c-Kit兔单克隆抗体

背景^[1-7]

c-Kit Rabbit Monoclonal Antibody（c-Kit兔单克隆抗体)是用c-Kit蛋白对小鼠进行系统免疫再取出脾脏细胞赛选出只分泌单一c-Kit蛋白抗体的B淋巴细胞，再将此B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行杂交。最后制得分泌单一c-Kit蛋白抗体和无限增值的杂交细胞。

肥大/干细胞生长因子受体（SCFR），也称为原癌基因c-Kit或酪氨酸蛋白激酶试剂盒或CD117，是一种受体酪氨酸激酶蛋白，在人类中由KIT基因编码。已发现该基因编码不同同种型的多种转录物变体。KIT最初由德国生物化学家Axel Ullrich于1987年描述为猫肉瘤病毒致癌基因v-kit的细胞同源物。CD117是在造血干细胞以及其他细胞类型的表面上表达的细胞因子受体。这种受体的改变形式可能与某些类型的癌症有关。CD117是一种受体酪氨酸激酶III型，它与干细胞因子（一种导致某些类型细胞生长的物质）结合，也被称为“钢因子”或“c-kit配体”。

当该受体与干细胞因子（SCF）结合时，它形成二聚体这会激活其内在的酪氨酸激酶活性，从而磷酸化并激活信号转导分子，从而在细胞中传播信号。通过CD117的信号传导在细胞存活，增殖和分化中起作用。该基因中的激活突变与胃肠道间质瘤，睾丸精原细胞瘤，肥大细胞病，黑色素瘤，急性髓性白血病相关，而失活突变与遗传缺陷花斑病有关。

CD117的抗体广泛用于免疫组织化学，以帮助区分组织学组织切片中的特定类型的肿瘤。它主要用于诊断GIST，其对CD117呈阳性，但对desmin和S-100等标记物呈阴性，其在平滑肌和神经肿瘤中呈阳性，具有相似的外观。在GIST中，CD117染色通常是细胞质的，沿着细胞膜具有更强的强化。CD117抗体还可用于诊断肥大细胞肿瘤和区分精原细胞瘤与胚胎癌。

研究应用^[8]

c-Kit兔单克隆抗体可用于研究胃肠道间质瘤中c-kit和PDGFRA基因突变的检测和临床诊断。

胃肠道间质瘤(GIST)中c-kit基因和PDGFRA基因的突变状况,为进一步的生物靶向治疗提供依据。方法用免疫组织化学EnVision法、聚合酶链反应(PCR)扩增和直接测序的方法,检测165例GISTc-kit基因9、11、13和17号外显子突变以及PDGFRA基因12和18号外显子突变。

结果病理组织学诊断的165例GIST病例中有155例(94%)免疫组织化学显示CD117阳性。在CD117阳性的GIST中,c-kit基因总突变率为76·1%(118/155):分别为11号外显子67·1%(104/155)、9号外显子7·1%(11/155)、13号外显子1·3%(2/155)和17号外显子0·6%(1/155)。绝大多数为杂合性突变,少数为纯合性突变。11号外显子的突变位点多集中在5′端的经典热点,其次为3′端的框内串联重复。

后者主要以核分裂象少的老年女性胃部病例多见。9号外显子突变代表一类发生在年轻男性体积较大的小肠病变。13号外显子发现一处新的突变点L641P。PDGFRA基因突变见于50%(5/10)CD117阴性病例,均为18号外显子突变,包括常见的D842V点突变和一个框内843~846处IMHD缺失伴有S847T的新突变。

PDGFRA基因突变多见于发生在后腹膜/网膜的具有高度侵袭危险性的病例。结论中国GIST病例大多数存在c-kit基因和PDGFRA基因的突变,且在基因突变类型和肿瘤原发部位间有非随机的联系。除了发现几个新的突变形式外,国人的GIST似乎和西方国家有些不同的突变特点。靶向治疗需要基因突变分型的启示和指导。

参考文献

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