2-氨基-5-氯苯甲酸在药物合成中的应用与制备

2-氨基-5-氯苯甲酸又称邻氨基苯甲酸，它的经济重要性在于其完善的抗炎活性，并用作生产染料、颜料和糖精的中间体。它及其酯用于制备香水、药品和紫外线吸收剂，以及金属的缓蚀剂和酱油中的霉菌抑制剂。2-氨基-5-氯苯甲酸在药物和染料合成中有着重要应用，还被广泛应用于荧光标记物、抑制剂、先导化合物的开发。^[1]

应用

地西泮D₅中间体的合成^[2]

地西泮( Diazepam)，又名安定，化学名为7-氯-1-甲基-5-苯基-1,3-二氢-1 ,4-苯并二氮杂卓-2-酮，是一种重要的苯二氨杂卓类中枢神经抑制药，可对中枢神经系统不同部位产生抑制效果，具有镇静，抗焦虑、抗癫痫以及中枢性肌肉松弛作用。但随着Diazepam用量增大，临床表现可由轻度的镇静到催眠甚至昏迷。因该类药物引发的投毒、自杀、误服等刑事案件时有发生。这对公安司法鉴定部门对涉及该类药物的检测提出了较高要求。为了确保检测方法的准确和可靠，需在检测时添加内标物。地西泮氘代物(2)是该类药物的内标物。

杜鸿雁等人以2-氨基-5-氯苯甲酸(3)为原料，经环化反应制得6-氯-2-甲基-四氢苯并[d][1,3]嗯嗪4-酮(4)；4与氘代苯基溴化镁发生格氏反应,将氘原子引人N-(2-五氘代苯甲酰基4氯苯基)乙酰胺(5)中；5在酸性条件下水解制得(2-氨基-5-氯苯基)(五氘代苯基)甲酮(6)；6依次经酰化和环化反应合成了1。

6-氯喹唑啉类PAK4抑制剂的设计合成^[3]

PAKs(p21活化激酶)是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，属于STE20家族。PAKs是Rho家族鸟苷三磷酸酶的下游靶蛋白如，在Ras- Cdc42/Racl PAKs信号通路中，PAKs作为Cdc42和Racl下游的主要效应器2，通过调控细胞内MAPK、AKT和WNT等多条重要信号通路，调节细胞骨架重组、细胞迁移运动、细胞凋亡、有丝分裂、细胞分化等多种生物学功能。PAKs除了参与调节细胞正常的生理活动，还与多种疾病特别是肿瘤的发生发展密切相关。PAKs共有6个家族成员(PAK1~PAK6)，根据其结构和活化方式的不同分为两类：I类PAKs(PAK1、PAK2、PAK3)和I类PAKs(PAK4、PAK5、PAK6)。PAK4是II类PAKs的代表，PAK4在超过70%的人肿瘤细胞系中高表达，例如：乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、结肠癌、胃癌、子宫癌、口腔鳞状细胞癌等。PAK4可以影响下游多种与细胞周期、迁移、侵袭和凋亡相关的蛋白，从而引起肿瘤细胞的分化异常、血管生成、增殖等。通过抑制肿瘤细胞内PAKs的异常活性，特别是PAK4的活性,有望抑制肿瘤细胞的侵袭、转移、过度增殖和血管生成，促进肿瘤细胞的凋亡，进而用于肿瘤的治疗。因此,PAK4已成为潜在的肿瘤治疗的靶点。

沈阳药科大学陈以轩题组设计合成6-氯喹唑啉类p21活化激酶4(PAK4)抑制剂，并对其酶抑制活性进行评价。方法以2-氨基-5-氯苯甲酸为起始原料，经过环合反应、氯代反应、两次芳香亲核取代反应制得6-氯-2-胺基-4-[(3,5-二(三氟甲基))苄基]胺基喹唑啉类化合物( A类)；以取代的甲酸乙酯为起始原料，经过Claisen缩合反应、环合反应、取代反应制得6-氯-2-胺基-4(1H-3-吡唑基)胺基喹唑啉类化合物(B类)。采用HTRF技术测试目标化合物对PAK4的体外酶抑制活性。结果与结论合成了22个6-氣喹唑啉类衍生物，目标化合物的结构经ESI-MS和1H-NMR谱确证；初步体外酶活性测试结果表明，A类化合物的活性弱于先导化合物CI-02(N⁴-3,5-双三氟甲基苄基-N²-环已基喹唑啉-2,4-二胺)，B类化合物的活性优于先导化合物C1-02，其中有8个化合物在1μmol·L-1时对PAK4的抑制率达到50%以上，具有进一步研究的价值。2-环己基喹唑啉-2，4-二胺(Cl-02，图2)。研究表明，LCH-7749944可以使胃癌细胞G1期向S期的转化减少，从而抑制其增殖，还可以阻碍胃癌细胞伪足的生成，降低其迁移和侵袭的能力。以化合物Cl-02为先导化合物，对其进行结构改造，设计并合成了A和B两类6-氯喹唑啉类衍生物(图2)。

制备方法

邻氨基苯酸(40.0g，0.3mol)经摇匀加入充分冷却的磺酰氯(52.8g，0.39mol)和乙醚(600ml)的混合物中，放入装有回流冷凝器的烧瓶中。反应完后减压蒸除乙醚和磺酰氯，用水洗涤残渣，抽滤，滤液用800ml 8%盐酸在60℃下酸化2小时，再次过滤得到5-氯邻氨基苯甲酸固体。^[4]

光谱学信息

红外：IR (film) 3500, 3387, 2924, 2852, 1660, 1585, 1481, 1419, 1288, 1230, 1155, 1132, 881, 810, 704, 650 cm^-1. ^[1]

核磁共振（NMR）：^[1]

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.62 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.24 (dd, J = 8.9, 2.6 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.9 Hz, 1H).

¹³C NMR (101 MHz, DMSO-d₆) δ 168.4, 150.3, 133.5, 129.8, 118.3, 117.5, 110.5.

参考文献

[1] Li, Y.; Wang, Y.; Yang, T.; Lin, Z.; Jiang, X. Selenium-Catalyzed Intramolecular Atom- and Redox-Economical Transformation of o-Nitrotoluenes into Anthranilic Acids. Green Chem. 2021, 23, 2986– 2991.

[2] 杜鸿雁, 宋歌, 董颖. 等. 地西泮-D5中间体的简便合成[J]. 合成化学, 2017, 25(12): 1017-1019.

[3] 陈以轩, 于思佳, 赵相欣. 等. 6-氯喹唑啉类PAK4抑制剂的设计合成及生物活性研究[J]. 中国药物化学杂志, 2019(6), 29(3): 186-193.

[4] Endicott, M. M.; Alden, B.W.; Sherrill, M. L. Quinazoline Derivatives.1 III. The Synthesis of 4-(3'-Diethylaminopropoxy)-6-chloroquinazoline (SN 12,254)2. J. Am. Chem. Soc. 1946, 68, 7, 1303–1304.