COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞的应用

背景^[1-3]

COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞是一种人类皮肤黑色素瘤细胞系，它是由一名患有恶性黑色素瘤的患者皮肤组织中分离出来的。这种细胞系在肿瘤学研究中具有重要价值，因为它可以用于评估新的治疗方法和药物的有效性，以及研究黑色素瘤的发生和发展机制。

COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞系通常被用于体外实验模型，例如细胞培养、基因转染、蛋白质表达等技术。研究人员可以通过改变培养条件、添加生长因子或使用基因编辑技术来改变COLO829细胞系的行为，以更好地模拟体内环境并提高治疗效果。此外，COLO829细胞系还可以用于研究肿瘤微环境对肿瘤生长和转移的影响。

COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞

COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞具有以下特点：

形态特征：COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞呈圆形或椭圆形，大小不一。它们通常在体外培养时形成单层或多层细胞结构。

生长特性：COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞生长迅速，可以在体外持续传代。它们的增殖速度受到生长因子、细胞密度和其他环境因素的影响。

分子特征：COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞表达多种与小细胞肺癌相关的分子标志物，如神经元特异性烯醇化酶(NSE)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)等。这些标志物有助于研究人员了解肿瘤的生物学特性和寻找潜在的治疗靶点。

药物敏感性：COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞对多种化疗药物具有不同程度的敏感性，这为临床试验提供了基础数据。此外，研究人员还可以利用这些细胞来评估新药物的安全性和有效性。

COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞培养操作

1)复苏COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2)COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

c、按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

d、将细胞悬液按1：2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

应用^[4-5]

COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞可以用于LncRNA共表达网络分析揭示了黑色素瘤新的生物标志物

lncRNA拷贝数变异(CNV)是消除lncRNA表达的重要机制之一,可能在肿瘤发生中起重要作用。这样,lncRNA拷贝数的改变可以揭示癌症的发展阶段,并作为患者预后的生物标志物,但这种可能性很少被研究。黑色素瘤的高死亡率和低存活率主要是由于诊断和治疗的延误。

目的:因此,迫切需要识别早期黑色素瘤生物标志物和新的治疗靶点。

方法:在本研究中,我们使用了常用的生物学方法、加权基因共表达网络分析(WGCNA)和lncRNA表达数据来评估这类生物标志物的识别潜力。结果:12个lncRNA,即LINC01238、BASP1-AS1、LOC100506098、LINC-PINT、LOC100506585、RNF139-AS1、MALAT1、PCED1B-AS1、LINC02384、COLO829细胞系|人皮肤黑色素瘤细胞、ARHGAP27P1和LINC01532被鉴定为独立的黑色素瘤表达数据集。

此外,我们通过功能和途径富集分析对这些lncRNA进行了表征,并确定了哪些lncRNA在正常和黑素瘤样本之间表现出差异表达、差异启动子甲基化水平和拷贝数改变。最后,我们进行了生存分析,确定了4种lncRNAs,BASP1-AS1、LOC100506098、ARHGAP27P1和LINC01532作为黑色素瘤的预后生物标志物。

结论:因此,我们的研究结果为黑色素瘤的诊断/预后提供了新的潜在的生物标志物和治疗靶点,值得进一步研究。此外,这些lncRNA的鉴定可以加深对黑素瘤分子发病机制的了解。

参考文献

[1]Integrative analysis of competing endogenous RNA network focusing on long noncoding RNA associated with progression of cutaneous melanoma.Siyi Xu;;Jing Sui;;Sheng Yang;;Yufeng Liu;;Yan Wang;;Geyu Liang.Cancer Medicine,2018

[2]ALKBH5-dependent m6A demethylation controls splicing and stability of long 3′-UTR mRNAs in male germ cells.Chong Tang;;Rachel Klukovich;;Hongying Peng;;Zhuqing Wang;;Tian Yu;;Ying Zhang;;Huili Zheng;;Arne Klungland;;Wei Yan.Proceedings of the National Academy of Sciences,2018

[3]Towards therapeutic advances in melanoma management:An overview.Swarnendra Singh;;Atif Zafar;;Saman Khan;;Imrana Naseem.Life Sciences,2017

[4]Potential of long non‐coding RNAs in cancer patients:From biomarkers to therapeutic targets.Subash Chandra Gupta;;Yashoda Nandan Tripathi.International Journal of Cancer,2017

[5]李亚岭.LncRNA共表达网络分析揭示了黑色素瘤新的生物标志物[D].中国医科大学,2021.