4-溴-2-碘苯甲酸的应用

发布日期:2022/5/25 14:51:18

背景及概述^[1]

4-溴-2-碘苯甲酸是一种有机中间体，可用于制备二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)抑制剂。最近，二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)作为潜在的更广泛适用的分化靶标出现在表型筛选中，该表型筛选旨在鉴定克服表达同源盒蛋白HoxA9的原代鼠骨髓细胞的成熟阻断的小分子。该蛋白质是参与平衡干细胞维持/分化的关键转录因子，通常在造血祖细胞中表达并在诱导分化时下调，并且已发现在AML中广泛过表达。

应用^[1]

4-溴-2-碘苯甲酸可用于制备化合物外消旋-2-(2-氯-6-氟苯基)-6-(4-乙基-3-(羟甲基)-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)-4-(丙-1-烯-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。该化合物是一种二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)抑制剂。

步骤A：N-(2-氯-6-氟苯基)-3-甲基丁-2-烯-1-亚胺。在0℃时，向2-氯-6-氟苯胺(2.9g，20mmol)和3-甲基-2-丁烯醛(2g，23.9mmol)的无水二氯甲烷(50mL)溶液中加入三乙胺(8.3mL，60mmol)，之后滴加TiCl4(3g，16mmol)。将反应混合物于0℃搅拌1小时，然后升温至25℃并搅拌4小时。将混合物通过短垫过滤，并将滤液在二氯甲烷和水之间分配。将有机层分离，并将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩，得到黄色油状所需粗产物(3.3g，78％)，该粗产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(dd,J＝2.20,9.66Hz,1H),7.20(d,J＝7.83Hz,1H),6.94-7.09(m,2H),6.32(br d,J＝9.66Hz,1H),5.30(s,1H),2.00(s,6H)。

步骤B：2-氯-6-氟-N-(3-甲基丁-2-烯-1-基)苯胺。在25℃时，向粗制N-(2-氯-6-氟苯基)-3-甲基丁-2-烯-1-亚胺(3.3g，15.6mmol)的甲醇(25mL)溶液中加入NaBH4(0.59g，15.6mmol)，间隔1小时后加入另一批NaBH4(0.59g，15.6mmol)。共加入三当量的NaBH4(1.8g，47mmol)。将反应混合物于25℃搅拌16小时。将混合物浓缩至干。将混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层分离，并将水层用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩。将残余物通过色谱法(5％-25％EtOAc的庚烷溶液)纯化，得到黄色油状所需产物(收率，1.9g，57％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.05(br d,J＝7.58Hz,1H),6.83-6.97(m,1H),6.55-6.73(m,1H),5.32(br s,1H),3.91(br d,J＝6.57Hz,2H),3.82(br s,1H),1.73(s,3H),1.68(s,3H)ppm。

步骤C：4-溴-N-(2-氯-6-氟苯基)-2-碘-N-(3-甲基丁-2-烯-1-基)苯甲酰胺。向装有4-溴-2-碘苯甲酸(2.5g，7.7mmol)的烧瓶中加入SOCl2(7mL)。将混合物于80℃加热15分钟，然后冷却至25℃并浓缩，得到灰白色固体状粗制4-溴-2-碘苯甲酰氯。将粗制4-溴-2-碘苯甲酰氯溶于二氯甲烷(10mL)中，然后在0℃时缓慢滴加到预冷却的2-氯-6-氟-N-(3-甲基丁-2-烯-1-基)苯胺(1.1g，5.1mmol)和三乙胺(2.1mmol，15mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)中，之后加入催化量的4-二甲氨基吡啶(DMAP)(6mg，0.05mmol)。将反应混合物升温并于25℃搅拌3小时。通过加入饱和NaHCO3水溶液将反应淬灭。将有机层分离，并将水层用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，经MgSO4干燥并浓缩，得到棕色油状所需粗产物(2.4g，89％)。LCMS(ES-API)：C18H15BrClFINO的质量计算值为520.9；m/z实测值为522.0[M+H]+。

