重组猴RANTES/CCL5

背景^[1-6]

Recombinant Rhesus Macaque RANTES/CCL5（重组猴RANTES/CCL5）将猴RANTES/CCL5基因与猴T淋巴细胞融合重组，再诱导重组细胞表达的目的蛋白。实验主要用于猴RANTES/CCL5相关研究中的免疫组化和WB等实验。CCL5是分类为趋化细胞因子或趋化因子的8kDa蛋白质。CCL5对T细胞，嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞具有趋化性，并且在将白细胞募集到炎症部位中起积极作用。

在T细胞释放的特定细胞因子（即IL-2和IFN-γ）的帮助下，CCL5还诱导某些天然杀伤（NK）细胞的增殖和活化，形成CHAK（CC-趋化因子激活的杀伤细胞））细胞。它也是一种艾滋病毒-从CD8+T细胞释放的抑制因子。该趋化因子已定位于人类的17号染色体。

RANTES首先在寻找T细胞活化后“晚期”（3-5天）表达的基因中被鉴定。随后确定其为CC趋化因子并在100多种人类疾病中表达。通过Kruppel样因子13（KLF13）在R淋巴细胞中调节RANTES表达。RANTES与相关趋化因子MIP-1α和MIP-1β一起被鉴定为由活化的CD8+T细胞和其他免疫细胞分泌的天然HIV抑制因子。

最近，RANTES蛋白已被设计用于体内由乳杆菌属细菌生产，该溶液正在开发成可能的抑制HIV进入的局部杀菌剂。受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(regulated upon activation normalT cell expressed andsecreted,RANTES),是趋化性细胞因子CC亚族成员。由于能够诱导白细胞向炎症部位浸润,RANTES最初被认为是一种典型的趋化性细胞因子。

近年来逐渐发现了RANTES一些新的生物学特性。RANTES是有效的白细胞激活剂,参与很多炎性反应。RANTES不但能够抑制HIV病毒的复制,在一定环境下也能增强复制。RANTES仅含68个氨基酸残基,其来源广泛,NK细胞以及γδ-T细胞均可组成性地表达RANTES;炎症反应中CD8+T细胞、上皮细胞、成纤维细胞和血小板可分泌RANTES;病毒感染可引起某些细胞RANTES的表达升高,如呼吸道合胞病毒感染可引起人鼻粘膜及腺样上皮细胞RANTES的表达升高;流感病毒感染可诱导人支气管组织和鼻息肉的上皮细胞表达RANTES;某些肿瘤细胞在一定的条件下也可表达RANTES,如伤寒沙门氏菌感染或细胞因子可刺激HT-29、Caco-2细胞表达RANTES。

RANTES有多种受体,包括CCR1、CCR3、CCR4、CCR5,与不同受体结合的亲和力稍有不同。RANTES和其受体结合可引起白细胞的迁移,介导炎症反应的发生;对单核细胞、NK细胞、记忆T细胞、DC细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞均有强烈的趋化作用。RANTES和其受体相互作用有两个不同的位点,其中一个结合受体,另一个介导信号的转导,其结合位点位于非N末端序列,RANTES和其不同受体的相互作用是互不相同而有其特异性的。

Arg17是其结合CCR1所必需的,Phe-12是其结合CCR3所必需的,而Phe-12和Ile-15则是其结合CCR5所必需的。RANTES的信号传导位点位于N末端序列,因为N末端缺失的RANTES突变体可和其靶细胞结合,不能诱导趋化和钙离子的内流。但参与不同受体介导信号传导的N末端残基并不相同,如CCR1(Pro-2、Asp-6、Thr-7)、CCR3(Pro-2、Tyr-3)、CCR5(Ty r-3、Asp-6)。

应用^[7][8]

重组猴RANTES/CCL5可用于促炎作用的研究：

RANTES表达水平的升高与多种炎性疾病有关,如同种异体移植排斥反应、动脉粥样硬化、关节炎、特应性皮炎、炎性呼吸道病(哮喘)、迟发性超敏反应、肾小球肾炎、子宫内膜异位症、某些神经病变(如阿尔茨海默病)和某些恶性肿瘤。CD8+T细胞、上皮细胞、成纤维细胞和血小板分泌RANTES是炎症反应的一个特征。LPS可刺激成纤维细胞分泌RANTES、活化和吸引嗜酸粒细胞,介导呼吸道疾病的发生。

RANTES在过敏病人可诱导淋巴细胞向鼻粘膜的迁移。在这些病理过程中,RANTES促进了白细胞向炎症部位的浸润。RANTES不仅可引起白细胞的迁移,还可介导淋巴细胞的迁移和归巢。RANTES可调节炎症反应的进程。以三硝基苯磺酸(TNBS)肠内给药诱导大鼠的结肠炎,不同的时间检测肠道组织中几种趋化蛋白的表达。

MCP-1、MCP-2和CINC的表达水平在急性期升高,而RANTES的表达水平只有在慢性期才显著升高,同时肠道中的单核细胞和巨噬细胞的数目也大为升高,CCR1和CCR5受体表达也显著升高。慢性期中,使用Met-RANTES(CCR1和CCR5的拮抗剂)可使损伤大为减轻,同时单核细胞、肥大细胞和中性粒细胞的募集也大为减少,某些大鼠的炎症反应及损伤甚至完全消失。

参考文献

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