NB2 大鼠淋巴瘤细胞系的应用

背景^[1-3]

NB2大鼠淋巴瘤细胞系是一种常用的实验细胞系，用于研究淋巴瘤的生物学特性和治疗机制。这种细胞系由大鼠的淋巴瘤细胞建立而来，具有维持淋巴瘤细胞生长和分化的能力。

NB2大鼠淋巴瘤细胞系在淋巴瘤研究中具有广泛的应用价值。通过利用这种细胞系，研究人员可以深入研究淋巴瘤的生物学特性，了解淋巴瘤的发生、发展、转移和耐药机制，以及探索淋巴瘤治疗的新药和新方法。例如，研究人员可以使用NB2大鼠淋巴瘤细胞系建立动物模型，模拟人类淋巴瘤的发生和发展过程，从而更好地理解淋巴瘤的发病机制和治疗方法。

此外，NB2大鼠淋巴瘤细胞系还可以用于评估和筛选对淋巴瘤具有治疗作用的药物或化合物，以及测试和开发新的淋巴瘤治疗方法。这种细胞系具有生长稳定、易于培养和操作简便等特点，为相关研究提供了可靠的实验模型。

NB2大鼠淋巴瘤细胞系

NB2大鼠淋巴瘤细胞系细胞培养操作

1)复苏NB2大鼠淋巴瘤细胞系细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2)NB2大鼠淋巴瘤细胞系细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

3)NB2大鼠淋巴瘤细胞系细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

应用^[4-5]

NB2大鼠淋巴瘤细胞系可以用于槲皮素和17-AAG对大鼠外周血淋巴细胞、骨髓细胞和人淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖与辐射敏感性的研究

研究探讨槲皮素对大鼠外周血淋巴细胞骨髓细胞和人淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖抑制作用及联合γ射线研究辐射敏感性的影响。研究探讨17-AAG对大鼠外周血淋巴细胞和骨髓细胞增殖抑制作用及联合γ射线研究辐射敏感性的影响。研究探讨槲皮素联合17-AAG对大鼠外周血淋巴细胞增殖抑制作用。

方法:采用CCK-8法检测NB2大鼠淋巴瘤细胞系细胞生长增殖和Annexin V/PI双染色法检测细胞早期凋亡率研究槲皮素对体外培养人Burkitt’s淋巴瘤细胞株Raji细胞的增殖、凋亡和辐射敏感性的影响并探讨其可能机制。采用CCK-8法测定NB2大鼠淋巴瘤细胞系细胞活性,研究不同浓度槲皮素和17-AAG对大鼠外周血淋巴细胞和骨髓细胞增殖作用和辐射敏感性的影响。采用CCK-8法测定细胞活性,研究槲皮素联合17-AAG对大鼠外周血淋巴细胞存活率的影响。结果:1槲皮素对Raji细胞有生长增殖抑制作用,且有一定的时间依赖关系,对Raji细胞有一定的辐射增敏效应。

2在短作用时间和低药物浓度时,槲皮素对NB2大鼠淋巴瘤细胞系有一定的保护作用,对大鼠外周血淋巴细胞辐射敏感性有减弱作用。槲皮素对大鼠骨髓细胞有一定的保护作用,保护作用与药物浓度和作用时间呈明显正相关,对大鼠骨髓细胞辐射敏感性有减弱的作用(P<0.01)。

3 17-AAG对细胞的增殖有明显抑制作用,且抑制作用与药物浓度和作用时间呈明显正相关,对NB2大鼠淋巴瘤细胞系辐射敏感性没有影响。17-AAG对大鼠骨髓细胞的增殖有明显抑制作用,且抑制作用与药物浓度呈明显正相关,和作用时间呈负相关,对大鼠骨髓细胞辐射敏感性有增强的作用(P<0.01)。

4槲皮素联合17-AAG对NB2大鼠淋巴瘤细胞系的增殖有一定的协同抑制作用(P<0.01)。

参考文献

[1]Heat shock proteins in cancer:chaperones of tumorigenesis[J].Stuart K.Calderwood;;Md Abdul Khaleque;;Douglas B.Sawyer;;Daniel R.Ciocca.Trends in Biochemical Sciences,2006(3)

[2]Targeting chaperones in transformed systems–a focus on Hsp90 and cancer[J].Chiosis.Expert Opinion on Therapeutic Targets,2006(1)

[3]Hsp70 chaperones:Cellular functions and molecular mechanism[J].M.P.Mayer;;B.Bukau.Cellular and Molecular Life Sciences,2005(6)

[4]Hsp90 Activation and Cell Cycle Regulation[J].Francis Burrows;;Hong Zhang;;Adeela Kamal.Cell Cycle,2004(12)

[5]褚薛刚.槲皮素和17-AAG对大鼠外周血淋巴细胞、骨髓细胞和人淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖与辐射敏感性的研究[D].苏州大学,2011.