不同浓度2,3-丁烷二酮一肟初始复灌研究方法

背景技术

心脏停搏与复灌广泛应用于心脏移植及其他需要心肺旁路循环的手术，但常常造成心肌收缩力下降，心脏机械功能受损。保存复灌心脏的功能，是众多研究的焦点，已有的方法包括：改良停搏液配方、改善底物代谢的药物、清除氧自由基、抑制白细胞对内皮细胞的黏附。近年来，一种通过使心肌细胞肌球蛋白与肌动蛋白失耦联，从而产生负性肌力作用的药物2,3-丁烷二酮一肟（butanedione monoxime,BDM)在保存停搏心肌活性方面的作用越来越受到重视。2,3-丁烷二酮一肟作为停搏液的添加成分，可减少心肌能耗，提高心脏对缺血与停搏的耐受性，改善心肌氧供需平衡；含BDM的复灌液也能发挥相似的作用。本文旨在探讨停搏后以不同浓度的2,3-丁烷二酮一肟进行初始复灌，对后继正常灌流心脏左室机械功能和氧代谢的影响，探寻保护作用最强的浓度并研究其机制。

实验方法

豚鼠48只，性别不拘，体重250~350g。腹腔注射20mg氯胺酮和1000U肝素，去头处死。开胸后迅速行主动脉插管，以改良Krebs-Ringer液逆行灌流，剪开腔静脉与肺动脉，摘取心脏，旋即将心脏挂于Langendorff灌流装置上，灌流液体同上，压力为55mmHg（1mmHg=0.133kPa)，温度37℃。稳定灌流30min后测量基础指标。以20ml St.Thomas Hospital 液灌流，诱导心脏停搏，随后停止灌流，将心脏浸入4℃停搏液中维持12h。复灌前，随机将心脏分为4组。对照组（CON组，12例）直接以改良Krebs-Ringer液复灌：研究组首先分别以含20mmol/L（2,3-丁烷二酮一肟20组，12例）、30mmol/L（2,3-丁烷二酮一肟30组，12例）、40mmol/L（2,3-丁烷二酮一肟40组，12例）的Krebs液进行初始复灌20min，随后均以改良Krebs-Ringer液进行复灌。所有心脏在恢复改良Krebs-Ringer液灌流前均注射利多卡因0.5mg，以恢复窦性心律。分别在改良Krebs-Ringer液灌流5、15、30、60 min后测量各项指标。灌流结束后，剪取左室游离壁组织块，戊二醛固定后行透射电镜检查。

参考文献

[1]周忠泉,杨沙宁,杨学新,等. 不同浓度2,3-丁二酮单肟初始复灌对停搏心脏的保护作用[J]. 中国心血管病研究杂志,2007,5(4):299-302. DOI:10.3969/j.issn.1672-5301.2007.04.022.