细胞色素c兔单克隆抗体

背景^[1-6]

Cytochrome C Rabbit Monoclonal Antibody（细胞色素c兔单克隆抗体）是用Cytochrome C对兔进行系统免疫然后筛选出兔Cytochrome C致敏B细胞后与骨髓肿瘤细胞杂交最后制得既能产生单一Cytochrome C抗体，又能无限增殖的Cytochrome C抗体杂种细胞系。Cytochrome C（细胞色素c）属于细胞色素c蛋白家族。与其他细胞色素不同，细胞色素c是高度水溶性的，并且是携带一个电子的电子传递链的必要组分。它能够经历氧化和还原，但不结合氧。它在Complexes III（辅酶Q-Cyt C还原酶）和IV（Cyt C氧化酶）。

在人类中，细胞色素c由CYCS基因编码。细胞色素c属于c型细胞色素家族的I类并且含有结合血红素的特征性CXXCH（半胱氨酸-任何-任何-半胱氨酸-组氨酸）氨基酸基序。该基序位于肽链的N-末端，它含有组氨酸作为血红素铁的第五配体。第六配体由朝向C-末端发现的甲硫氨酸残基提供。将蛋白质主链折叠成五个α-螺旋，其从N末端到C末端编号为α1-α5。当提及线粒体细胞色素c时，分别将螺旋α3，α4和α5称为50s，60s和70s螺旋。

细胞色素c是一种高度保守的蛋白质，遍布植物，动物和许多单细胞生物中。这一点，以及它的小尺寸（分子量约12,000道尔顿），使其在分支学研究中很有用。细胞色素c分子已被研究用于进化生物学的一瞥。细胞色素c具有由约100个氨基酸的链组成的一级结构。许多高阶生物具有104个氨基酸的链。人类细胞色素c的序列与黑猩猩（我们最亲近的亲属）的序列相同，但与马的不同。细胞色素c具有在真核生物中高度保守的氨基酸序列，仅有少数残基。在一项研究中测试的30多个物种中，104个氨基酸中有34个是保守的;在他们的特征位置相同。例如，人细胞色素氧化酶与细胞色素小麦反应Ç，体外;这适用于所有测试物种。

此外，+0.25伏的氧化还原电位在研究的所有细胞色素c分子中是相同的。细胞色素c是线粒体中电子传递链的组分。细胞色素c的血红素组接受来自bc 1复合物的电子并将电子转移到复合物IV。细胞色素c也参与细胞凋亡的起始。在细胞色素c释放到细胞质后，蛋白质结合凋亡蛋白酶激活因子-1（Apaf-1）。细胞色素c还可以催化几种氧化还原反应，如羟基化和芳香氧化，并通过氧化各种电子供体如2,2-连氮基-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）（ABTS）显示过氧化物酶活性，2-酮-4-硫代甲基丁酸和4-氨基安替比林。细菌细胞色素c起亚硝酸还原酶的作用。

应用^[7][8]

细胞色素c兔单克隆抗体可用于细胞凋亡的信号通路的研究：

细胞色素c在细胞凋亡中也具有中间作用，细胞凋亡是用于在发育过程中杀死细胞或响应感染或DNA损伤的受控形式的细胞死亡。细胞色素c与线粒体内膜中的心磷脂结合，从而锚定其存在并防止其从线粒体释放并引发细胞凋亡。虽然心磷脂和细胞色素c之间的初始吸引力是由于细胞色素c上的极端正电荷而静电，但最终的相互作用是疏水的，其中来自心磷脂的疏水尾部将其自身插入细胞色素c的疏水部分。

在细胞凋亡的早期阶段，刺激线粒体ROS产生，并且心磷脂被心磷脂-细胞色素c复合物的过氧化物酶功能氧化。然后将血红素蛋白从线粒体内膜分离，并可通过外膜中的孔挤出到可溶性细胞质中。钙水平的持续升高先于细胞质c从线粒体释放。少量细胞色素c的释放导致与内质网（ER）上的IP3受体（IP3R）的相互作用，导致ER钙释放。

钙的总体增加引发细胞c的大量释放，然后细胞c作用于正反馈回路以维持通过IP3R释放ER钙。这解释了ER钙释放如何达到细胞毒性水平。这种细胞色素c的释放反过来激活胱天蛋白酶9，半胱氨酸蛋白酶。然后Caspase 9可以继续激活caspase 3和caspase 7，负责从内部破坏细胞。

参考文献

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