PUMA Rabbit Monoclonal Antibody

背景^[1][2]

单克隆抗体技术起源于Kohler等创建的体外鼠源杂交瘤技术。经多年研究，鼠单抗已从单纯的生物实验室科研及临床诊断发展到治疗性抗体药物。但鼠单抗的主要缺陷是小鼠免疫系统不能识别某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠单抗的亲和性不如兔来源抗体的亲和性高。然而由于没有发现兔源性的浆细胞瘤及病毒体外转染兔B细胞的技术困难，直到1995年在c-myc/v-abl转基因兔身上成功地获得了兔浆细胞瘤细胞系，得到了稳定的兔-兔杂交瘤，才使兔单克隆抗体技术有了突破性进展。

近年兔单克隆抗体技术日臻完善，目前商品化的兔单抗已达数千种。PUMA 是2001 年Yu、Nakano及Han 3 个研究小组同时发现的促凋亡基因，属于Bcl-2 家族中的BH3 亚家族中的一员。PUMA 基因定位于19q， 主要通过转录子PUMAα、β 发挥促凋亡的作用，可依赖p53 途径或非依赖p53 途径促进细胞凋亡。PUMA作为一个新颖的促凋亡基因，在肿瘤发生中扮演着重要的角色。在肿瘤细胞中PUMA促凋亡能力受到抑制而不能有效的建立起来，上调PUMA在肿瘤细胞中的表达可以增加对肿瘤治疗的效果。

很多研究都证实了PUMA是细胞凋亡必需介导者，具有强大的促凋亡能力，但对于该基因在细胞凋亡信号通路及与其他分子间的相互作用等方面还有待于进一步深入研究和阐明。随着时间的推移将会更加明确PUMA相关信号通路，发现更多可诱导PUMA 活化的DNA元件、转录因子以及更多新颖的调控制，DNA元件和转录因子诱导PUMA在肿瘤细胞内的表达，可能为治疗肿瘤提供新思路。随着PUMA研究的不断深入必将给肿瘤的治疗带来更多的希望和惊喜。

PUMA兔单克隆抗体可用于荧光激活细胞分选、免疫细胞化学/免疫荧光、免疫组化—PFA固定细胞、免疫沉淀等。基于序列分析检测预测该抗体有两种同种型。免疫原对应于人PUMA的C末端残基的合成肽。推荐的起始稀释液：适用于WB稀释度为1：1000-5000，用于IHC稀释度为1：100-250，用于ICC稀释度为1：250-500，用于FACS稀释度为1：30，对于IP以1:50的稀释度，使用对于特定应用，工作稀释度应由研究者确定。注PUMA兔单克隆抗体仅适用于体外实验，不适用于人类或动物的任何临床，治疗或诊断用途。不适合动物或人类食用。

应用

1. 在生物标记物开发中的应用

兔单克隆抗体包括PUMA兔单克隆抗体广泛用于生命科学研究的各个领域，尤其在免疫组织化学以及检测蛋白的转译后修饰方面具有独特优势。至今已有100多种兔单克隆抗体开发用于癌症的IHC临床诊断与研究，其中最具代表性的就是Her2和c-Kit的IHC诊断试剂盒。在蛋白修饰研究领域，如蛋白的磷酸化，在与疾病相关的蛋白质信号通路中起到了至关重要的作用，使用磷酸化蛋白的兔单克隆抗体可以非常清楚地显示蛋白的磷酸化程度。目前已有200多种磷酸化特异性的兔单克隆抗体面世。

2. 在治疗抗体药物开发中的应用

临床使用的大多数治疗用抗体均需经体外亲和力成熟这一步骤，以提高抗体的亲和力。这一过程常需8至12个月，最终亲和力在纳摩尔级(10-9 mol/L)。兔单抗不需使用体外亲和力成熟，就能达到10-11至10-13 mol/L。这种高亲和力不仅减少抗体的临床使用量，还能减少由于使用大量抗体带来的副作用。但这种高亲和力的优势还需在动物和临床试验中进一步证实。

另外，与鼠单抗的人源化相比，兔单克隆抗体的人源化更容易。因为，兔单克隆抗体主要由一种重链及轻链基因构成，通过分析大量的兔单克隆抗体序列发现，兔与人的抗体同源性更高，约60%～76%，而小鼠与人的抗体同源性略低，为57%～72%，说明用兔单克隆抗体开发药物前景更广阔。

主要参考资料

[1] 李婷婷，崔慧斐. 兔单克隆抗体的发展及应用前景[J]. 食品与药品，2012，14(9)： 373-376.

[2] 黄伟, 万福生. PUMA 蛋白结构与功能研究进展[J]. 中华肿瘤防治杂志, 2013, 20(11): 873-876.