伐诺司林二盐酸盐的用途与制备

背景及概述^[1][2]

伐诺司林是一种有机化合物，其已在哺乳动物中被用于治疗可卡因成瘾、可卡因急性效应、和可卡因渴望，以及用作多巴胺激动剂，用于治疗帕金森综合症、肢端肥大症、高催乳素血症和由于多巴胺能系统功能减退所产生的疾病。期望优化特别用于人类使用的伐诺司林的固体剂型的制剂。新发现的制剂优选使用最少量的赋形剂并使用便宜的、易于获得且促进商业规模上成本有效的制造的药用级赋形剂。

用途^[2]

伐诺司林已在哺乳动物中被用于治疗可卡因成瘾、可卡因急性效应、和可卡因渴望，以及用作多巴胺激动剂用于治疗帕金森综合症、肢端肥大症、高催乳素血症和由于多巴胺能系统功能减退所产生的疾病。伐诺司林也在哺乳动物中被用于治疗和预防心律紊乱。

此外，有研究发现了一种伐诺司林二盐酸盐的药物新用途，具体的为将伐诺司林二盐酸盐作为致癌因子CDK2，4，6的联合抑制剂，从而发挥抗肝癌的功效。为了观察伐诺司林二盐酸盐对肝癌细胞的抑制效果，通过用流式细胞术检测在不同浓度伐诺司林二盐酸盐干扰肝癌细胞QGY7703和Huh76，12，24小时后细胞周期分布情况，与对照组相比较，伐诺司林二盐酸盐大大的增加了停滞在G1期的细胞，且呈现时间及剂量依赖性增加的趋势(P<0.05)，同时结果显示随着G1期细胞数量的增加同时伴随着S期细胞数量的减少。此外，通过流式细胞技术检测伐诺司林二盐酸盐干扰肝癌细胞Huh7和QGY7703后，与对照组相比较伐诺司林二盐酸盐大大的增加了细胞的凋亡数量，且呈现时间及剂量依赖性增加的趋势(P<0.05)。通过Westernblotting实验伐诺司林二盐酸盐干扰肝癌细胞后G1期及G1期至S期转换相关蛋白CDK2，4，6，cyclinD/B，cyclinE，Rb，pho-CDk2andpho-Rb进行检测。结果显示伐诺司林二盐酸盐干扰肝癌细胞Huh7和QGY7703后其CDK2，4，6，cyclinD，cyclinE，Rb，pho-CDK2和pho-Rb蛋白表达量呈现剂量依赖性下降趋势，cyclinB蛋白表达量没有改变。

通过体外试验验证，伐诺司林二盐酸盐可抑制致癌因子CDK2，4，6活性，具有强烈的抗肝癌的效果，伐诺司林二盐酸盐作为一种新型抗肝癌药物，可用于减缓肿瘤病情的发展，降低患者的痛苦，也为研制能用于肝癌，大肠癌及其它恶性肿瘤治疗的药物提供了新的思路和技术储备。

制备^[3]

一种伐诺司林的合成方法，包括：a、1-叔丁氧羰基-哌嗪的亲核取代；b、酸性条件脱叔丁氧羰基保护；c、4-氟苯基溴化镁的亲核取代；d、酸性条件下脱水；e、苯基丙基哌嗪的亲核取代。

步骤1：化合物III的制备：

将乙腈（5L）加到10L的反应瓶中，搅拌下依次加入1-溴-3-苯基丙烷（585.5g）、1-叔丁氧羰基-哌嗪（500g）、碳酸钾（742g），加热至回流反应12小时。停止加热，冷却至室温，加入水（4L），用乙酸乙酯（3L×2）萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水（2L）洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩干得840.2g化合物III粗品。

步骤2：化合物IV的制备：

将化合物III粗品（500g）溶到氯化氢气体的二氧六环溶液（5L）中，0℃下搅拌24小时，反应完全，减压浓缩干，用水（2L）溶解，用甲基叔丁基醚（600mL）萃取，把水相用40%氢氧化钠水溶液调PH至约8，用乙酸乙酯（600mL×2）萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩干得310.5g化合物IV。

步骤3：化合物VII的制备：

把甲酸乙酯（200g）溶到无水四氢呋喃（1L）中，抽真空置换空气三遍，冷却至0℃，滴加2M的4-氟苯甲溴化镁的四氢呋喃溶液（6.75mol，3.38L），温度不超过5℃，2小时滴加完毕，滴加完毕，在0-5℃下再反应2小时，慢慢滴加饱和氯化铵水溶液（2L）淬灭反应，搅拌分层，将水层用乙酸乙酯（1L×3）萃取，有机相用饱和食盐水（1L×2）洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到558.8g化合物VII。

步骤4：化合物IX的制备：

将甲苯（5L）加到10L的反应瓶中，搅拌下依次加入化合物VII（500g）、化合物VIII（272.6g），之后在室温下慢慢滴加磷酸（85%，455mL），滴加完毕，反应在室温下进行2天，冷却至0-10℃，加入水（3L），分液，水相用乙酸乙酯（1.5L×2）萃取，合并有机相，依次有饱和碳酸氢钠水溶液（2.5L）、饱和食盐水（2.5L）洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩干得589.6g化合物IX。

步骤5：伐诺司林的制备：

将N，N-二甲基甲酰胺（1L）放到2L的反应瓶中，依次加入化合物IX（152g）、化合物IV（100g）、碳酸钾（135.2g），回流下反应24小时，冷却至室温，加入水（1L），用6N盐酸调PH值至约为2，搅拌30分钟，用甲基叔丁基醚（500mL）萃取，把水相用20%氢氧化钠水溶液调PH值至约为8，用乙酸乙酯（1L×2）萃取，合并有机相，用饱和食盐水（500mL×2）洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得205.1g伐诺司林。伐诺司林与盐酸进一步反应制得伐诺司林二盐酸盐。

主要参考资料

[1] CN201180033550.8包含伐诺司林的药物组合物

[2] CN201510905924.0 一种伐诺司林二盐酸盐的药物新用途

[3] CN201410748083.2一种伐诺司林的合成方法