樱黄素的应用和制备

背景及概述^[1]

樱黄素(Prunetin)为5，4′-二羟基-7-甲氧基异黄酮，别名洋李婷、李属异黄酮，5，4′-二羟基-7-甲氧基异黄酮，熔点236-238℃ (甲醇)，分子式C₁₆H₁₂O₅，分子量284.26，樱黄素为李属异黄酮物质，具有抗炎、降血脂作用，同时还具有植物雌激素样作用。从植物中提取樱黄素工艺，很少有披露，多属研究型工艺或低含量提取物。如以昌都锦鸡儿为原料，采用95％乙醇浸泡提取，得到浸膏经硅胶柱反复分离得到包括樱黄素在内的15个化合物。还有以红车轴草为原料50％乙醇回流提取，提取液浓缩后乙酸乙酯萃取，再经硅胶柱和凝胶柱反复分离，得到包括樱黄素在内的8个化合物。现有制备樱黄素工艺，生产过程有大量的硅胶废 物产生，操作繁琐，重现性差。因此提供一种制备高纯度的樱黄素是必要的，可以更好地研究樱黄素的药理作用。

应用 ^[1-3]

樱黄素(Prunetin)广泛存在于玫瑰花、降香叶、槐叶等植物中，具有抗过敏、抗炎、抗肿瘤和保护心脑血管等多方面生物活性。如有研究开发了一种含红车轴草素和/或樱黄素的药物组合物，通过体内广泛分布的选择性雌激素受体调节剂作用，具有预防和治疗心血管系统和骨质疏松等作用。还用于制备治疗癌症和药物先导化合物的药物。可以通过口服、鼻吸入、直肠或胃肠外、局部用药的方式施用于需要这种治疗的患者，每日给药剂量为1mg-4mg/kg，可以一次或多次施用。制剂多样如固体制剂、液体制剂、霜剂、软膏剂、贴剂、喷雾剂、皮下植入剂等。尤其在肠道部位作用的缓释片剂、包衣片剂等。

制备^[1，3]

方法1：一种樱黄素的制备方法，采用高速逆流色谱法，可以快速高效得 到高纯度樱黄素。采用如下技术方案：

1)以昌都锦鸡儿为原料，粉碎，5-8倍量低碳醇超声提取，提取液减压浓缩，浓缩液加入适量水分散，加入聚酰胺树脂吸附，水、乙醇梯度洗脱，收集目标成分，减压浓缩后用乙 酸乙酯萃取，萃取液减压浓缩，得浓缩液；

2)将氯仿、甲醇、酸性水溶液在分液漏斗中充分混合，静置分层后，取上相做固定相，充满逆流色谱仪柱，开转主机，泵入下相做流动相，平衡后，由进样阀注进浓缩液，根据检 测器图谱，收集组分，回收试剂，干燥即得高纯度樱黄素。

方法2：以金雀异黄酮为原料，经碘甲烷甲基化合成樱黄素。优化条件为：N，N-二甲基甲酰胺溶剂、n（金雀异黄酮）∶n（碘甲烷）∶n（碳酸钾）=1.0∶4.0∶0.5、反应8 h、乙腈为重结晶溶剂，收率81.0%。放大后以85.1%的收率制得145.0 g 产品。

实验步骤为：

1）小试实验：取2.7 g （10.0 mmol） 金雀异黄酮于250 mL 圆底烧瓶中，加入0.7 g（5.0 mmol）无水碳酸钾，100mL N，N-二甲基甲酰胺（DMF），搅拌下滴加5.7 g（40.0 mmol）碘甲烷，密封，于40 kHz 超声波下，50℃反应，TLC 监测反应进程［展开剂v（乙酸乙酯）∶v（石油醚）=1∶3］。反应结束后，冷却，过滤，滤液加入100 mL DMF 稀释后慢慢倒入500 mL 冷水中，搅拌使固体析出完全，过滤得黄白色块状固体。固体于40℃真空干燥4 h，用乙腈重结晶，干燥后得2.3 g 黄白色固体粉末樱黄素，收率81.0%。

2）放大实验：取162.0 g （0.6 mol）金雀异黄酮于5 L 圆底烧瓶中，加入42.0 g （0.3 mol）无水碳酸钾，2.5 LDMF，搅拌下滴加342.0 g（2.4 mol）碘甲烷，密封，于40 kHz 超声波下，50℃反应，TLC 监测反应进程［展开剂v（乙酸乙酯）∶v（石油醚）=1∶3］。反应结束后，冷却，过滤，滤液加入2.5 L DMF 稀释后慢慢倒入7.5 L 冷水中，搅拌使固体析出完全，过滤得黄白色块状固体。固体于40℃真空干燥4 h，用乙腈重结晶，干燥后得145.0 g 黄白色固体粉末樱黄素，收率85.1%。m.p.241~243℃。1H NMR （DMSO），δ： 3.85 （s，3H，CH3），6.373 （d，1H，J =2.4 Hz，Ar-H），6.598（d，1H，J=2.4 Hz，Ar-H）； 6.835 （d，2H，J=8.4Hz，Ar-H），7.387 （d，2H，J=8.4 Hz，Ar-H），8.357 （s，1H，OH），9.597 （s，1H，OH），12.933（s，1H，=CH）。

主要参考资料

[1] CN201110151676.7 一种高纯度樱黄素的制备方法

[2] CN200910206250.X 一种含樱黄素的药物组合物及其在医药上的应用

[3] 金雀异黄酮甲基化合成樱黄素的工艺研究