Salirasib (Rho抑制剂)

背景^[1-7]

Salirasib(Rho抑制剂)是一种有效的竞争性prenylated protein methyltransferase(PPMTase)抑制剂，Ki为2.6μM，其抑制Ras甲基化。Salirasib抑制人Ha-ras转化的Rat1细胞生长，这与它们对PPMTase的抑制良好相关。Salirasib抑制Rat-1成纤维细胞，Ras转化的Rat-1，以及B16黑色素瘤细胞中Ras甲基化。

Salirasib也会降低细胞膜中Ras水平，并抑制Ras依赖性细胞生长，其独立于甲基化，但是由Ras-Raf通讯调节。在Ras转化的EJ细胞中，Salirasib干扰Raf-1和MAPK活化，并抑制DNA合成。在Panc-1异种移植的裸鼠体内，Salirasib(5 mg/kg i.p.)显著抑制肿瘤生长，而没有全身毒性。在雄性Wistar大鼠体内，Salirasib(5 mg/kg i.p.)显著抑制硫代乙酰胺诱导的肝硬化。

在先天性肌营养不良的dy(2J)/dy(2J)小鼠模型中，Salirasib(5 mg/kg i.p.)减弱纤维化，并提高肌肉力量。Ras是相关蛋白家族，其在所有动物细胞谱系和器官中表达。所有Ras蛋白家族成员都属于一类称为小GTP酶的蛋白质，并参与细胞内的信号传递（细胞信号转导）。Ras是Ras蛋白质超家族的典型成员，它们都与3D结构相关并调节多种细胞行为。当Ras通过输入信号“打开”时，它随后打开其他蛋白质，最终打开参与细胞生长，分化和存活的基因。ras基因的突变可导致永久激活的Ras蛋白的产生。结果，即使在没有输入信号的情况下，这也可能在电池内部引起意外和过度活跃的信号。

由于这些信号导致细胞生长和分裂，过度活跃的Ras信号传导最终可能导致癌症。人类癌症中的3种Ras基因（HRas，KRas和NRas）是人类癌症中最常见的致癌基因;永久激活Ras的突变在所有人类肿瘤的20％至25％中发现，在某些类型的癌症（例如，胰腺癌）中发现高达90％。出于这个原因，正在研究Ras抑制剂作为治疗癌症和其他Ras过度表达的疾病。

研究应用^[8]

Salirasib (Rho抑制剂)可用于研究抑制自嗜增强Salirasib诱导的骨肉瘤细胞凋亡。Salirasib(FTS)是否能诱导肿瘤细胞产生自嗜,以及抑制自嗜能否增强FTS诱导的细胞凋亡。方法Western检测LC 3-II、Caspase-3和Survivin蛋白的表达,台盼蓝染色检测细胞活性,流式细胞技术检测细胞凋亡。

结果FTS在骨肉瘤细胞系MG 63和U 2-OS中均诱导了LC 3-II蛋白的表达,且呈剂量依赖关系。与单独FTS处理相比,联合氯喹治疗明显增强了LC 3-II蛋白的水平。台盼蓝实验显示,单独FTS治疗已明显抑制了细胞的生长,在联合氯喹的情况下,FTS对细胞的抑制更加明显。流式细胞技术显示,与单独治疗组相比,联合治疗使处于Sub-G 1期的细胞数明显增多。

Western显示,联合治疗明显增强了Caspase-3的水平,减弱了Survivin蛋白的表达。结论FTS能诱导骨肉瘤细胞系MG 63和U 2-OS中自嗜的发生,并对细胞的生长起抑制作用。氯喹抑制自嗜后,能增强FTS对细胞的生长抑制及依赖Caspase-3的细胞凋亡,这有望成为一种新的肿瘤治疗途径。

参考文献

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