR/ErbB2/ErbB4受体。相比代替尼，甲苯磺酸艾力替尼为EGFR/ErbB2/ErbB4三重酪氨酸激酶不可逆抑制剂，其药效强于代，且可能对代替尼耐药患者产生疗效。目前，国内尚没有同类产品上市，甲苯磺酸艾力替尼有望成为此领域的重磅炸弹。

在临床前研究中显示，该药在分子水平、细胞水平和动物试验中，选择性抑制EGFR/ErbB2/ErbB4受体激酶，具有很强的抗肿瘤生长作用，且对代替尼耐药的T790M细胞具有抑制其生长的作用。I期临床试验结果证实，连续口服甲苯磺酸艾力替尼片剂具有良好的安全性和耐受性，在预期肿瘤人群中观察到疗效。

制备^[3]

N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺(艾力替尼)的制备

在一个装有冷凝装置的烧瓶中，将原料6-硝基-4-氯-喹唑啉1.20g(5.7mmol)和 4-间氟苄氧基-3-氯苯胺1.37g(5.6mmol)溶于80ml异丙醇，回流反应3h，体系中析出大量黄色固体，过滤，固体用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤至ph＝8。样品真空干燥，经鉴 别该化合物为：4-[3-氯4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]6-硝基喹唑啉，收率67％。

在一个装有回流冷凝装置的烧瓶中加入4-[3-氯4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-硝基喹唑啉1.60g(3.77mmol)，还原铁粉1.05g(18.85mmol，5eq)，冰醋酸2ml，甲醇40ml，85℃油浴下回流反应2.5h后，过滤除去铁粉，滤液用乙酸乙酯稀释，碳酸氢钠溶液洗涤，水洗，有机相干燥浓缩，得到黄色固体，经鉴别该化合物为：4-[3-氯-4-(3- 氟-苄氧基)苯基胺基]-6-胺基喹唑啉，收率61％。

在一个100ml烧瓶中，在冰浴下加入4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]6-胺基喹唑啉1.2g(3.04mmol)，三乙胺0.6ml(4.58mmol，1.5eq)，丙烯酰氯0.28ml(3.33mmol，1.1eq)，THF40ml，逐渐升至室温反应，3h后，停止反应，过滤，固体水洗至中性，干燥，得到固体1.0g。经鉴别该化合物为：N-{4-[3-氯4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺。MS：449。mp：222-225℃。

各种盐型的制备：

N-{4-[3-氯4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺盐酸盐

将1.0gN-{4-[3-氯4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺溶于20ml乙 酸乙酯/三乙胺中于冰水浴下搅拌，缓慢滴加4N浓HCl/1，3二氧六环溶液。有黄色固体析出，45min后停止搅拌，过滤，水洗，干燥得530mgN-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基 胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺盐酸盐。MS：449。mp：249-252℃。

也可通过以下方法制备目标化合物：将1.0gN-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]- 喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺溶于20ml四氢呋喃/三乙胺中于冰水浴下搅拌，缓慢滴加4N浓 HCl/1，3二氧六环溶液，有黄色固体析出，45min后停止搅拌，过滤，水洗，干燥得 370mgN-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺盐酸盐。

N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺草酸盐

将1.0gN-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺溶于20ml甲醇中于冰水浴下搅拌，缓慢滴加草酸的甲醇溶液(11mmol/2ml)，有黄色固体析出，45min后停止搅拌，过滤，水洗，干燥得530mgN-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]- 喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺草酸盐。MS：449。mp：253-256℃。

N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺三乙胺盐

将1.0gN-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺悬浮于 20ml甲醇中于35℃下搅拌，缓慢滴加三乙胺，悬浮液慢慢澄清。45min后停止搅拌，浓缩，水洗，干燥得530mgN-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯 酰胺三乙胺盐。MS：449。

药理作用

AST-1306选择性抑制EGFR和ErbB2酪氨酸激酶活性。AST-1306也有效抑制T790M/L858R双突变型EGFR，IC50为12 nM。AST-1306效果比Lapatinib高500多倍。AST-1306作用于 ErbB 家族激酶比作用于其他激酶家族包括PDGFR, KDR和c-Met选择性高3000多倍。AST-1306 可能与EGFR和ErbB2氨基酸残基共价结合。AST-1306显著抑制HIH3T3-EGFR T790M/L858R 细胞生长，存在浓度依赖性。

AST-1306作用于HIH3T3-EGFR T790M/L858R 细胞，有效抑制EGFR磷酸化。而且, AST-1306抑制含EGFR T790M/L858R 突变的NCI-H1975细胞生长，这种作用存在浓度依赖性。AST-1306抑制EGFR及其下游通路的磷酸化。此外, AST-1306作用于A549细胞,显著抑制EGF诱导的EGFR磷酸化，这种作用存在剂量依赖性。AST-1306作用于人癌细胞包括A549细胞, Calu-3细胞和SK-OV-3细胞，抑制EGFR和ErbB2及其下游信号磷酸化。

AST-1306每天口服处理SK-OV-3 和Calu-3移植瘤模型，显著抑制肿瘤生长。AST-1306处理SK-OV-3 模型，7天后，肿瘤几乎完全消失。相反, AST-1306 作用于HO-8910和A549移植瘤，只稍微抑制肿瘤生长。因此, AST-1306作用于过量表达ErbB2的肿瘤模型，效果比表达低水平ErbB2的肿瘤效果高很多。

AST-1306耐药性很好。 Lapatinib作用于过量表达ErbB2的肿瘤模型，具有抗癌活性，但是按相同剂量及饲喂安排作用于SK-OV-3 移植瘤模型，AST-1306比Lapatinib 效果好。此外，AST-1306 口服处理FVB-2/Nneu模型，每天两次，持续3周，显著抑制肿瘤生长。处理11天后，肿瘤几乎完全消失。在药物处理期间，鼠体重降低小于20%。

适应症^[1]

有EGFR基因非常规突变、HER2基因突变或HER2基因扩增的复发转移性NSCLC。

主要参考资料

[1] 招募患者：艾力替尼治疗复发转移性NSCLC患者的有效性和安全性II临床研究

[2] 1.1类分子靶向抗肿瘤新药――甲苯磺酸艾力替尼将进入Ⅱ、Ⅲ期临床试验

[3] CN200710037557.2 4-苯胺喹唑啉衍生物的盐