古伦宾的制备

背景及概述[1-3]

古伦宾(Columbin)，又名青牛胆苦素、咖伦宾、黄藤内酯，是从金果榄中分离得到的二萜类成分。分子式C20H22O6，分子量358.38，极苦的针状结晶(甲醇)，mp.195℃。几乎不溶于水，1g溶于30ml丙酮、50ml乙酸乙酯、75ml甲醇，溶于氯仿和二氯甲烷。药理研究表明：古伦宾具有显著的抗炎活性，并且呈现量效关系：能显著的通过抑制结肠囊泡中的细胞再生 来抑制氧化偶氮甲烷诱导的大鼠结肠癌；能够抑制眼镜蛇毒酸性磷脂酶A2催化的血红细胞壳的水解作用；能够抑制布氏锥虫血流中胆固醇的摄入；能够影响肝药代谢酶来调节由环己巴比妥钠或乌拉坦和α‑氯醛糖混合物诱导的大鼠睡眠时间。口服古伦宾能够剂量依赖的降低 肝‑7‑alkoxycoumarin‑O‑dealkylas(ACD)，ACD反映了P450的活性。任平等还通过实验发现咖伦宾具有酶促动力学代谢特性。不同产地药材质量存在明显差异，见表2，相关制剂有必要对生产投料药材来源进行控制。

制备^[1]

古伦宾的提取技术主要是乙醚索氏提取，该方法所得 产品纯度低，溶剂毒性较大。李泓波采用甲醇回流提取、溶剂萃取，反复常压、加压、正相及反相硅胶柱层析分离；史琪荣采用95％乙醇回流提取、氯仿和正丁醇萃取、反复硅胶柱层 析(干法)、ODS‑C18柱层析、半制备液相、PharmadexLH‑20等色谱技术、重结晶等纯化方法得到古伦宾。上述两种工艺存在提取率低，工艺复杂、有机溶剂用量大、环境污染严重、生产周期短等不足。

CN201110026209.1提供一种古伦宾的提取方法，采用超临界CO₂提取、大孔树脂柱层析、重结晶等步骤，从金果榄中提取分离纯化得到较高纯度的古伦宾，该方法提取的古伦宾纯度高、环境污染少、得率高、成本低，可扩大规模化生产。

本发明是通过以下技术方案实现的：一种古伦宾的提取方法，其特征在于将金果榄块根粉碎成粗粉，投入到超临界CO₂萃取釜中，再加入适量有机溶剂作为夹带剂，通入CO₂作为提取介质，在萃取压力15‑30MPa，温 度30‑45℃条件下进行萃取，经1‑4小时萃取后解析，解析压力5‑10MPa，温度50‑60℃，收集萃取物，将萃取物加入到大孔吸附树脂柱中，流速1.0‑2.0BV/h，先用2‑5倍柱体积的水洗，弃去水洗液，再用3‑6倍柱体积的20‑30％乙醇洗脱，最后用40‑100％乙醇洗脱，收集40‑100％ 乙醇洗脱液，浓缩至小体积，结晶，乙醇重结晶。

举例：

将金果榄块根药材粉碎成20目粗粉，取2kg投入超临界萃取罐内，加入体积百分比为 80％的丙酮溶液作为夹带剂，加入量为0.12kg(原料重量的6％)；在萃取压力18.5MPa、萃取温度32℃、CO₂流量18L/h的条件下萃取1小时；控制解析罐的压力为5.4MPa，温度56℃，分离得萃取物；用1倍量60℃热水溶解萃取物，上ADS‑7大孔吸附树脂柱，吸附流速 1.0‑2.0BV/h，先用2倍柱体积的水洗，弃去水洗液；再用4倍柱体积50％乙醇洗脱，最后用90％乙醇洗脱，收集90％乙醇洗脱液，将上述洗脱液减压浓缩至小体积，结晶，再用乙醇重结晶2次，冷冻干燥得产品20.8g。经HPLC分析，古伦宾纯度为98.6％。

药代动力学^[2]

古伦宾经口服给药后其药-时曲线如图 3 所示。采用非房室模型方法估算， 经 WinNonlin 3.3 软件拟合数据后可获得古伦宾的药代动力学参数，古伦宾通过口服的吸收是很快速的。本研究结果提示，古伦宾通过口服可以到达快速吸收的效果。但口服古伦宾生物利用度仅为 14.08%，利用度较低，可能是肝脏首过效应导致古伦宾较低的生物利用度。

其他应用 ^[4]

CN200610023481.3实验研究证明，古伦宾具有抗炎，镇痛，抑制胃窦平 滑肌痉挛，保护胃粘膜急性损伤的作用。古伦宾可以作为制备预防和治疗急慢性炎 症、胃痉挛、胃痛及相关疾病的药物的有效成分。古伦宾加上一种或多种药学上可以接受的载体可以制备成 临床治疗的药物，用于治疗急、慢性炎症，如：上呼吸道感染，扁桃腺炎，咽喉炎，胃肠炎，肺炎，气管炎，静脉炎等，治疗胃痉挛、胃痛等疾病。上文所述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，例如：稀释剂、赋形剂如水等，填充剂如淀粉、蔗糖等，粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂如甘油；崩解剂如琼脂、碳酸钙或碳酸氢钠，吸收促进剂如季铵化合物，表面活性剂如十六烷醇，吸附载体如高岭土或皂粘土，润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙、镁或聚乙二醇等。另外还可以在组合物中加入其它辅剂如香味剂、甜味剂等。古伦宾可以通过口服，经皮、鼻吸入，直肠、肠胃外、静脉或肌肉给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂、胶囊等，制成液体制剂如水或油悬浮剂或其它液体制剂如糖浆、酏剂等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、水或油性悬浮剂等。优选的形式是片剂、包衣片剂、胶囊、栓剂、鼻喷雾剂和注射剂。

主要参考资料

[1] CN201110026209.1 一种古伦宾的提取方法

[2]曾浩涛.金果榄中古伦宾在家兔体内的药动学研究[J].中国当代医药,2018,25(26):13-17.

[3]李一圣,李文周,卫平,邱书奇.不同产地金果榄药材中古伦宾含量测定[J].药学研究,2016,35(06):328-330.

 [4] CN200610023481.3 古伦宾、异古伦宾、去氧黄藤苦素在制备抗炎、抑制胃痉挛、胃痛药物中的应用