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重组猴EOTAXIN/CCL11

发布日期:2020/1/8 8:29:48

背景[1-7]

Recombinant Rhesus Macaque EotaxinCCL11(重组猴CCL11)是将猴CCL11基因与大肠杆菌重组,再诱导重组大肠杆菌表达目的蛋白。实验主要用于CCL11相关研究的免疫组化和WB等实验。CCL11也称为嗜酸性粒细胞趋化蛋白和趋化因子-1是一种蛋白,在人中由编码CCL11基因。该基因在三个外显子上编码,位于17号染色体上。

CCL11是属于CC趋化因子家族的小细胞因子。CCL11通过诱导其趋化性选择性地募集嗜酸性粒细胞,因此涉及过敏反应。CCL11的作用是通过其与称为趋化因子受体的G蛋白连接受体的结合来介导的。CCL11为配体的趋化因子受体包括CCR2,CCR3和CCR5。然而,已发现嗜酸细胞活化趋化因子-1(CCL11)对其受体具有高度选择性,使得它们对不表达CCR3的嗜中性粒细胞和单核细胞无活性。血浆中CCL11水平升高与小鼠和人类衰老有关。

此外,已经证明,将年轻小鼠暴露于CCL11或老年小鼠的血浆会降低其对行为任务的神经发生和认知表现,这些行为任务被认为依赖于海马中的神经发生。与过去的使用者和从未使用过的使用者相比,目前大麻使用者的CCL11血浆浓度更高。CCL11在精神分裂症患者中的浓度也较高;大麻是精神分裂症的一个已知触发因素。它也是CTE或酒醉综合症的生物标志物。在骨骼炎症期间,CCL11和CCR3上调。这与破骨细胞活性的增加有关。

研究应用[8][9]

1.用于研究血清CCL11水平对胃癌患者的诊断意义

血清CC修饰趋化因子11(C-C motif chemokine 11,CCL11)水平对胃癌患者的诊断和预后意义。方法采用ELISA检测60例胃癌患者及69例健康受试者血清中CCL11表达水平,分析CCL11水平与胃癌临床病理特征及预后的相关性。

结果胃癌患者血清中CCL11表达水平显著高于健康对照组[(74.51±16.65)pg/ml vs(16.79±5.52)pg/ml,t=9.781,P<0.001];临床分析提示,血清CCL11在高TNM分期胃癌患者中表达水平显著升高[Ⅰ+Ⅱ(71.29±15.47)pg/ml vsⅢ+IV(78.02±17.04)pg/ml,t=3.172,P=0.007],而血清CCL11水平与性别、年龄、病理分级、阳性淋巴结比率、肿瘤大小以及神经和血管周围浸润无显著相关(P>0.05);CCL11水平与胃癌患者预后也无显著相关(P>0.05)。

结论血清CCL11可以作为一个提示胃癌风险和早期诊断的简易生物标志物,但由于本研究中病例数有限,需要更大的队列研究来验证血清CCL11对胃癌患者的诊断价值。

2.用于研究趋化因子CCL11、D-二聚体水平在荨麻疹中的变化及其意义

讨荨麻疹患者血清趋化因子CCL11、血浆D-二聚体水平变化及其与疾病发生发展之间的关系。方法选择51例急性荨麻疹(Acute Urticaria,AU)、慢性荨麻疹(Chronic Urticaria,CU)患者,根据病情分为轻、中、重度组,并挑选健康成人作为正常对照组。采用酶联免疫吸附试验检测3组荨麻疹患者以及正常对照组血清CCL11及血浆D-二聚体水平,并分析其与荨麻疹症状评分(Urticaria Activity Score,UAS)的相关性。

结果CCL11在轻度、中度和重度荨麻疹中的水平分别是20.12(15.40~23.76)、23.85(11.70~28.25)、18.84(13.10~39.31),组间比较差异无统计学意义(P=0.95)。D-二聚体在轻度、中度和重度荨麻疹中的水平分别为935.00(580.00~3 360.00)、2 225.00(850.00~65510.00)、3 865.00(1 235.00~7 820.00),重度和轻度组间比较差异有统计学意义(P=0.04),血清CCL11水平与D-二聚体未见显著相关(r=-0.078,P=0.594)。

结论趋化因子CCL11、D-二聚体水平在急、慢性荨麻疹均升高,提示两者可能参与疾病发生,且D-二聚体升高提示疾病活动,可作为病情的监测指标。

参考文献

[1] Kitaura M,Nakajima T,Imai T,Harada S,Combadiere C,Tiffany HL,Murphy PM,Yoshie O(Mar 1996)."Molecular cloning of human eotaxin,an eosinophil-selective CC chemokine,and identification of a specific eosinophil eotaxin receptor,CC chemokine receptor 3".The Journal of Biological Chemistry.271(13):7725–30.

[2] Hein H,Schlüter C,Kulke R,Christophers E,Schröder JM,Bartels J(Aug 1997)."Genomic organization,sequence,and transcriptional regulation of the human eotaxin gene".Biochemical and Biophysical Research Communications.237(3):537–42.

[3] Jose PJ,Griffiths-Johnson DA,Collins PD,Walsh DT,Moqbel R,Totty NF,Truong O,Hsuan JJ,Williams TJ(Mar 1994)."Eotaxin:a potent eosinophil chemoattractant cytokine detected in a guinea pig model of allergic airways inflammation".The Journal of Experimental Medicine.179(3):881–7.

[4] Ponath PD,Qin S,Ringler DJ,Clark-Lewis I,Wang J,Kassam N,Smith H,Shi X,Gonzalo JA,Newman W,Gutierrez-Ramos JC,Mackay CR(Feb 1996).

[5] "Cloning of the human eosinophil chemoattractant,eotaxin.Expression,receptor binding,and functional properties suggest a mechanism for the selective recruitment of eosinophils".The Journal of Clinical Investigation.97(3):604–12.

[6] Garcia-Zepeda EA,Rothenberg ME,Ownbey RT,Celestin J,Leder P,Luster AD(Apr 1996)."Human eotaxin is a specific chemoattractant for eosinophil cells and provides a new mechanism to explain tissue eosinophilia".Nature Medicine.2(4):449–56.

[7] Ogilvie P,Bardi G,Clark-Lewis I,Baggiolini M,Uguccioni M(Apr 2001)."Eotaxin is a natural antagonist for CCR2 and an agonist for CCR5".Blood.97(7):1920–4.

[8] 张涛,张波,王军阳.血清CCL11水平对胃癌患者的诊断意义[J].海南医学,2015,26(06):838-840.

[9] 路涛,司梦雅,邹金波,章淑平,陈晶,焦晓阳.趋化因子CCL11、D-二聚体水平在荨麻疹中的变化及其意义[J].中国热带医学,2016,16(06):594-596.

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