盐皮质激素受体抗体的应用

背景^[1-3]

盐皮质激素受体抗体是一类可以特异性结合盐皮质激素受体的多克隆抗体，主要用于体外检测盐皮质激素受体的WB、Elisa、IP、IF、IHC等免疫学实验。

盐皮质激素受体(MR)是包括糖皮质激素受体(GR)、雄激素受体(AR)、孕激素受体(PR)和雌激素受体(ER)的经典类固醇激素受体中的一个成员。这些受体是调节从器官发育和分化到情绪控制和应激反应的多种生理过程的激素激活的转录因子。

盐皮质激素受体抗体免疫组化

针对MR的生理激素是醛固酮，其是由肾上腺分泌的类固醇激素。MR已在血管、脑和心脏的非上皮位点上被定位(Bonvalet JP等，1995;Lombes M等，1992 Janaka J.等，1997)。在过去10年中，有许多研究表明盐皮质激素的非上皮作用造成血管和心肌的纤维化和营养效应(Brilla CG.等，1992，Ullian ME.等，1992;YoungΜ.等，1994)。另外，已经在包括人内皮细胞和血管平滑肌细胞(VSMC)(Hatakeyama H.等，1994)以及动物试验中的心肌细胞(Silvestre JS.等，1988)中发现了MR。一些研究(Brilla CG等，1992；Young M.等，1994)通过刺激心肌细胞中的胶原形成将盐皮质激素与心肌纤维化联系起来。Farquharson CA.等人Q000)间接地证明了醛固酮可能在慢性心力衰竭的内皮功能障碍发挥作用。因此MR是重要的药物靶点，特别是对于高血压和心力衰竭的治疗。例如，醛固酮拮抗剂螺内酯(也称为ALDACTONE，PFIZER)与盐皮质激素受体结合并阻断醛固酮的结合。这一类固醇化合物普遍用于治疗充血性心力衰竭。

应用^[4][5]

用于孕早期人巨细胞病毒感染对仔鼠海马糖皮质激素受体和盐皮质激素受体蛋白表达的影响研究

人类巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）是宫内感染最常见的病毒,婴幼儿期中重度智力障碍,是以HCMV为代表的TORCH系列宫内感染为首要病因。海马是学习记忆的关键生理学基础,也是人巨细胞病毒作用的主要靶区,为了研究人巨细胞病毒导致子代学习记忆功能逐步下降的机制,采用病理组织学和分子机制,探讨孕早期人巨细胞病毒感染对仔鼠海马海马糖皮质激素受体和盐皮质激素受体蛋白表达的影响,为HCMV宫内感染致子代子代学习记忆功能逐步下降供新的治疗靶点。

方法:取9-10周龄SPF级SD鼠30只（雌鼠20只,雄鼠10只）,按雌雄1:1合笼交配（雄鼠可多次进行交配）,将孕鼠随机分成对照组（10只）和实验组（10只）,分别于妊娠第5天腹腔内注射5×10~7 L-1半数组织培养感染量(TCID50)HCMV悬液0.8 mL和等量的人胚成纤维细胞上清液0.8ml。分别从每组随机抽取10只15日龄仔鼠,（1）采用Morris水迷宫实验测试其学习记忆功能;（2）仔鼠经4%多聚甲醛灌注后取脑组织,采用病理组织学HE染色观察仔鼠海马形态学变化;（3）应用间接免疫荧光染色方法检测仔鼠海马（CA1区、CA3区）MR、GR蛋白的表达情况。采用SPSS 16.0软件进行统计学处理。

结果:1.Morris水迷宫实验,在定位航行实验中,对照组和实验组仔鼠的逃避潜伏期均呈逐渐降低的趋势,实验组的逃避潜伏期均比对照组的时间长,并于第4天（t=-2.212,P＜0.05）、第5天（t=-2.827,P＜0.05）实验组较对照组差异有统计学意义。在空间探索实验中,实验组仔鼠在目标象限停留时间（探索正确时间）少于对照组,差异有统计学意义（t=2.390,P＜O.05）;实验组穿越平台次数少于对照组,差异有统计学意义（t=2.477,P＜O.05）。

2. 仔鼠海马区CA1区、CA3区病理组织学HE染色显示,对照组仔鼠海马神经细胞排列均匀整齐,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁明显,染色质均匀;实验组仔鼠海马神经细胞排列紊乱,数目减少,细胞水肿变大,部分细胞核固缩明显,并可见巨细胞变;

3.免疫荧光染色结果显示,实验组仔鼠海马CA1区GR（t=3.05,P＜0.05）、MR（t=2.23,P＜0.05）、GR/MR（t=2.24,P＜0.05）平均吸光度值较对照组低,差异有统计学意义;实验组海马CA3区GR（t=2.76,P＜0.05）、MR（t=2.67,P＜0.05）、GR/MR（t=2.43,P＜0.05）平均吸光度值较对照组低,差异有统计学意义。

参考文献

[1]Hearing in Preterm Infants With Postnatally Acquired Cytomegalovirus Infection[J].Joppe Nijman,Bert GA van Zanten,Anne-Karien M.de Waard,Corine Koopman-Esseboom,Linda S.de Vries,Malgorzata A.Verboon-Maciolek.The Pediatric Infectious Disease Journal.2012(10)

[2]Ophthalmological Findings in Congenital Cytomegalovirus Infection:When to Screen,When to Treat?[J].Ghekiere,Sofie,Allegaert,Karel,Cossey,Veerle,Van Ranst,Marc,Cassiman,Catherine,Casteels,Ingele.EN.2012(5)

[3]Early primary cytomegalovirus infection in pregnancy:maternal hyperimmunoglobulin therapy improves outcomes among infants at 1 year of age.[J].Visentin Silvia,Manara Renzo,Milanese Laura,Da Roit Anna,Forner Gabriella,Salviato Eleonora,Citton Valentina,Magno Fioretta Marciani,Orzan Eva,Morando Carla,Cusinato Riccardo,Mengoli Carlo,Palu Giorgio,Ermani Mario,Rinaldi Roberto,Cosmi Erich,Gussetti Nadia.Clinical infectious diseases:an official publication of the Infectious Diseases Society of America.2012(4)

[4]Awareness of and behaviors related to child-to-mother transmission of cytomegalovirus[J].Michael J.Cannon,Kyresa Westbrook,Denise Levis,Mark R.Schleiss,Rosemary Thackeray,Robert F.Pass.Preventive Medicine.2012(5)

[5]张宁.孕早期人巨细胞病毒感染对仔鼠海马糖皮质激素受体和盐皮质激素受体蛋白表达的影响[D].安徽医科大学,2018.