步骤D：外消旋-6-溴-2-(2-氯-6-氟苯基)-4-(丙-1-烯-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1 (2H)-酮。在25℃时，向4-溴-N-(2-氯-6-氟苯基)-2-碘-N-(3-甲基丁-2-烯-1-基)苯甲酰胺)-酮(1.2g，2.3mmol)、四丁基溴化铵(2.2g，6.9mmol)和乙酸钾(0.45g，4.6mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(20mL)混合物中加入乙酸钯(II)(0.51g，2.3mmol)。在氮气下将反应混合物于80℃加热并搅拌2小时，然后冷却至25℃，并加入水(100mL)。将混合物用乙醚(100mL)和乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过色谱法(30％-60％EtOAc的庚烷溶液)纯化，得到白色固体状所需产物(395mg，43％)。LCMS(ES-API)：C18H14BrClFNO的质量计算值为393.0；m/z实测值为394.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.05(d,J＝7.83Hz,1H),7.55(br d,J＝8.31Hz,1H),7.39(s,1H),7.27-7.33(m,2H),7.08-7.16(m,1H),5.16(br d,J＝1.47Hz,1H),4.87,4.77(2s,1H),3.76-4.04(m,3H),1.84,1.81(2s,3H)ppm.

步骤E：外消旋-6-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-4-乙基-5-氧代-4, 5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-(2-氯-6-氟苯基)-4-(丙-1-烯-2-基)-3,4-二氢异喹啉- 1(2H)-酮。向外消旋-6-溴-2-(2-氯-6-氟苯基)-4-(丙-1-烯-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(330mg，0.84mmol)和K3PO4(532mg，2.5mmol)的无水1,4-二氧杂环己烷(8mL)混合物中分别加入5-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-4-乙基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(638mg，1.7mmol)、CuI(159mg，0.84mmol)和反式-N,N'-二甲基环己烷-1,2-二胺(119mg，0.84mmol)。在氮气下将反应混合物于95℃缓慢加热并搅拌3小时，然后冷却至25℃，并加入水(40mL)淬灭。将混合物用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过色谱法(0％-40％EtOAc的庚烷溶液)纯化，得到白色泡沫状所需产物(290mg，50％)。LCMS(ES-API)：C39H40ClFN4O3Si的质量计算值为694.3；m/z实测值为695.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.23(br d,J＝9.09Hz,1H),7.94(br d,J＝4.55Hz,2H),7.69(br d,J＝7.07Hz,4H),7.37-7.51(m,7H),7.29(br d,J＝7.07Hz,2H),7.11(br t,J＝7.58Hz,1H),5.14(br d,J＝4.04Hz,1H),4.86,4.75(2s,1H),4.66(s,2H),3.84-4.05(m,5H),1.87,1.84(2s,3H),1.37(br t,J＝6.82Hz,4H),1.09(s,9H)ppm。

步骤F：外消旋-2-(2-氯-6-氟苯基)-6-(4-乙基-3-(羟甲基)-5-氧代-4,5-二氢- 1H-1,2,4-三唑-1-基)-4-(丙-1-烯-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮。向外消旋-6-(3-(((叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基)甲基)-4-乙基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-(2-氟-6-氟苯基)-4-(丙-1-烯-2-基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(280mg，0.4mmol)的四氢呋喃(THF)(10mL)溶液中加入四丁基氟化铵(0.4mL，0.4mmol)的四氢呋喃(THF)溶液(1M)。将反应混合物于25℃搅拌0.5小时。将混合物用H2O稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。将残余物通过色谱法(50％-100％EtOAc的庚烷溶液)纯化，然后通过制备型HPLC(C18柱，20％-80％梯度MeCN的水溶液)进一步纯化，得到白色固体状标题化合物(130mg，收率70％)。LCMS(ES-API)：C23H22ClFN4O3的质量计算值为456.1；m/z实测值为457.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(br d,J＝9.09Hz,1H),7.98(br s,2H),7.27-7.35(m,2H),7.06-7.16(m,1H),5.15(br d,J＝4.04Hz,1H),4.85,4.75(2s,1H),4.68(s,2H),3.97-4.07(m,1H),3.84-3.95(m,4H),1.87,1.84(2s,3H),1.40(brt,J＝7.07Hz,3H)ppm。