基质金属蛋白酶-2(抗体)的应用

背景^[1-3]

基质金属蛋白酶-2(抗体)是一类可以特异性结合基质金属蛋白酶-2的多克隆抗体，主要用于体外检测基质金属蛋白酶-2的免疫学实验。

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase），基质金属蛋白酶是一个大家族，因其需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子而得名。其家族成员具有相似的结构，一般由5个功能不同的结构域组成:（1）疏水信号肽序列;（2）前肽区，主要作用是保持酶原的稳定。当该区域被外源性酶切断后，MMPs酶原被激活;（3）催化活性区，有锌离子结合位点，对酶催化作用的发挥至关重要;（4）富含脯氨酸的铰链区;（5）羧基末端区，与酶的底物特异性有关。其中酶催化活性区和前肽区具有高度保守性。

MMPs几乎能降解细胞外基质(ECM)中的各种蛋白成分,破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障，在肿瘤侵袭转移中起关键性作用，从而在肿瘤浸润转移中的作用日益受到重视，被认为是该过程中主要的蛋白水解酶。MMPs家族已分离鉴别出26个成员，编号分别为MMP1～26。根据作用底物以及片断同源性，将MMPs分为6类，为胶原酶、明胶酶、基质降解素、基质溶解素、furin活化的MMP和其他分泌型MMP。

基质金属蛋白酶-2免疫组化

MMPs成员上述结构的基础上各有特点。各种MMP间具有一定的底物特异性，但不是绝对的。同一种MMP可降解多种细胞外基质成份，而某一种细胞外基质成分又可被多种MMP降解，但不同酶的降解效率可不同。

Ⅳ型胶原酶为其中重要的一类，它主要有两种形式，一种被糖化，分子量为92kD，命名为MMP-9;另一种非糖化，分子量为72kD，被称为MMP-2。当前对MMP-2，MMP-9的研究较深入。

MMP-2基因位于人类染色体16q21，由13个外显子和12个内含子所组成，结构基因总长度为27kb，与其他金属蛋白酶不同，MMP-2基因5’旁侧序列促进子区域含有2个GC盒而不是TATA盒。活化的MMP-2定位于细胞穿透基质的突出部位，估计其在酶解细胞间基质成分及基底膜的主要成分Ⅳ型胶原中有“钻头”的作用。

应用^[4][5]

用于光照强度对幼兔屈光发育及巩膜上基质金属蛋白酶-2表达的影响研究

探讨不同光照强度（15000lux,500lux,5lux,全光谱光,色温6000k）下幼兔的屈光发育状况,并观察幼兔巩膜组织上基质金属蛋白酶-2（Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2）的表达情况,初步探索光照强度影响屈光发育的机制。方法:将30只4周龄灰色健康幼兔随机分为三组,强光组10只,弱光组10只,正常光照组10只,分别饲养在15000lux、500lux和5lux的光照强度下,光照周期为12/12h（早6:00-晚6:00）。

光照前及光照后第4周、第8周、第12周时分别测量幼兔双眼的生物学参数（包括前房深度、晶状体厚度、玻璃体腔长度、眼轴长度、屈光度和角膜曲率）,且各组分别于光照第12周后随机处死5只幼兔,摘取双侧眼球,于光镜下观察眼球壁后极部组织形态学结构,并采用免疫组化对巩膜组织上MMP-2进行半定量分析。结果:光照前和光照后各时间点,幼兔双眼各生物学参数比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。光照前,不同组间眼球各生物学参数比较,差异无统计学意义（P>0.05）。

随着光照时间的延长,三组幼兔的前房深度、晶状体厚度、玻璃体腔长度、眼轴长度及角膜曲率半径均逐渐延长,而屈光度均逐渐降低,其中强光组分别与弱光组和正常光照组比较,强光组的玻璃体腔长度及眼轴长度增长趋势明显缓慢,屈光度下降明显减缓。光照后各时间点,不同组间前房深度、晶状体厚度及角膜曲率半径比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;光照后各时间点,强光组与正常光照组比较,玻璃体腔长度、眼轴长度及屈光度的差异均具有统计学意义（P<0.05）,而弱光组和正常光照组之间比较,差异无统计学意义（P>0.05）;光照后不同时间点前房深度、晶状体厚度及角膜曲率半径与光照前的差值间比较,各组间差异均无统计学意义（P>0.05）;光照后不同时间点,强光组和正常光照组比较,玻璃体腔长度差值、眼轴长度差值及屈光度差值的差异均具有统计学意义（P<0.05）,而弱光组与正常光照组之间比较,差异无统计学意义（P>0.05）。

光照第12周后,光镜下强光组眼球后极部视网膜神经节细胞层、内核层、外核层可见形态改变,脉络膜及巩膜未见明显病理改变,正常光照组和弱光组眼球后极部眼底结构未见明显异常。光照第12周后强光组MMP-2平均光密度值为0.3519±0.0047,弱光组为0.4142±0.0125,正常光照组为0.4078±0.0227,各组巩膜上MMP-2的平均光密度值相互比较,强光组与正常光照组、强光组与弱光组之间差异有统计学意义（P<0.05）,而弱光组与正常光照组之间差异无统计学意义（P>0.05）。

参考文献

[1]Effects of a high level of illumination before sleep at night on chorioretinal thickness and ocular biometry[J].Jaemoon Ahn,Soh-Eun Ahn,Kyung-Sook Yang,Seong-Woo Kim,Jaeryung Oh.Experimental Eye Research.2017

[2]Time spent in outdoor activities in relation to myopia prevention and control:a meta‐analysis and systematic review[J].Shuyu Xiong,Padmaja Sankaridurg,Thomas Naduvilath,Jiajie Zang,Haidong Zou,Jianfeng Zhu,Minzhi Lv,Xiangui He,Xun Xu.Acta Ophthalmologica.2017(6)

[3]Brief hyperopic defocus or form deprivation have varying effects on eye growth and ocular rhythms depending on the time-of-day of exposure[J].Debora L.Nickla,Kelsey Jordan,Jane Yang,Kristen Totonelly.Experimental Eye Research.2017

[4]The wavelength composition and temporal modulation of ambient lighting strongly affect refractive development in young tree shrews[J].Timothy J.Gawne,John T.Siegwart,Alexander H.Ward,Thomas T.Norton.Experimental Eye Research.2017

[5]严丽英.光照强度对幼兔屈光发育及巩膜上基质金属蛋白酶-2表达的影响[D].川北医学院,2018.