碳酸铵对柑橘酸腐病菌的抑制效果及作用机制

目前在生产实践中，主要采用化学杀菌剂如抑霉唑、咪鲜胺等，虽能有效控制柑橘青绿霉病菌，但对酸腐病菌抑制效果不佳；并且病菌易产生抗药性、使用浓度较高，造成环境污染、对人体健康产生危害。因此，研究者们在探寻替代化学杀菌剂控制酸腐的方法。已经有报道表明，酸腐病菌可以通过合适的冷藏条件，应用拮抗酵母，以及挥发性精油来控制，但这些处理不能完全有效降低酸腐病菌侵染。

有关课题组经研究发现，碳酸铵能有效抑制意大利青霉孢子萌发和菌丝生长，并能有效控制由意大利青霉引起的柑橘腐烂。

1、碳酸铵处理对病原菌孢子萌发及芽管伸长的影响

如图1所示，低质量浓度碳酸铵处理对酸腐病菌孢子萌发率影响较小，在质量浓度达到0.6 g/L时，萌发率仍然达到88.86%，而在质量浓度0.8 g/L时，病菌孢子萌发完全受到抑制。在低质量浓度下，碳酸铵处理对芽管伸长有显著影响，在0.1 g/L时，平均芽管长度为63.95 μm，显著低于对照88.75 μm；在0.6 g/L时，芽管长度仅为对照的26%。

2、碳酸铵处理对病原菌菌丝生长的影响

碳酸铵显著影响酸腐病菌菌丝生长（图2），随培养时间延长，未处理组菌落直径逐渐增加，第5天达到83.08 mm；0.4 g/L碳酸铵处理组为对照组的56%，0.8 g/L碳酸铵处理培养5 d，菌落直径没有增加，表明在该质量浓度条件下菌丝生长完全抑制。

3、碳酸铵处理对酸腐病菌细胞膜完整性的影响

PI染色酸腐菌菌丝结构完整性表明（图3），对照菌丝暗场中几乎没有红色荧光，而0.8 g/L碳酸铵处理菌丝12 h后，暗场下有微弱的红色荧光，而处理24 h后在暗场下表现出了强烈的红色荧光。这表明随着碳酸铵的处理时间延长，酸腐病菌菌丝细胞膜完整性受损程度也在增加。

进一步用电导率检测膜通透性的改变（图4），结果表明，对照在6 h的相对渗透率维持在10%以下，48 h后相对渗透率为18.81%，碳酸铵处理的前1 h病原菌的膜相对渗透率急剧上升，且与对照相比具有显著性差异，而后几乎保持平稳至6 h，说明菌丝体内的离子发生一定程度的泄漏，但仍然维持较强的膜稳定性；而处理12、24 h后，膜相对渗透率进一步显著增大，0.8 g/L碳酸铵处理24 h，相对渗透率增大到45.86%，48 h则达到53.36%。表明病原菌菌丝受碳酸铵处理时间的延长，膜受损更加严重。

4、碳酸铵处理对人工接种病原菌夏橙果实腐烂的影响

采用人工接种的方法研究碳酸铵对夏橙酸腐病的抑制作用（图5）。结果显示，接种酸腐病菌后2 d，夏橙果实表现明显的发病，菌斑直径达到9 mm，接种后5 d，菌斑直径扩大到47 mm；20 g/L碳酸铵处理的果实，菌斑直径显著低于对照，而40 g/L碳酸铵处理果实，常温下贮藏5 d，均未表现发病，表明该质量浓度条件下碳酸铵处理可有效控制夏橙酸腐病的发生。

结 论

综上，碳酸铵对柑橘酸腐病菌的孢子萌发及菌丝生长具有较强的抑制作用；其通过抑制菌丝呼吸、孢子活性影响膜完整性和渗透性，干扰菌丝代谢，从而达到抑菌效果。碳酸铵有望进一步开发为防治柑橘酸腐病的方法。