芹糖异甘草苷的检测

背景及概述^[1][2]

甘草为豆科植物甘草(GlycyrrhizauralensisFisch.)、胀果甘草（GlycyrrhizainflateBat.）或光果甘草（GlycyrrhizaglabraL.）的干燥根及根茎。收载于中国药典2010年版（一部），味甘，平；归心、肺、脾、胃经。具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药的功效。主要产于内蒙古、甘肃、新疆、陕西、东北、山西等地区。主要有效成分为皂苷类和黄酮类化合物。

甘草黄酮类的代表成分主要有甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素等，现代研究表明，甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷等为代表的甘草总黄酮类，具有抗心肌缺血以及抑制艾滋病病毒增殖的作用。

结构^[1]

芹糖异甘草苷

检测^[3]

基于甘草相关成分的药理学研究报道,单纯依据甘草苷及甘草酸的含量指标不能全面反映甘草的质量,因甘草中的其他黄酮类成分也具明显作用。采用高效液相色谱方法同时测定了甘草中的芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷和甘草酸的含量,较全面反映了甘草药效的物质基础。

对流动相及检测波长进行了考察,比较了甲醇-水、乙腈-水及乙腈-1%～3%醋酸水系统,乙腈-水相对于甲醇-水系统分离效果较好,加入醋酸后进一步提高分离效果,最终选择乙腈-3%醋酸水系统作为流动相。采用DAD检测器,对样品进行全波长扫描,比较各波长检测结果,发现在本实验选定波长下各成分普遍有较大吸收,最终选择254nm对样品进行检测。

制备^[2]

取干燥的甘草5.0kg，分别用8倍量和6倍量的95%乙醇水溶液回流提取2次，每次1h。合并2次提取液，减压浓缩到一定浓度后，置于装有D101大孔树脂的色谱柱，分别用水和40%、95%乙醇洗脱，收集40%乙醇洗脱液，减压浓缩到适宜浓度后，进行半制备液相色谱分离，乙腈-水（10∶90→100∶0）梯度洗脱，得到化合物1（3.9mg）、2（4.6mg）、3（3.3mg）和4（3.0mg）。收集95%乙醇洗脱液，经ODS中压柱色谱进一步分离，使用55%甲醇和纯甲醇溶剂洗脱。收集纯甲醇洗脱液进行减压浓缩后冷冻干燥，得到干燥粉末（28g）。取0.43g干燥粉末用甲醇溶解，半制备液相色谱分离，乙腈-水得到芹糖异甘草苷（2.7mg）。

主要参考资料

[1]杨燕云, 陈连庚, 许亮, & 张振秋. (2014). 白芍甘草药对中芹糖异甘草苷和异甘草苷在大鼠体内药代动力学研究. 辽宁中医药大学学报(7), 26-29.

[2]刘雅茜, 王梦月, 史海明, 孙启时, & 李晓波. (2008). 高效液相色谱法测定甘草及其炮制品中5种活性成分的含量. 中国药学杂志, V43(16), 1268-1271.

[3]张友波, 徐嵬, 杨秀伟, 杨鑫宝, 王文全, & 刘亚明. (2013). Rp-hplc法同时测定不同产地甘草中9个主要成分的含量. 药物分析杂志(2), 214-219.