脱氧胆酸钠的合成方法及在助剂方面的应用

背景及概述^[1]

脱氧胆酸钠是脱氧胆酸的钠盐，常温下为白色结晶性粉末，类似胆汁气味，有强烈苦味。脱氧胆酸钠属于离子型去污剂，可用于裂解细胞和溶解难溶于水的蛋白质。亦可用于胆汁溶菌实验，其原理是胆汁或胆盐具有表面活性，可快速激活自溶酶，加速了肺炎链球菌等细菌的自身溶解。脱氧胆酸钠属于胆汁酸类化合物，胆汁酸类化合物的特征在于两个连接单元，即刚性类固醇核和脂肪族短侧链，电离基团可存在于核或侧链上，偶合基团可存在于核上（如硫酸根、葡萄糖醛酸酯、磷酸根）或存在于侧链上（甘氨酸或牛磺酸或其它氨基酸甚至糖类），侧链结构决定了化合物的种类（胆酸或胆酸盐）。其结构如下图所示。

人体中所发现的最主要的胆汁酸是鹅脱氧胆酸和脱氧胆酸，主要作用是乳化脂肪以供在肠中吸收。胆酸、脱氧胆酸及其盐在注入活体内脂肪沉积处时具有脂肪去除性质。注入脂肪组织的脱氧胆酸盐经由细胞溶解机理降解脂肪细胞，因为注入脂肪的脱氧胆酸盐因暴露于蛋白质而快速失活，接着快速返回到肠内容物，所以其作用受空间限制。作为赋予临床安全性的此减弱作用的结果，脂肪去除疗法通常需要4-6个疗程。此无需外科手术的局部脂肪去除不仅有利于与病理学局部脂肪沉积（例如HIV治疗中的医学介入易发的血脂异常）相关的治疗性处理，而且有利于美容脂肪去除且无外科手术所伴随的风险。罗坦达指出脱氧胆酸钠的清洁作用是用于局部脂肪溶解的可注射磷脂酰胆碱调配物的主要特征。

合成方法^[1]

以9α-羟基雄-4-烯-3,17-二酮（化合物25）为起始原料，氢化、提纯后,得化合物26，惰性气氛下向化合物26的DCM溶液中添加硫酸，搅拌，反应完全后洗涤、真空蒸馏，得灰白色固体化合物27，在-40℃至-45℃惰性气氛下，向化合物27的THF溶液中加入三叔丁基氧氢化铝锂，搅拌反应完全后，添加HCl溶液淬灭反应混合物，分离各相并萃取水层，洗涤、蒸发，得化合物28。向溴化乙基三苯基膦的THF溶液中逐滴添加叔丁醇钾，搅拌1h后向体系中加入化合物28，使反应完全，冰水淬灭，MTBE萃取水层，洗涤并合并有机萃取物，真空浓缩有机层，MTBE纯化粗物质，过滤，蒸馏，制备出化合物29，加入三乙胺、DMAP和乙酸酐，反应得化合物30，经由化合物84或85转化为化合物32，向化合物32的乙酸乙酯溶液中添加TBHP水溶液，0℃下缓慢添加次氯酸钠，搅拌反应，分离并萃取，合并有机层，亚硫酸钠溶液处理2h后用氯铬酸吡啶鎓处理有机层，洗涤并蒸发有机层，纯化得浅黄色固体状化合物24，用Pd/C氢化还原环上的双键，并用三叔丁氧基氢化铝锂还原羰基得到化合物34，碱性条件下水解得脱氧胆酸粗品，纯化即制得脱氧胆酸，NaOH碱化制得脱氧胆酸钠。其合成路线如下图所示。

应用领域^[2][3]

1.吸收促进剂

使用脱氧胆酸钠作透皮促进吸收剂制备人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子喷雾剂，兼顾稳定剂和吸收促进剂的双重功能，既对主药起到抗氧增效的稳定剂作用，又起到促进主药透皮肤吸收的作用，对生物膜或皮肤无任何破坏作用，能够充分提高主药机体的局部或全身的生物利用度，并可被机体生物降解。其制备过程如下：

（1）将蔗糖与丙二醇作为复合稳定剂用醋酸盐缓冲液溶解，配制成含蔗糖10%、丙二醇10%母液作为配制母液I；

（2）将脱氧胆酸钠作为吸收促进剂用醋酸盐缓冲溶液溶解，配制成含0.5%脱氧胆酸钠的母液II；

（3）取100ml母液I，然后加入67ml的GM-CSF原液，混匀后室温放置30min；

（4）加入母液II，再用醋酸盐缓冲液定容到1000ml；

（5）用0.22μm的无菌微孔滤膜除菌过滤后分装。配方如下表所示。

2.表面活性剂

脱氧胆酸钠是一种重要的阴离子表面活性剂。采用生物相容性较好的卵磷脂作为外层包裹材料，脱氧胆酸钠作为表面活性剂进行乳化，得到表面具有负电荷的水溶性较好的全氟溴辛烷-脂质体纳米球。具体步骤为：

（1）取卵磷脂0.1g，PFOB 60 μL，充分溶解在二氯甲烷中，得到溶液A；

（2）向A溶液中加入1.5%脱氧胆酸钠溶液20ml，超声分散2min，磁力搅拌3好，得到溶液B；

（3）将溶液B离心10000rpm，5min，弃去上清液，加入去离子水充分分散沉淀，室温保存。制备的脂质体纳米微球电镜图如下。

主要参考资料

[1] 罗伯特·M·莫里亚蒂，约翰·格雷戈里·里德，罗伊·A·小斯瓦尔林根，脱氧胆酸的纯化方法，CN 201710119383，申请日2010-12-17

[2] 王玉清，吴歧，一种人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子喷雾剂及其制备方法，CN 200510103201，申请日2005-09-16

[3] 张华娟，朱君，何丹农，一种水溶性全氟溴辛烷-脂质体纳米微球及其制备方法，申CN 201310607899，请日2013-11-27