钩吻素子的分离制备方法及其缓释制剂的作用机理

背景及概述^[1][2]

钩吻（Gelsemium elegans Benth.）马钱科胡蔓藤属常绿木质藤本植物，俗称断肠草、野葛、毒根、大茶药，全株可入药。我国对钩吻的使用历史悠久，《神农本草经》、《唐本草》 和《本草纲目》中均有记载，具有“消肿止痛、祛风散瘀、攻毒杀虫”之功效，20世纪30年代起，我国学者对钩吻展开大量研究，钩吻的主要有效成分为吲哚类生物碱，具有抗炎镇痛、抗肿瘤、抗银屑病、促进禽畜生长等药理作用。钩吻生物碱包括钩吻素子、甲、寅、卯等近百种单体。近年来系列研究发现，钩吻素子具有显著的镇痛、抗焦虑等功效，有良好的产业化药用前景。

制备^[1]

CN201711034999.1针对现有产业化制备钩吻素子技术存在的不足，提供一种较为环保的产业化分离制备钩吻素子的方法。本发明的目的是这样实现的，一种产业化分离制备钩吻素子的方法，其特征是包括如下步骤：

1）钩吻总碱浸膏用100-200目或200-300目柱层析硅胶色谱分离；以二氯甲烷-甲醇梯度洗脱，将洗脱液作薄层色谱检识，合并含有钩吻素子的流份，减压回收得钩吻素子；

2）所获钩吻素子经有机溶剂溶解，微孔滤膜过滤后，采用制备液相色谱纯化，得高纯度钩吻素子。

本发明以二氯甲烷代替毒性强、价格高的氯仿作为流动相梯度洗脱硅胶色谱柱获得较高纯度的钩吻素子，降低生产成本的同时，可减少试剂对操作者 的毒害，更适用于钩吻素子的工业化生产。根据钩吻素子目标纯度要求，尚可在此基础上，结合其他分离方法，如液相色谱法等进一步纯化钩吻素子，获得高纯度的钩吻素子。纯化所得钩吻素子与酸成盐可扩大适用范围。本方法可作为钩吻素子及其可接受的盐在制备药品、保健品和饲料等方面应用时的产业化制备方法。

制剂^[2]

在大鼠坐骨神经慢性束缚损伤模型上观察到，单次皮下注射钩吻素子后药物达峰时间与作用持续时间均较短；在大鼠药动学研究中发现，大鼠灌胃给予钩吻素子绝对生物利用度较低，因此钩吻素子普通制剂存在吸收较差，血药浓度波动大，给药次数多的缺陷。

钩吻素子为一中等极性的可溶性生物碱，进入胃部后，在酸性环境下，与胃酸生成生物碱盐，呈离子状态，胃部吸收较少，生物碱盐进入小肠后，还原成高浓度分子型游离碱并吸收入体内，这种小肠的快速吸收在较快产生药效的同时，也极易产生强烈毒副作用。钩吻素子缓释制剂能缓慢释放药物避免突释效应，从而降低毒副作用，减少给药次数，提高用药依从性，同时提高钩吻素子药效，减小给药期间血药浓度波动幅度，因此，钩吻素子缓释制剂克服了普通制剂存在的许多问题，具有安全、有效、使用方便的特点。

CN201310054365.8提供一种钩吻素子缓释制剂，该缓释制剂与普通制剂相比具有生物利用度高，释药缓慢并且充分，血药浓度平稳的优点，能使药物在0～12ｈ或0～24 h内缓慢释放，并能长时间维持在有效治疗浓度上被胃肠道充分吸收。本发明能克服普通制剂存在的吸收较差，血药浓度波动大，给药次数多的缺陷。本发明所述的有效药物成分为钩吻素子及其同系物，或它们的盐及衍生物，或包括含有钩吻素子及其他化学合成药物的复方制剂。

本发明所述的缓释材料根据作用机理不同可分为具有骨架作用的缓释材料和具有膜控作用的缓释材料。钩吻素子为一可溶性生物碱，进入胃部后，与胃酸生成生物碱盐，在胃部吸收较少，进入小肠后，一部分药物通过凝胶层扩散，一部分随凝胶的溶解而溶出，直至所有负荷剂量的药物释放并吸收入体内。该制剂能提高药物的生物利用度并延长药物作用时间，使钩吻素子实现缓慢持久的释放，服用后吸收较好，血药浓度平稳，给药次数减少，提高患者的顺应性。

本发明的优点是：

1）利用缓释材料与钩吻素子制成缓释制剂，能克服普通制剂存在的生物利用度较低，血药浓度波动大以及给药次数多的缺陷，口服进入胃肠道后能在胃肠道中缓慢释放，并能长时间维持在有效治疗浓度上被充分溶解和吸收。该制剂能缓慢释放药物避免突释效应，从而降低毒副作用，减少给药次数，提高用药依从性，同时提高钩吻素子药效，减小给药期间血药浓度波动幅度。本发明能够实现药物在肠道中的持久释放和吸收，进而改善药物的生物利用度，具有安全、有效、使用方便的特点。

2）钩吻素子具有抗肿瘤、治疗慢性疼痛和抗类风湿性关节炎的作用，其治疗指数高，无耐受性与成瘾性且副作用小，有望成为具有我国独立自主知识产权的国家1类新型药物。作为给药周期长的药物而言，该制剂有利于提高药物疗效，降低给药次数，增加患者的顺应性。因此，本发明具有潜在的重大经济效应，产业化前景明确。

主要参考资料

[1] CN201711034999.1 一种产业化分离制备钩吻素子的方法

[2]CN201310054365.8 钩吻素子缓释制剂及其制备方法