羟基-α-山椒素的制备与应用

花椒是芸香科(Rutaceae)花椒属植物，作为我国传统的调味品及中药材有着非常悠久的历史，其果实具有浓郁的香气和辛麻味，兼具“镇膻解腥”的作用，是我国的“八大调味品”之一。辛麻味是花椒最主要的风味特征，也是评价其品质优劣的最重要指标。羟基-α-山椒素是花椒产生麻味作用机制最主要的活性化合物。

应用

在花椒的应用中，最主要的仍然是它的风味，花椒中不饱和脂肪酰胺类化合物是花椒辛麻味的主要来源。这些物质主要包括α-山椒素、β-山椒素、γ-山椒素、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素和羟基-ε-山椒素等三十余种。其中以下式所示的羟基-α-山椒素(1)和羟基-β-山椒素(2)含量最高，是花椒属植物中特异性含有的活性成分。其中，羟基-α-山椒素具有强烈的麻刺感和麻木感，是花椒产生麻味作用机制最主要的活性化合物。

制备方法

一种羟基-α-山椒素单体的制备方法，其特征在于：它包括如下步骤：

(1)花椒提取物总浸膏的制备：用低级醇作为提取溶剂对花椒进行浸提，得浸提液，将浸提液减压浓缩，得花椒提取物总浸膏；

(2)羟基山椒素混合物的富集：将步骤(1)所得的花椒提取物总浸膏用水稀释，采用乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯萃取液，减压浓缩得山椒素混合物浸膏，将山椒素混合物浸膏经过柱层析，收集洗脱液浓缩得羟基山椒素混合物浸膏；

(3)羟基-α-山椒素的富集：将步骤(2)所得的羟基山椒素混合物浸膏溶于有机溶剂中，冷冻结晶，过滤收集羟基山椒素混合物母液；

(4)羟基-α-山椒素的分离纯化：将步骤(3)所得的羟基山椒素混合物母液经过RP-18反相硅胶柱层析，用丙酮水溶液洗脱，得羟基-α-山椒素单体丙酮水溶液，加入NaCl至不再有沉淀析出，过滤，滤液减压浓缩后通过非极性聚苯乙烯型大孔吸附树脂柱层析得到羟基-α-山椒素溶液，减压浓缩，干燥即得；

步骤(3)中，所述有机溶剂为石油醚和丙酮混合溶液或者乙酸乙酯；所述石油醚和丙酮混合溶液中，石油醚和丙酮体积比为1：1～2；

步骤(4)中，所述丙酮水溶液为丙酮和AgNO3水溶液的混合溶液；所述丙酮和AgNO3水溶液的体积比为45:55；所述AgNO3水溶液的浓度为1.5～2％；

步骤(4)中，所述过滤后减压浓缩的温度为40℃。