CD45RO抗体的应用

背景^[1-3]

CD45RO抗体是一类可以特异性结合CD45RO的多克隆抗体，主要用于体外检测CD45RO的WB、Elisa、IP、IF、IHC等免疫学实验。

CD45RO（UCHL1，泛素羧基末端酯酶L1）是一种受体型蛋白酪氨酸磷酸酶CD45糖蛋白的最短异构体。CD45在淋巴细胞发育和抗原信号传递中至关重要，作为Src-家族激酶的重要调节者，通过调节整合素介导的信号转导途径促进细胞存活，也参与细胞凋亡过程中的DNA断裂。

CD45RO抗体免疫组化

CD45异构体的细胞外结构域不同，而它们有相同的跨膜和细胞质结构域。CD45异构体在其转入富含糖类脂质的膜域的能力上有所不同，其表达取决于细胞类型和细胞的生理状态。CD45RO在巨噬细胞、CD8+T细胞、活化T细胞和骨髓瘤细胞上表达。除了在免疫受体信号传递中的作用，CD45还通过调节整合素介导的信号转导途径促进细胞生存，并参与细胞凋亡过程中的DNA断裂。

CD45RO和CD45RA是CD45（白细胞共同抗原）的两种亚型，由CD45肽链胞外区氨基端的三个外显子(A、B和C)发生旁路剪接而形成.缺乏三种外显子的同型称为CD45RO,仅表达外显子A的同型称为CD45RA，均属于I型跨膜蛋白，成熟的CD45分子由三部分组成，即胞外区，单链跨膜区和胞内区，广泛存在于白细胞表面，其胞浆区段具有蛋白质酪氨酸磷酸酶的作用，能使底物P56lck和P59fyn上酪氨酸脱磷酸而激活。在淋巴细胞的发育成熟，功能调节及信号传递中具有重要意义。

CD45RO表达于大多数胞腺细胞、T细胞、粒细胞、成熟单核细胞以及部分巨噬细胞，是T细胞标记物。研究表明，CD45RO抗体可与成熟的活化T细胞、大多数胸腺细胞以及CD4和CD8亚群中的静息T细胞亚群发生反应。大多数B细胞、B细胞淋巴瘤阴性，所以可用于I细胞淋巴瘤与B细胞淋巴瘤的鉴别。

CD45的分布可作为某些T细胞亚群的分类标志，CD45RA+T细胞被称为“原始”T淋巴细胞，即未致敏T细胞，具有抑制免疫的作用；而CD45RO+T细胞被称为“记忆”T细胞，具有辅助诱导作用。由于CD45RO/CD45RA与T细胞功能性亚群之间具有一定的关系，因而其在许多炎症反应和自身免疫性疾病等疾病的发病机制及疾病的活动性等方面具有重要意义。

应用^[4][5]

用于桥本氏甲状腺炎患者外周血中CD4+CD45RO+记忆性T细胞的表达及意义研究

桥本氏甲状腺炎（Hashimoto’s thyroiditis,HT）是临床上较多见到的一种自身免疫性甲状腺疾病,可引起甲状腺功能减退,目前尚未完全明确其发病机制,现普遍认同自身免疫因素是HT发病的关键。临床及基础研究资料表明多种免疫细胞及细胞因子共同参与了HT的发生发展过程。

通过检测初诊桥本氏甲状腺炎患者外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）中CD4+CD45RO+记忆性T细胞比例并初步探讨其在HT发病中的意义,为研究HT的发病机制提供理论依据。

方法:收集初次诊断为HT且符合入组条件的患者作为病例组（HT）:共53例,女性51例,男性2例;收集年龄、性别相匹配,且无自身免疫性疾病、无新近感染的正常人作为对照组（HC）:共43例,女性42例,男性1例。HT组和HC组一般资料无统计学差异（P＞0.05）,并按照纳入及排除标准进行严格筛选。

受试对象均于清晨空腹时采取外周静脉血4ml,其中2ml静脉血用于化学发光免疫分析法检测甲状腺特异性抗体滴度,2ml静脉血下层的血细胞应用流式细胞仪检测CD4+CD45RO+记忆性T细胞在外周血单个核细胞中的比例,上层的血清使用酶联免疫吸附方法检测IFN-γ、IL-17的水平。

结果:HT组外周血中CD4+CD45RO+记忆性T细胞比例、IFN-γ、IL-17、TPOAb与TgAb水平均显著高于HC组（＜0.01,＜0.01,＜0.01,＜0.01,＜0.01,＜0.01）。应用双变量相关性分析HT患者外周血中CD4+CD45RO+记忆性T细胞比例分别与血清IFN-γ、IL-17、TPOAb、TgAb之间的关系,结果显示外周血CD4+CD45RO+记忆性T细胞比例与血清IFN-γ、TPOAb、Tg Ab均呈正相关（r=0.785,＜0.01;r=0.434,=0.015;r=0.551,＜0.01）,与血清IL-17无相关性（r=0.354,=0.051）。

结论:本研究检测到在HT患者外周血中CD4+CD45RO+记忆性T细胞比例、IFN-γ、IL-17、TPOAb、TgAb较正常人均明显升高,且CD4+CD45RO+记忆性T细胞HT患者外周血中CD4+CD45RO+记忆性T细胞与IFN-γ、TPOAb、TgAb均呈明显正相关,提示CD4+CD45RO+记忆性T细胞可通过分泌IFN-γ等途径发挥其生物学作用,参与HT的发病。

参考文献

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[3]Macrophage Migration Inhibitory Factor Interacting with Th17 Cells May Be Involved in the Pathogenesis of Autoimmune Damage in Hashimoto’s Thyroiditis[J].Haibo Xue,Yuhua Yang,Ying Zhang,Shoujun Song,Li Zhang,Lei Ma,Tingting Yang,Huan Liu,Amedeo Amedei.Mediators of Inflammation.2015

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[5]马倩倩.桥本氏甲状腺炎患者外周血中CD4~+CD45RO~+记忆性T细胞的表达及意义[D].济宁医学院,2016.