SW 1116的应用

背景^[1-3]

SW 1116是一种人结肠腺癌细胞系，通常用于结肠癌的研究。这些细胞在培养条件下表现出特定的生物学特性，有助于科学家更好地理解结肠癌的发病机制和药物反应。此外，SW 1116细胞系还被用于研究癌症基因表达、细胞信号转导和药物筛选等方面的实验。

在使用SW 1116或任何其他类型的细胞系进行研究时，科研人员必须遵循严格的伦理准则和操作规范，确保研究的有效性和可靠性。同时，由于不同实验室的培养条件可能存在差异，因此获取的SW 1116细胞系应该在实验前进行适当的质量控制和鉴定，以确保实验结果的准确性。

SW 1116

SW 1116细胞系培养操作

1)复苏SW 1116细胞系：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2)SW 1116细胞系传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3)SW 1116细胞系冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

应用^[4-5]

SW 1116可以用于芒柄花黄素对结肠癌影响及机制的实验研究

目前,结直肠癌的主要治疗方式是手术和化学治疗。结直肠癌根治术后,50%的患者会出现复发或转移而死亡,化疗药物可以提高结直肠癌的临床疗效。但是,化疗药物影响肿瘤细胞的同时也作用于人体的正常细胞。

芒柄花黄素(Formononetin,Form)又名刺芒柄花素、芒柄花素,是一种生物活性异黄酮,可以抑制多种癌细胞增殖,诱导其凋亡,但对结直肠癌的研究报道不多且不深入。

选用结肠癌SW 1116、HCT116细胞株为研究对象,研究刺芒柄花素对结肠癌细胞的生长、增殖及侵袭能力的抑制作用,并分析其可能的作用机制。在此基础上,应用移植肿瘤动物模型,研究芒柄花黄素对动物结肠癌的体内的作用效果及机制。为芒柄花黄素治疗结直肠癌提供实验依据。

第一部分芒柄花黄素对结肠癌细胞SW 1116和HCT116生长、增殖及侵袭影响的研究。目的:检测Form对结肠癌细胞SW 1116及HCT116生长、增殖、侵袭及细胞周期的影响,明确Form对结肠癌的作用效果。

方法:常规培养结肠癌细胞SW 1116及HCT116,MTT法测定Form对结肠癌细胞SW 1116及HCT116生长的影响,流式细胞术进行细胞周期测定,Transwell法测定Form对结肠癌细胞SW 1116及HCT116侵袭能力的影响。

结果:1.Form对结肠癌细胞生长的抑制以20、50、100、200μM浓度的Form作用于正常结肠上皮细胞株NCM460和结肠癌SW 1116和HCT116细胞株24、48和72h后,可抑制结肠癌细胞的生长,且对细胞生长的抑制作用具有时间和浓度依赖性,而Form对正常结肠上皮细胞株NCM460的生长同样具有抑制作用,但同最高浓度Form(200μM)对结肠癌细胞株SW 1116和HCT116最长作用时间(72h)抑制率(83.67±4.32%、86.2±5.48%)相比,Form对人正常结肠上皮细胞株NCM460(18.26±3.09%)抑制作用较弱。

2. Form对结肠癌细胞周期及增殖指数的影响培养结肠癌细胞株SW 1116和HCT116,以不同浓度的Form(20、50、100μM)作用于细胞,用流式细胞术测定Form对结肠癌细胞周期的影响,用上述浓度Form作用于结肠癌SW 1116和HCT116细胞株48h后,结果表明,随着Form浓度的逐渐增加,G0/G1期细胞比例上升,100μM Form作用结肠癌SW 1116和HCT116细胞48h后,G0/G1期细胞比例分别上升至79.2%、79.7%。说明Form对结肠癌细胞SW 1116及HCT116细胞周期具有明显阻滞作用,阻滞于G0/G1期。随着Form浓度的逐渐增加,PI值逐渐降低。3.Form对结肠癌细胞侵袭能力的影响培养人正常结肠上皮细胞株(NCM460)和结肠癌细胞株(SW 1116和HCT116),以不同浓度Form(50、100μM)作用于细胞24 h,Transwell法观察Form对细胞侵袭能力的影响。

结果表明,Form可抑制结肠癌细胞SW 1116及HCT116的侵袭能力,且这种抑制作用具有剂量依赖性,但对正常结肠上皮细胞株NCM460的侵袭能力无抑制作用。小结:1.Form可抑制结肠癌细胞生长,且抑制作用具有剂量及时间依赖性;2.Form对结肠癌细胞周期阻滞发生于G0/G1期,Form可抑制结肠癌细胞增殖,且抑制作用具有剂量依赖性;3.Form可抑制结肠癌细胞侵袭能力,且抑制作用具有剂量依赖性。

参考文献

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