草乌甲素的制备方法

背景及概述^[1][2]

草乌甲素是从滇西毛茛科乌头属植物乌头中提取的一种生物碱，具有较强的镇痛及明显的抗炎作用，本品的镇痛作用是中枢性的，并与脑内5-羟色胺水平密切相关，镇痛作用为吗啡的1.75～2.27倍，且无成瘾性；同时本品有解热和局部麻醉作用。

制备方法^[3]

传统方法有利用氨水碱化，苯提取、氯仿萃取，氧化铝柱层析，乙醚-苯洗脱的方法分离草乌甲素；还有利用碱水浸泡，汽油或石油醚回流提取，再用汽油、 乙酸乙酯、三乙胺混合溶剂为洗脱剂进行柱层析。另有用酸水等溶剂提取，调pH值，乙酸乙酯或氯仿萃取，再用汽油、石油醚、丙酮和二乙胺等溶剂为洗脱剂进行柱层析。因其使用高毒性的有机溶剂苯和氯仿及大量的使用易燃易爆的有 机溶剂，给生产人员带来不安全因素，且成本高，同时也不可避免的造成了环境 污染。

CN201410548962.0提供的一种草乌甲素的高效提取分离方法，包括以下步骤：

(1)前处理：取草乌药材，去除杂质，粉碎成粗粉；

(2)浸提、浓缩：取草乌药材粗粉，置圆底烧瓶中，加入含硫酸3‰的酸性75％乙醇溶液提取三次，次提取：在草乌药材粗粉中加入为草乌药材粗粉重量3.2倍重量的所述含硫酸3‰的酸性75％乙醇溶液，控制蒸汽压力0.1MPa，加热至60℃保温浸提12小时，过滤，收集滤液；第二、三次采用与次同样的方法分别在每次的滤渣中加入为滤渣重量2.4倍重量的所述含硫3‰的酸性75％乙醇溶液，分别提取2～4小时，过滤，收集滤液，合并三次提取液滤，在0.02～0.04MPa真空浓缩回收至无醇味，浓缩液加入为浓缩液重量1.5倍重量纯化水稀释至相对密度为1.05～1.07；

(3)酸化、碱化：在步骤(2)稀释至相对密度为1.05～1.07的稀释液中 加入10％稀硫酸调pH至2，静置24小时，过滤，滤液在搅拌下缓缓加入浓氨水 调pH至8，静置24小时，过滤，滤液备用；

(4)萃取：将步骤(3)碱化的滤液注入分液漏斗，加入为所述碱化的滤液体积1.6～2倍体积的乙酸乙酯，搅拌萃取30min～45min，静置2～3小时，分离上层乙酸乙酯萃取液，下层水液按上述萃取方法操作，重复萃取3次，合并乙酸乙酯萃取液；将合并的乙酸乙酯萃取液在0.02～0.04MPa真空浓缩，控制温度在60℃±5℃，浓缩回收乙酸乙酯至稠膏状，收集稠膏，在稠膏中加入为所述稠膏重量10倍重量纯化水充分搅匀，搅拌下加入浓度为10％的稀硫酸溶液调pH至 2使稠膏完全溶解，静置12小时，过滤，滤液在搅拌下缓缓加入浓氨水调pH至8.5～9，使沉淀完全，静置12小时，过滤，沉淀用纯化水洗至pH呈中性，收集沉淀，即得草乌总碱；草乌总碱用乙酸乙酯溶解后，加入为草乌总碱重量0.6～1.2倍重量硅胶混合均匀，干燥控制水分≤15％，装入洁净容器中，密封；

(5)柱层析：硅胶柱层析，用石油醚：乙酸乙酯：三乙胺的体积比＝4:1:0.075 的溶剂系统进行洗脱，控制流速13～20ml/min，通过薄层色谱检识观察洗脱情 况，分段收集含草乌甲素的洗脱液，合并所述洗脱液；

(6)结晶：用旋转蒸发仪0.02～0.04MPa真空浓缩合并的洗脱液，温度60 ℃±5℃，即得草乌甲素粗品结晶；将草乌甲素粗品置圆底烧瓶中，加入为草乌 甲素粗品重量4倍重量的乙酸乙酯使草乌甲素粗品充分溶解，在0.02～0.04MPa 真空浓缩至1/3体积，用石油醚边加边振摇至晶体析出，静置使结晶完全，过滤， 再用石油醚洗涤结晶至颜色成均一的白色结晶，干燥，即为草乌甲素纯品；

药理毒理^[2]

1．药理 本品具有较强的镇痛及明显的抗炎作用，本品的镇痛作用是中枢性的，并与脑内5-羟色胺水平密切联系，起效时间比吗啡慢，但维持时间长，无成瘾性；其抗炎作用不通过肾上腺体系，而与抑制PG水平有关；本品有解热和局部麻醉作用。

2．毒理 急性毒性试验LD₅₀：小鼠皮下注射为0.92mg/kg，大鼠为0.51mg/kg。亚急性毒性试验连续给药1~3个月，对实验动物的血常规、肝、肾功能无明显毒害，大剂量给药接近中毒剂量时，可出现短时间呼吸抑制，脑水肿，骨髓前角细胞变性暂时改变；窦性心率减慢至室性心率异常；胃肠黏膜受损。

药代动力学^[2]

药物在肝及肾上腺含量最高，其次为肾、肺、脾及心脏，脑含量很低。给药后4小时各脏器内含量降低50%。一次剂量在6天内从尿内排除46%，从粪便内排除21.9%；尿液经检测未发现有代谢峰，表明进入人体内的本品以原形物排除。

临床应用和适应症^[1]

骨关节炎，四肢扭挫伤，挫伤，风湿及类风湿关节炎，骨质增生，肩周炎，腰肌劳损及腰椎疾病，颈椎疾病及其他疼痛疾病。

注意事项^[2]

1．两次用药间隔时间不宜少于6小时。

2．出现不良反应时，可静脉注射高渗葡萄糖加维生素C，也可注射阿托品，并应减量或停用；反应极重者，可按乌头中毒处理，并停药。

3．当药品性状发生改变时禁止使用。

主要参考资料

[1] 医师案头用药参考

[2] 草乌甲素片说明书

[3] CN201410548962.0 一种草乌甲素的高效提取分离方法