吐温20的应用及测定方法

背景及概述^[1][2]

吐温20 ( Tween 20) ，又称聚山梨酯20 ( polysorbate20) ，是一种非离子表面活性剂，具有较强的亲水性和化学上的不解离性，对药物有较好的助溶作用，在药物制剂中常添加其以增加有效成分的溶解度；另一方面，吐温20 能抑制大分子蛋白药物的自动聚合，提高药物的稳定性。作为一种新型的非离子表面活性剂，聚山梨酯20具有稳定性高，不易受强电解质、酸、碱的影响，与其他类型表面活性剂能混合使用，相容性好的特点，在各种溶剂中均有良好的溶解性。因此，聚山梨酯20的消耗量也日趋增大。在使用过程中，含有聚山梨酯20的废水不可避免地进入了水体、土壤等环境。非离子表面活性剂对鱼类和水生生物会产生毒性，影响其他共存有机物在环境中的迁移和降解，它们在土壤/沉积物上的吸附可限制其在土壤等有机污染增效修复方面的应用。并且是随着近年来药理学研究的深入，人们认识到聚山梨酯类表面活性剂具有一定生物和药理活性，它能够诱导细胞产生脱颗粒作用，引起过敏活性物质释放，其本身的不饱和脂肪酸也十分容易氧化降解而产生多种有毒成分，与药物临床上出现的呼吸困难、恶心、呕吐、皮疹等不良反应相关。

质量标准^[3]

应用^[4]

吐温20可用作化妆品的乳化剂，橡胶乳液的润湿剂，染料的溶剂，医药品和照相乳液的乳化剂，泡沫塑料稳定剂等。如有实验利用吐温辅助水剂法提取花生油脂，将同时得到富含花生蛋白的水提液作为研究对象，以蛋白纯度、残油量、蛋白质回收率和吐温20含量为指标，优化花生蛋白粉的回收工艺，旨在获得纯度较高的花生蛋白粉。比较了碱盐皂化、萃取和高速离心3种水提液脱脂处理方法，分别采用酸沉和膜分离回收花生蛋白。pH＜4.0 时，随着pH 的升高，蛋白质回收率显著提高；pH 为4.5 时蛋白质回收率达到，为93.17%；pH＞5.0 时，蛋白质回收率显著降低，最终确定酸沉pH为4.5。随着蛋白沉淀水洗次数的增加，蛋白质回收率下降，但蛋白纯度显著上升，最终确定水洗蛋白沉淀2次。碱盐皂化、萃取和高速离心3 种方法均可降低水提液油脂含量，而采用碱盐皂化法处理水提液结合酸沉工艺，得到的花生蛋白粉纯度最高为81.28%，残油量5.18%，吐温20 含量11.11%，蛋白质回收率84.68%。采用5 kDa 超滤膜处理水提液制得花生蛋白粉纯度77.35%，残油量6.14%，吐温20 含量6.36%，蛋白回收率97.45%。

测定方法^[2]

分光光度法分析非离子表面活性剂聚山梨酯20的方法，通过下述技术方案实现：

1)显色反应：由于聚山梨酯20的水溶液颜色很浅，需要选用适当的试剂与其反应生成有色化合物再进行测定。碘作为一种电子受体能与聚山梨酯20分子中氧原子作用形成黄色络合物。准确称取1g l2和2g Kl，加蒸馏水溶解，定容至100mL。用Kl-l2的混合液做为显色剂。配好的显色剂应避光低温保存。

2)显色条件：溶液pH值范围为4～8，显色剂用量为0.25mL，显色时间20min，吸收波长486nm，参比溶液为蒸馏水。

3)标准曲线：制作标准曲线的目的是建立方法的测量信号与待测物聚山梨酯20浓度之间的定 量关系。准确配制不同浓度的聚山梨酯20标准溶液。在试管中分别加入10mL已知浓度的标准溶液，再加入0.25mL的显色剂，摇匀，静置反应20min。用分光光度计在486nm处，使用1cm比色皿，以蒸馏水为参比测定各不同浓度聚山梨酯20及显色剂空白的吸光值，两者之差为不同浓度下溶液相对于试剂空白的吸光值。以浓度对吸光值作图得到标准曲线。

4)聚山梨酯20含量的测定：在试管中加入10mL未知浓度的聚山梨酯20溶液，加入0.25mL的显色剂之后摇匀，静置反应20min。用分光光度计在486nm处，使用1cm比色皿，记录未知浓度聚山梨酯20的吸光值，将吸光值代入步骤(3)所建立的标准曲线方程，即可求出聚山梨酯20的含量。

主要参考资料

[1] RP-HPLC-ELSD 法测定康柏西普眼用注射液中辅料吐温20 的含量

[2] CN201010181032.8 一种聚山梨酯非离子型表面活性剂的测定方法

[3] 日用化工原料手册

[4] 吐温辅助水剂法提取花生油过程中蛋白质的回收研究