布洛芬及酮基布洛芬对映异构体的拆分方法

背景技术

2-取代芳基丙酸类衍生物是一类非甾体抗炎镇痛消炎药或者是合成非甾体抗炎镇痛消炎药的关键中间体。这类药物临床已广泛应用以及进入临床试验的包括萘普生、布洛芬、酮洛芬、氟比洛芬等二十余种。除了S-萘普生，其它2-芳基丙酸类非甾体类抗炎药都以消旋体形式上市。这类药物之所以成为密集研究的焦点，一是由于它们在临床上的广泛应用，另一则是由于它们存在许多共同点的同时，其对映体又存在着不同的生物学特性。生物学行为的不同包括立体选择性的蛋白结合，葡萄糖醛酸化和代谢，以及这类药物中一部分R-对映体向S-对映体的单向转化。这些不同的生物学特性也影响了药物的药效学和药动学，因此，对2-取代-芳基丙酸衍生物对映体的拆分显得尤为重要。

目前，2-芳基丙酸类药物对映体的获得研究国内外已有很多报道，主要有不对称合成法、生物法以及色谱法等。不对称合成法是获得手性药物的理想方法，该方法采用不对称催化剂进行诱导反应，再经过一系列的后续处理，以得到较为纯净的对映体。2-芳基丙酸类物质采用不对称合成法可得到较为纯净的单一对映体，该方法是早期单一手性2-芳基丙酸类物质获取的主要方法。采用该方法获取的单一对映体相对纯度较高，但该方法制备过程复杂，样品后续处理副产物难以去除，且价格较为昂贵。

生物拆分法，通常是采用微生物菌体、酶或者动植物组织等生物材料与外消旋手性药物作用得到单一对映体的方法。该方法主要利用酶等生物材料的单一立体选择性，实质是酶催化的动力学拆分。整个反应过程时间较长，反应条件要求较高，且后续处理较为复杂。

目前常用于2-芳基丙酸类物质的色谱拆分方法主要有毛细管电泳法、高速逆流色谱法以及高效液相色谱法。毛细管电泳法分离速度快，但分离量较小。现阶段采用高速逆流色谱法拆分2-芳基丙酸类物质的文献相对较少，该方法需寻求合适的溶剂体系，且大多选择环糊精系列物质作为手性添加剂对2-取代芳基丙酸衍生物进行拆分，成本较大，较为复杂。

高效液相色谱法拆分2-取代芳基丙酸衍生物，主要有固定相法和流动相添加法，前者采用手性材料作为固定相，价格昂贵，成本较高，后者在流动相中加入手性试剂，如环糊精等，后处理较为复杂，难以拿到较为纯净的单一对映体。

发明内容

本发明目的是提供一种布洛芬及酮基布洛芬对映异构体的拆分方法，解决了流动相添加法后处理复杂以及手性固定相法较为昂贵等问题。本发明采用1R,2S,5R-(-)-薄荷醇作为手性试剂，对布洛芬与酮基布洛芬进行酯化反应，得到非对映异构体，再用非手性色谱柱进行拆分分离，这种柱前衍生2-取代芳基丙酸的色谱拆分方法相对于以上拆分方法具有高效，经济实用，分离度高等优点。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一种布洛芬及酮基布洛芬对映异构体的拆分方法，所述方法为：(1)预处理：将布洛芬或酮基布洛芬与1R,2S,5R-(-)-薄荷醇和对甲苯磺酸混合，溶于甲苯中，加热搅拌回流，TLC跟踪至反应结束后，蒸馏除去甲苯，用石油醚与乙酸乙酯作为淋洗液进行硅胶柱层析，TLC检测流出液，收集目标组分，旋转蒸发干燥，获得布洛芬薄荷醇酯或酮基布洛芬薄荷醇酯；所述布洛芬或酮基布洛芬与1R,2S,5R-(-)-薄荷醇和对甲苯磺酸物质的量之比为1:1.2:0.05，所述甲苯体积用量以布洛芬或酮基布洛芬物质的量计为3ml/mmol；(2)拆分：将步骤(1)布洛芬薄荷醇酯或酮基布洛芬薄荷醇酯用甲醇溶解后作为供试品进行高效液相色谱法拆分，色谱柱为YMC-ODS-C18(4.6mm×150mm，10μm)，流动相为甲醇与水混合液或乙腈与水混合液，流速为0.6-0.8mL/min，检测波长为212-254nm；柱温为30-40℃，获得布洛芬薄荷醇酯非对映异构体或者酮基布洛芬薄荷醇酯非对映异构体。

进一步，步骤(2)所述布洛芬薄荷醇酯拆分时的流动相为乙腈与水以体积比90:10的混合溶液。

进一步，步骤(2)所述酮基布洛芬薄荷醇酯拆分时的流动相为甲醇与水以体积比75:25的混合溶液。

进一步，步骤(2)所述布洛芬薄荷醇酯拆分时的流速为0.6mL/min，流动相为乙腈与水体积比90:10，检测波长为254nm，柱温为30℃。

进一步，步骤(2)所述酮基布洛芬薄荷醇酯拆分时的流速为0.8mL/min，流动相为甲醇与水体积比80:20，检测波长为254nm，柱温为30℃。

按照本发明，因酯化反应为可逆反应，故本反应过程中需采用分水器进行脱水处理，反应进程采用TLC进行跟踪检测，且反应结束后，采用200-300目硅胶柱进行分离纯化。

与现有技术相比，本发明采用的利用手性衍生试剂对布洛芬与酮基布洛芬进行柱前衍生化高效液相色谱手性拆分方法简便易行，流动相简单，不需要加入手性添加剂，后处理简单，且经济实用，灵敏度高，能快速有效的分离2-取代芳基丙酸衍生物(布洛芬及酮基布洛芬)。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：

布洛芬拆分

(1)向圆底烧瓶中依次加入1R,2S,5R-(-)-薄荷醇(1.87g，12mmol)，布洛芬(2.06g，10mmol)和对甲苯磺酸(0.1g，0.5mmol)，其摩尔比为1.2:1：0.05，溶于30mL甲苯中，加热搅拌回流，TLC检测反应进程。待反应结束后，蒸馏除去甲苯，用石油醚与乙酸乙酯作为淋洗液进行200-300目硅胶柱层析，TLC检测流出液，旋转蒸发干燥，得到布洛芬薄荷醇酯纯品1.99g。

(2)取10mg步骤(1)所得的布洛芬薄荷醇酯，用甲醇溶解后转移至25ml容量瓶中，并用甲醇定容，得到供试品溶液；将供试品溶液按下述液相色谱条件进行高效液相色谱分析；

采用如下液相分析条件进行分析：

色谱柱：YMC-ODS-C18，4.6mm×150mm，10μm；乙腈-水＝90:10，v/v为流动相；流速为0.6mL/min；检测波长为254nm；柱温为30℃；进样体积10μL。

供试品溶液采用上述液相色谱条件所得的液相色谱分离图如图1所示，从图中可以看出，两非对映异构体的出峰时间分别为30.106min和31.908min，分离度为1.613。