抗氧化物质——异绿原酸 A

概述

异绿原酸A是一种化学物质别名3,5-二咖啡酰奎宁酸的化学物质，该物质的化学式为C₂₅H₂₄O₁₂，分子量为516.45，类白色结晶粉末，可溶于甲醇、乙醇、二甲亚砜等有机溶剂。异绿原酸A是忍冬科植物金银花，菊科兔耳风属植物杏香兔耳风，丁公藤属植物，紫甘薯茎叶的主要活性成分，其抗氧化活性已见报道，但抗氧化活性机制还未完全明确[1]。

研究现状

由上知，异绿原酸A的抗氧化活性机制尚不明确。相关研究者便利用斑马鱼模型，依据自由基一氧化氮(NO)和活性氧(ROS)的变化来探讨异绿原酸A的抗氧化机制。

方法：通过观察计数异绿原酸A对甲硝唑诱导的斑马鱼体内角质细胞减少的拮抗作用，从而初步考察异绿原酸A的抗氧化能力；通过观察异绿原酸A对脂多糖(LPS)诱导的斑马鱼炎症状态中体内NO和ROS含量及斑马鱼心率及卵黄囊面积的影响，从而确定异绿原酸A的抗氧化作用；通过观察异绿原酸A对硫酸铜诱导的斑马鱼炎症模型中巨噬细胞数量的变化，从而初步探讨异绿原酸A的抗炎活性。

结果：对照组中斑马鱼的皮肤荧光点数最多，加入甲硝唑后绝大部分荧光点消失，再加入异绿原酸A后，荧光点能够再次更多的被观察到，异绿原酸A(25,50,100μg/mL)组的相对抗氧化能力分别为60.4%，48.0%，44.3%。异绿原酸A能降低LPS诱导的炎症状态下斑马鱼体内NO升高，活性氧的生成，斑马鱼心率升高和卵黄囊水肿，此作用具有浓度依赖性。异绿原酸A在实验浓度范围(5-40μg/mL)内能使CuSO₄诱导的斑马鱼体内测线巨噬细胞数减少，且减少的数量随异绿原酸A浓度的升高而增多。

结论：以上结果说明，异绿原酸A有良好的抗氧化活性及抗炎活性，为相关中药的临床应用提供实验证据[2]。

应用前景

1）选择异绿原酸A作为所筛选抗病毒药物的代表，研究其对MDCK细胞感染CDV后TLR3及相关基因表达的影响，并测定了其对IFN-β分泌量的影响。结果表明异绿原酸A在体外对犬瘟热病毒感染具有治疗作用，但没有明显的灭活病毒作用和预防病毒感染作用。异绿原酸A可以通过影响TLR3信号通路发挥抗犬瘟热病毒感染MDCK细胞的作用。这些结果表明，异绿原酸A可以作为潜在抗犬瘟热病毒的物质[3]。 

2）以大肠杆菌为试验对象采用体外抑菌试验研究异绿原酸A的抑菌活性，结果发现异绿原酸A对大肠杆菌有抑菌活性，且异绿原酸A的抑菌效果强于绿原酸。异绿原酸A可破坏细菌细胞壁，膜的结构，导致细胞通透性增加，进而使细胞内容物外泄，异绿原酸A对细菌细胞壁，膜结构的破坏作用强于绿原酸。因此，异绿原酸A可当做抑菌产品生产的选择之一[4]。

3）异绿原酸A对胶原诱导型关节炎有较好的抗炎作用，其抗炎活性可能与降低NLRP3炎性复合体激活和NF-κB磷酸化表达有关[5]。

4）异绿原酸A在制备抑制PD1和PDL1蛋白之间相互作用药物中的应用属于医药领域。相关研究发现：异绿原酸A可以作为PD1/PDL1蛋白相互作用的小分子抑制剂。因为PD1/PDL1信号通路与免疫应答，肿瘤免疫逃逸密切相关，因此抑制PD1/PDL1信号通路的异常激活能够起到预防及治疗肿瘤的作用[6]。基于其化学性质，异绿原酸A可以应用于抑制瞬时感受器电位香草素受体3通道，治疗瘙痒。采用钙荧光方法和手动膜片钳技术证实：异绿原酸A确实对瞬时感受器电位香草素受体3通道的抑制作用。因此，异绿原酸A是瞬时感受器电位香草素受体3通道抑制剂，可用于制备抑制瞬时感受器电位香草素受体3通道治疗瘙痒的产品[7]。

5）研究发现异绿原酸A具有抑制亚硝化反应的能力，在抑制亚硝化反应方面，异绿原酸A的作用强于绿原酸与VC[8]。

参考文献

[1]侯彩平,何秋霞,韩利文,等.利用斑马鱼模型研究异绿原酸A的抗氧化和抗炎作用[C]//中国毒理学会中药与天然药物毒理专业委员会次（2016年）学术交流大会论文集.2016.

[2]周志娥,罗秋水,熊建华,等.绿原酸、异绿原酸A对大肠杆菌的抑菌机制[J].食品科技, 2014, 39(3):5.DOI:CNKI:SUN:SSPJ.0.2014-03-060.

[3]付运星.抗犬瘟热病毒中药化学成分筛选及异绿原酸A对MDCK细胞TLR3信号通路的影响[J].吉林大学, 2016.

[4]周志娥,罗秋水,熊建华,等.绿原酸、异绿原酸A对大肠杆菌的抑菌机制[J].食品科技, 2014, 39(3):5.DOI:CNKI:SUN:SSPJ.0.2014-03-060.

[5]刘杨.异绿原酸A抑制NLRP3炎性复合体/NF-κB活化减轻胶原诱导型关节炎大鼠炎症反应[J].中国药理学通报, 2019, 35(10):5.DOI:10.3969/j.issn.1001-1978.2019.10.016.

[6]董子钢,刘康栋,李侎泫,等.异绿原酸A在制备抑制PD1和PD-L1蛋白之间相互作用药物中的应用:CN202010376047.3[P].CN202010376047.3.

[7]王威,孙晓颖,王蓉蓉,等.异绿原酸A在制备抑制瞬时感受器电位香草素受体3通道治疗瘙痒产品中的应用:CN201811273634.9[P].CN109125312A.

[8]胡昭君,李冬梅,杜华英,等.绿原酸、异绿原酸A抑制亚硝化反应研究[J].中国食品学报, 2019, 19(5):7.DOI:10.16429/j.1009-7848.2019.05.009.