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Bad Antibody

发布日期:2020/10/25 9:01:40

介绍[1]

Bad基因首先从鼠的cDNA文库中克隆鉴定出,其后又克隆出人的同源基因,由Yang等 于1995年发现,其编码一个含204个氨基酸,分子质量22-1×103的蛋白质。双杂交和序列分析发现,Bad可与Be1-2和Bd-xL结合形成异源二聚体,具有促进细胞凋亡作用,故名Bad(Bcl-xL/Bcl-2 associateddeath promoter),它存在Bc1-2家族成员BH3同源结构域和序列。

与Bax、Bak、Bc1-2相似,此结构域是Bad与Bcl-2家族蛋白结合所必需的。Bad的促凋亡作用依赖于与Bel-2或Bc1-xL结合,胞外的Bad还能通过与一种细菌毒素的转运结构域结合进入细胞,诱导凋亡。Bad在某些病毒感染时还可与病毒受体结合,可能通过酪氨酸激酶途径激活细胞凋亡。Bad是与BcI-xL和Bd-2相关的细胞死亡促进因子,是调控细胞凋亡的重要成员,主要通过线粒体途径参与细胞凋亡。

在缺血性损伤,肿瘤发生和发展等多方面发挥调控细胞凋亡的作用,其促凋亡作用与其自身结构特点和与其他Bc1-2家族成员的相互作用有关。应用其调控凋亡的作用,在缺血损伤中若从避免其去磷酸化人手阻断Bad 通路激活可达到抗凋亡目的或在肿瘤的治疗中,促进其磷酸化来抑制细胞恶性化。随着对凋亡及其调节因子的不断认识,提醒人们通过抑制或促进基因表达来达到基因治疗的目的,为临床工作提供更好的医治思路。

Bad在外周及中枢神经元、淋巴细胞、骨髓造血细胞、生殖细胞及许多上皮细胞中均有表达。近年来其在缺血损伤方面的研究受到重视,肿瘤方面的研究多见。脑缺血后Bel-2基因家族在脑内表达有明显的改变,此方面的研究是新的热点。

Bad抗体为无色溶液,其浓度为0.5 mg/ml,溶解于包含有50%甘油,1% BSA, 0.02%硫柳汞的PBS (pH 7.2)缓冲液中。Bad抗体(Bad antibody)用重组表达的Bad蛋白进行适当修饰后免疫rabbit,通过兔单抗技术,获得稳定分泌Bad兔单抗的真核表达细胞株,最后用亲和纯化技术得到的高纯度抗体。经检测验证,可与人、小鼠、大鼠、猴种属来源的Bad蛋白发生免疫反应,可检测到22kDa Bad蛋白,并且它不与相关家族成员交叉反应。

Bad抗体-20℃保存,Western抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western-抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。Bad抗体可用于Western印迹分析(1-2μg/ ml),免疫沉淀(4-8μg/ ml)和免疫组织化学(20-40μg/ ml),但是条件应单独确定。

主要参考资料

[1] 何家璇, 薛荣亮. Bad 蛋白对细胞凋亡的调控作用[D]. , 2007.

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2024/02/21

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